本文選題：腦缺血/再灌注損傷 + 缺血后處理�。� 參考：《昆明醫(yī)科大學(xué)》2014年博士論文

【摘要】：目的：采用線栓法建立更符合人類常見缺血性卒中類型的大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO)模型,于再灌注即刻給予缺血后處理。觀察缺血后處理對(duì)大鼠腦缺血/再灌注損傷的保護(hù)作用,并尋找其有效治療時(shí)間窗。選擇一個(gè)梗死面積和神經(jīng)功能評(píng)分與缺血2h再灌注組無明顯差異的最遠(yuǎn)時(shí)間點(diǎn)給予缺血后處理,探討缺血后適應(yīng)對(duì)炎癥反應(yīng)及細(xì)胞凋亡的影響。 方法：本研究分為三部份進(jìn)行。第一部份,缺血后處理對(duì)腦缺血/再灌注損傷的保護(hù)作用的研究。建立穩(wěn)定的大鼠MCAO模型,于再灌注即刻給予缺血后處理。對(duì)單純腦缺血/再灌注組和腦缺血/再灌注合并缺血后處理組的大鼠分別實(shí)施2h、3h、4h、4.5h、6h的腦缺血處理,觀察缺血后處理對(duì)不同組大鼠腦缺血/再灌注48h后神經(jīng)功能評(píng)分、腦梗死體積和腦水腫程度的影響,尋找有效的治療時(shí)間窗。根據(jù)第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇一個(gè)梗死面積和神經(jīng)功能評(píng)分與缺血2h再灌注組無明顯差異的最遠(yuǎn)時(shí)間點(diǎn),進(jìn)行第二、三部分實(shí)驗(yàn)。第二部分,HE染色觀察大鼠腦組織的病理形態(tài)改變；采用免疫組化半定量測定腦缺血/再灌注組及腦缺血/再灌注合并缺血后處理組在2個(gè)時(shí)間點(diǎn)缺血側(cè)皮層內(nèi)TLR2和TLR4的表達(dá)變化。第三部分,采用流式細(xì)胞術(shù)、熒光定量PCR、Western-Blotting檢測腦缺血/再灌注組及腦缺血/再灌注合并缺血后處理組在2個(gè)時(shí)間點(diǎn)缺血側(cè)皮層內(nèi)TLR2和TLR4及其下游信號(hào)通路分子IRAK4和炎性細(xì)胞因子IL-1β蛋白和mRNA的表達(dá)及細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果：2h、3h、4h后處理組大鼠腦缺血/再灌注24h和48h的神經(jīng)功能評(píng)分較相同缺血時(shí)間點(diǎn)缺血組和后處理4.5h和6h組改善(p0.05)。2h、3h、4h后處理組大鼠腦缺血/再灌注48h的腦梗塞體積和相對(duì)腦水腫程度較相同缺血時(shí)間點(diǎn)缺血組和后處理4.5h和6h組明顯減輕(p0.05)。2h后處理組大鼠腦缺血/再灌注48h缺血側(cè)皮層內(nèi)TLR2和TLR4陽性細(xì)胞數(shù)量較2h缺血組和4.5h后處理組減少(p0.05)；4.5h后處理組TLR4陽性細(xì)胞數(shù)量較4.5h缺血組減少(p0.05)。2h后處理組大鼠腦缺血/再灌注48h缺血側(cè)皮層內(nèi)細(xì)胞凋亡比例較2h缺血組和4.5h后處理組明顯減少(p0.05)。2h后處理組大鼠腦缺血/再灌注48h缺血側(cè)皮層內(nèi)TLR2、TLR4、IL-1βmRNA和蛋白及IRAK4mRNA表達(dá)量較2h缺血組降低(p0.05)；2h缺血時(shí)間點(diǎn)后處理組TLR2、IL-1βmRNA和蛋白及TLR4蛋白表達(dá)量較4.5h后處理組降低(p0.05)。 結(jié)論：缺血后處理能減輕急性腦缺血/再灌注損傷,表現(xiàn)為神經(jīng)功能缺損的改善、腦梗塞體積和相對(duì)腦水腫程度的減輕,其保護(hù)作用的有效時(shí)間窗為腦缺血4.5h以內(nèi)。缺血后處理能有效改善大鼠腦缺血/再灌注損傷所致的細(xì)胞凋亡和炎癥反應(yīng),表現(xiàn)為2h后處理組缺血側(cè)皮層內(nèi)TLR2和TLR4及其下游信號(hào)通路分子IRAK4和炎性細(xì)胞因子IL-1β的表達(dá)及細(xì)胞凋亡受到明顯抑制。
[Abstract]:Aim: to establish a rat model of middle cerebral artery embolization (MCAO) which is more suitable to the common ischemic stroke type in human. To observe the protective effect of post-ischemic treatment on cerebral ischemia / reperfusion injury in rats and to find an effective time window for its treatment. A farthest time point with no significant difference between the infarct size and neurological function score and the ischemia 2 h reperfusion group was selected to study the effects of ischemic adaptation on inflammatory response and apoptosis. Methods: the study was divided into three parts. In the first part, the protective effect of post-ischemic treatment on cerebral ischemia / reperfusion injury was studied. A stable rat model of MCAO was established and treated immediately after reperfusion. The rats in the pure cerebral ischemia / reperfusion group and the cerebral ischemia / reperfusion combined with ischemic post-treatment group were treated with cerebral ischemia for 2 h, 3 h, 4 h and 4.5 h, respectively, and the neurological function scores were observed after 48 hours of cerebral ischemia / reperfusion in different groups. The effect of cerebral infarction volume and degree of cerebral edema to find an effective time window for treatment. According to the results of