本文選題：骨髓間充質(zhì)干細胞 + 腦梗死��； 參考：《鄭州大學》2016年碩士論文

【摘要】：背景及目的腦梗死已成為中國人的第二位死亡原因,僅次于惡性腫瘤。隨著我國逐步進入老齡化社會,腦梗死已經(jīng)成為一個重大的社會問題。腦梗死早期炎癥反應的發(fā)生是導致神經(jīng)元死亡、機體神經(jīng)功能缺失的重要原因,抑制腦梗死早期腦組織炎癥的發(fā)生和發(fā)展能夠有效改善腦梗死后神經(jīng)功能缺損癥狀。骨髓間充質(zhì)干細胞(Bone Marrow Stromal Cells,BMSCs)是腦梗死最有前景的干細胞之一,其可通過抑制炎癥反應發(fā)揮其保護作用,但其具體機制尚未被完全闡明。HMGB1是腦梗死早期炎癥發(fā)生的重要起始因子,因此考慮抑制HMGB1的釋放是其炎癥抑制機制之一,故設計本實驗予以驗證。方法Ficoll淋巴細胞分離液梯度離心法收集小鼠骨髓單個核細胞,體外培養(yǎng)分離傳代得到BMSCs,鑒定后低溫保存;之后通過線拴法制作小鼠腦梗死模型(t MCAO),按照研究要求將小鼠隨機分為3組:假手術(shù)組,溶劑組和BMSCs移植組;尾靜脈注射移植BMSCs至移植組小鼠體內(nèi),使用TTC染色法,觀察建模情況及BMSCs對小鼠腦梗死體積的影響;各組小鼠分別進行m NSS評分,評價其神經(jīng)功能缺損癥狀;然后通過免疫熒光技術(shù),觀察小鼠大腦梗死周圍區(qū)HMGB1的釋放情況;Western Blot技術(shù)檢測腦組織TNF-α、IL-1β等炎癥因子、HMGB1及Bcl-2等蛋白的表達情況,進而綜合分析BMSCs對HMGB1釋放的影響,闡述其對腦梗死小鼠早期炎癥反應的作用機制。結(jié)果靜脈移植BMSCs能夠有效減少小鼠腦梗死腦組織體積及梗死后腦組織TNF-α、IL-1β等炎癥因子的表達;顯著改善梗死小鼠神經(jīng)功能缺損癥狀并增加抗凋亡因子Bcl-2的表達;與溶劑組相比,移植組小鼠大腦腦組織HMGB1釋放較溶劑組更少。結(jié)論BMSCs移植能通過抑制梗死早期小鼠腦組織炎癥反應的進展,顯著改善腦梗死小鼠的神經(jīng)功能缺損癥狀,這一治療作用可能與其抑制腦組織中HMGB1的釋放有關(guān)。
[Abstract]:Background and objective Cerebral infarction has become the second leading cause of death in Chinese, second only to malignant tumors. As our country gradually enters the aging society, cerebral infarction has become a major social problem. The occurrence of inflammatory reaction in the early stage of cerebral infarction is an important cause of neuronal death and loss of nervous function. Inhibiting the occurrence and development of inflammation in brain tissue in the early stage of cerebral infarction can effectively improve the symptoms of neurological deficit after cerebral infarction. Bone Marrow Stromal cells (BMSCs) is one of the most promising stem cells in cerebral infarction. It can play a protective role by inhibiting inflammatory response, but its specific mechanism has not been fully elucidated that .HMGB1 is an important initial factor of inflammation in the early stage of cerebral infarction. Therefore, one of its inflammatory inhibition mechanisms is to consider inhibiting the release of HMGB1, so this experiment is designed to verify it. Methods Mouse bone marrow mononuclear cells were collected by gradient centrifugation with Ficoll lymphocyte isolate. BMSCs were isolated and subcultured in vitro. The mice were randomly divided into three groups: sham operation group, solvent group and BMSCs transplantation group. To observe the model and the effect of BMSCs on cerebral infarction volume in mice; to evaluate the neurological deficit symptoms of mice in each group by mNSS scores; and then to evaluate the neurological deficit symptoms by immunofluorescence technique. To observe the release of HMGB1 in the cerebral infarction area of mice and to detect the expression of HMGB1, Bcl-2 and other inflammatory factors such as TNF- 偽 and IL-1 尾 in brain tissue by Western blot, and then to analyze the effect of BMSCs on HMGB1 release. The mechanism of its effect on early inflammatory reaction in mice with cerebral infarction was described. Results Venous transplantation of BMSCs could effectively reduce the volume of cerebral tissue and the expression of inflammatory factors such as TNF- 偽 and IL-1 尾 in the cerebral tissue of mice with cerebral infarction, and significantly improve the symptoms of neurological deficit and increase the expression of anti-apoptotic factor Bcl-2 in the infarcted mice. HMGB1 release from brain tissue of transplanted mice was less than that of solvent group. Conclusion BMSCs transplantation can significantly improve the neurological deficit symptoms of cerebral infarction mice by inhibiting the progress of inflammatory reaction in cerebral tissue in early stage of infarction. This therapeutic effect may be related to the inhibition of HMGB1 release in brain tissue.
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R743.3

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