the first part of the experiment, a farthest time point with no significant difference between the infarct size and neurological function score and the ischemia 2h reperfusion group was selected, and the second and third parts of the experiment were carried out. The second part was to observe the histopathological changes of rat brain by HE staining. The expression of TLR2 and TLR4 in ischemic cortex of cerebral ischemia / reperfusion group and cerebral ischemia / reperfusion combined with ischemia group were measured by semi-quantitative immunohistochemical method at two time points. The third part, flow cytometry, Fluorescence quantitative PCR Western-blotting for the detection of TLR2 and TLR4 and their downstream signaling molecules IRAK4, IL-1 尾 protein and mRNA in cerebral ischemia / reperfusion group and cerebral ischemia / reperfusion combined with ischemic post-treatment group at two time points Expression and apoptosis. Results compared with ischemia group at the same ischemic time point and 4.5 h and 6 h post-treatment group, the neurological function scores of rats in the brain ischemia / reperfusion 24 h and 48 h after treatment with 1: 2 h + 3 h + 4 h improved the infarct volume and phase of cerebral ischemia / reperfusion 48h in the rats treated for 4 h after brain ischemia / reperfusion for 4 h. The amount of TLR2 and TLR4 positive cells in cerebral ischemic cortex of rats treated with cerebral ischemia / reperfusion for 48 h after cerebral ischemia and reperfusion was significantly reduced compared with that of ischemia group at 2 h and 4. 5 h and 6 h after treatment, compared with that of 2 h ischemia group and 4. 5 h post-treatment group. The number of TLR4 positive cells in the treatment group was significantly lower than that in the 4.5 h ischemia group compared with that in the 4.5 h ischemia group. The percentage of apoptosis in the ischemic cortex of the rats in the 48 h cerebral ischemia / reperfusion group was significantly lower than that in the 2 h ischemia group and the 4.5 h post-treatment group compared with the 4. 05 h ischemia group. The expression of IL-1 尾 mRNA, protein and IRAK4mRNA in the cerebral cortex of the cerebral ischemia / reperfusion 48 h group was lower than that in the 2h ischemia group. The expression of TLR2TLR4 尾 mRNA and protein and TLR4 protein in the post-treatment group was significantly lower than that in the control group (P 0.05). Conclusion: the acute cerebral ischemia / reperfusion injury can be alleviated after ischemic treatment, which is characterized by the improvement of neural function defect, the reduction of cerebral infarction volume and the relative degree of cerebral edema. The effective time window of its protective effect is within 4.5 hours of cerebral ischemia. The apoptosis and inflammatory response induced by cerebral ischemia / reperfusion injury were effectively improved after ischemic treatment in rats. The expression of TLR2, TLR4 and its downstream signaling pathway, IRAK4, IL-1 尾, and apoptosis were significantly inhibited in the ischemic cortex of 2 h post-treatment group.
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R743.3

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 呂愛剛，胡香杰，賈丹輝，張貴卿，可君;阿托品抗脂質(zhì)過氧化作用及對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J];河南醫(yī)學(xué)研究;1995年03期

2 林曉耘,尹世達(dá),蔣逸風(fēng),劉瑋,查曉冰,吳宰盛;靜脈溶栓治療急性心肌梗塞12例臨床分析[J];南京軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1995年03期

3 司良毅，張遠(yuǎn)慧，趙學(xué)，王國超;家兔心肌缺血再灌注時(shí)中性粒細(xì)胞胞漿游離鈣、MDA、SOD變化規(guī)律比較[J];中華老年醫(yī)學(xué)雜志;1996年01期

4 胡文博;錳－超氧化物歧化酶在降低缺血／再灌注損傷中的作用[J];高原醫(yī)學(xué)雜志;1996年04期

5 李美宏，，王麗萍;骨筋膜室綜合征切開減壓致再灌注損傷一例[J];山西醫(yī)藥雜志;1996年01期

6 徐月清,申文增,武變英,楊旭,繆淑娟,王志偉;當(dāng)歸、川芎嗪對(duì)家兔骨胳肌缺血再灌注損傷作用的研究[J];河北職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1996年04期

7 吳弘;細(xì)胞粘附分子與心肌缺血再灌注損傷[J];國外醫(yī)學(xué).心血管疾病分冊(cè);1997年02期

8 徐慶祥,王幼林,謝敏;四氫小檗堿對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J];藥學(xué)進(jìn)展;1998年01期

9 徐軍美;細(xì)胞凋亡與心肌缺血/再灌注損傷[J];國外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè);1999年06期

10 馬昕,王法;周圍神經(jīng)缺血再灌注損傷及藥物保護(hù)研究[J];第四軍醫(yī)大學(xué)吉林軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1999年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 蘆玲巧;于剛剛;馬立權(quán);鄭少鵬;張立克;;CYP2J3基因轉(zhuǎn)染對(duì)大鼠心肌缺血/再灌注損傷的影響[A];第七屆海峽兩岸心血管科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2009年

2 高曉霞;;心復(fù)寧Ⅰ號(hào)對(duì)急性心肌缺血/再灌注損傷大鼠心肌組織SOD、GSH-Px、MDA含量的影響[A];面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展（下冊(cè)）[C];1999年

3 翁立新;;腸缺血-再灌注損傷中原癌基因c-fos、c-jun表達(dá)的規(guī)律[A];第七屆全國創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會(huì)議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

4 王曉j;;一氧化氮在心肌缺血/再灌注不同時(shí)期的作用[A];中國生理學(xué)會(huì)張錫鈞基金會(huì)第十屆全國青年優(yōu)秀生理學(xué)學(xué)術(shù)論文綜合摘要[C];2009年

5 王扙;吳瓊;翟原;李子楠;;心肌缺血/再灌注損傷中CXCR3趨化因子作用的研究[A];第十次中國中西醫(yī)結(jié)合微循環(huán)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

6 王姿穎;張岫美;魏欣冰;;化合物N-2035對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[A];中國藥理學(xué)會(huì)第八次全國代表大會(huì)暨全國藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2002年

7 王姿穎;張岫美;魏欣冰;;化合物N-2035對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[A];中國藥理學(xué)會(huì)第八次全國代表大會(huì)論文摘要集（第二部分）[C];2002年

8 王瑞華;王正峰;韓星敏;;Bcl-2過表達(dá)對(duì)體外缺血/再灌注損傷引起的大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國核醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2011年

9 劉書馨;陳香美;尹忠;呂楊;師鎖柱;劉維萍;;大鼠腎臟缺血／再灌注損傷E-cadherin表達(dá)的變化[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟病學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

10 王洋;李輝;侯生才;胡濱;李彤;張振葵;游賓;付毅力;;銀杏提取物對(duì)兔肺缺血/再灌注損傷時(shí)Fas/FasL基因表達(dá)的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國胸心血管外科學(xué)術(shù)會(huì)議暨2007中華醫(yī)學(xué)會(huì)胸心血管外科青年醫(yī)師論壇論文集心血管外科分冊(cè)[C];2007年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 李振彬；李佃貴；李俊俠;清心飲抗心肌缺血/再灌注損傷[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年

2 段曉宏;“一氧化氮及其活性氮介質(zhì)在缺血/再灌注心肌損傷中的作用及機(jī)制研究”獲獎(jiǎng)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年

3 趙強(qiáng) 楊聲瑞;腎缺血／再灌注損傷研究出新[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

4 ;脊髓再灌注損傷后細(xì)胞間黏附分子－1和白細(xì)胞介素－1β的表達(dá)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

5 陶春祥;何占德;中藥單體防治心肌缺血/再灌注損傷[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

6 ;針刺對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

7 ;氨力農(nóng)對(duì)大鼠離體心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

8 劉景峰;聚焦心肺移植[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年

9 王振嶺邋周文平 范俊利;寒涼抗蛇毒中藥具有抗心肌缺血作用[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2007年

10 胥曉琦 本報(bào)記者;風(fēng)光重現(xiàn)于“后再灌注時(shí)代”[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 張寶良;大鼠供肝熱缺血損傷誘發(fā)肝移植術(shù)后膽汁淤積的實(shí)驗(yàn)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

2 張紅星;電針抗家兔心肌缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2003年

3 程峰;肝臟缺血再灌注損傷及益生注射液的干預(yù)機(jī)理研究[D];四川大學(xué);2004年

4 韓笑;中藥有效組分配伍方劑對(duì)心肌缺血再灌注性損傷的干預(yù)機(jī)制[D];中國中醫(yī)研究院;2005年

5 方軍;缺血后處理減輕大鼠心肌缺血/再灌注損傷及其增強(qiáng)干細(xì)胞治療心肌梗死效果[D];福建醫(yī)科大學(xué);2009年

6 藍(lán)榮培;金屬硫蛋白保護(hù)腎臟缺血/再灌注損傷及對(duì)免疫系統(tǒng)的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

7 張公文;銀杏葉提取物對(duì)大鼠心臟移植心肌細(xì)胞凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2004年

8 李瑞華;高位斷肢再植術(shù)中再灌注前減張的實(shí)驗(yàn)研究和臨床應(yīng)用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

9 劉乃紅;EphA4-ephrinA3系統(tǒng)在大鼠短暫前腦缺血/再灌注引起的海馬區(qū)神經(jīng)元遲發(fā)性死亡中的作用研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

10 王文生;四氫生物蝶呤抗心肌缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2004年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 劉建勇;參附注射液對(duì)兔肢體缺血再灌注損傷的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2004年

2 羅從娟;阿魏酸鈉對(duì)大鼠腎臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[D];吉林大學(xué);2007年

3 陳聰聰;烏司他丁對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究[D];浙江大學(xué);2003年

4 張寶紅;藥物預(yù)處理與缺血預(yù)處理對(duì)心肌缺血再灌注損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2003年

5 徐雋;蘄蛇酶對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制[D];福建醫(yī)科大學(xué);2004年

6 馮艷;大鼠肝缺血再灌注損傷iNOS、C-fos、Bcl-2在心肌組織的表達(dá)及與心肌細(xì)胞凋亡的關(guān)系[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2003年

7 周勇;褪黑素對(duì)大鼠肝缺血/再灌注損傷后腎功能的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

8 衣秀娜;氯胺酮對(duì)止血帶引起的肢體缺血再灌注炎性細(xì)胞因子和自由基的影響[D];青島大學(xué);2005年

9 李紅;山楂葉總黃酮對(duì)腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[D];吉林大學(xué);2007年

10 王雷;缺血后處理的心肌保護(hù)作用及其機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

本文編號(hào)：1926504