本文選題：腦動(dòng)脈粥樣硬化 + 肝細(xì)胞生長因子��； 參考：《新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院》2014年碩士論文

【摘要】：背景肝細(xì)胞生長因子(Hepatocyte growth factor,HGF)具有較強(qiáng)的促血管生成作用,目前構(gòu)建的人肝細(xì)胞生長因子重組腺病毒(Adenovirus vector encoding HGF gene, Ad-HGF)已進(jìn)入臨床Ⅱ期心肌缺血和骨骼肌缺血治療并獲良好評價(jià)而居國際領(lǐng)先地位。轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)為腦動(dòng)脈粥樣硬化(Cerebral atherosclerosis,CAS)關(guān)鍵因子,與HGF的相互作用效應(yīng)依細(xì)胞環(huán)境、不同細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)主要活性因子不同而不同,我們推測外源性HGF可能重建老齡CAS狀態(tài)下HGF-TGF-β1平衡而對腦血管新生可能具有重要調(diào)控作用。 目的通過蛛網(wǎng)膜下腔注射外源性Ad-HGF觀察其促腦血管新生和神經(jīng)保護(hù)的作用,探討HGF-TGF-β1相互間作用關(guān)系與促老齡CAS大鼠腦血管新生的相關(guān)性。 方法我們采用高血壓合并高血脂喂養(yǎng)法構(gòu)建老齡腦動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型。通過蛛網(wǎng)膜下腔注射不同劑量Ad-HGF,分別于第10d、20d、30d抽取腦脊液后處死大鼠后取腦組織,通過免疫熒光法觀察腦組織中CD31表達(dá)情況；通過免疫組織化學(xué)染法觀察腦組織中膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)及HGF、TGF-β1表達(dá)情況；通過酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunoadsorption assay, ELISA)檢測腦脊液中HGF、TGF-β1濃度；免疫蛋白印跡法(western blotting, WB)法檢測腦組織中HGF、TGF-β1蛋白表達(dá)情況。 結(jié)果 1、大鼠血壓、血脂值明顯高于實(shí)驗(yàn)前,頸部血管HE染色可見粥樣斑塊形成。 2、在大鼠腦室內(nèi)的脈絡(luò)膜細(xì)胞及雙側(cè)側(cè)腦室壁均可見熒光蛋白的表達(dá),表達(dá)時(shí)間持續(xù)2w左右。 3、同一時(shí)間點(diǎn),隨著Ad-HGF劑量的增加,腦組織中CD31陽性細(xì)胞數(shù)逐漸增加,CD31陽性細(xì)胞數(shù)呈一定劑量依賴性,差異均有顯著性(F10=34.365, P100.001; F20=144.791, P200.001;F30=73.832, P300.001)。4、同一時(shí)間點(diǎn),隨著Ad-HGF劑量的增加,腦組織中GFAP陽性細(xì)胞數(shù)逐漸增加,GFAP陽性細(xì)胞數(shù)呈一定劑量依賴性,差異均有顯著性(F10=182.174, P100.001; F20=409.529, P200.001; F30=278.386, P300.001)。 5、同一時(shí)間點(diǎn),隨著Ad-HGF劑量的增加,腦組織中HGF平均光密度值逐漸增加,HGF平均光密度值呈一定劑量依賴性,差異均有顯著性(F10=3309.945,P100.001；F20=2799.429, P200.001; F30=1715.945, P300.001)。同一時(shí)間點(diǎn),隨著Ad-HGF劑量的增加,腦組織中TGF-β1平均光密度值逐漸增加,TGF-β1平均光密度值呈一定劑量依賴性,差異均有顯著性(F10=7542.409, P100.001; F20=7895.557, P200.001; F30=15142.692, P300.001)。 6、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測：同一時(shí)間點(diǎn),隨著Ad-HGF劑量的增加,腦脊液中HGF濃度值逐漸增加,HGF濃度值呈一定劑量依賴性,差異均有顯著性(F1o=375.347, P100.001; F20=394.235, P200.001; F30=181.834, P300.001)。同一時(shí)間點(diǎn),隨著Ad-HGF劑量的增加,腦脊液中TGF-β1濃度值逐漸降低,TGF-β1濃度值呈一定劑量依賴性,差異均有顯著性(F10=58.223, P100.001; F20=43.319, P200.001; F30=64.199, P300.001)。 7、同一時(shí)間點(diǎn),隨著Ad-HGF劑量的增加,腦組織中HGFOD值逐漸增加,HGFOD值呈一定劑量依賴性,差異均有顯著性(F10=399.659, P100.001; F20=295.420, P200.001; F30=302.797, P300.001)。隨著Ad-HGF劑量的增加,腦組織中TGF-β1OD值逐漸增加,TGF-β1值呈一定劑量依賴性,差異均有顯著性(F10=3096.724,P100.001; F20=663.090, P200.001; F30=34933.681, P300.001)。 結(jié)論 1、采用高血壓合并高血脂喂養(yǎng)可成功建立大鼠CAS模型。 2、HGF具有促血管新生作用。 3.、外源性HGF可導(dǎo)致神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞變化。 4、外源性HGF可降低TGF-β1表達(dá),對HGF促血管新生具有一定的促進(jìn)作用。
[Abstract]:Background hepatocyte growth factor ( HGF ) has a strong angiogenic effect . Currently , human hepatocyte growth factor recombinant adenovirus ( Ad - HGF ) has entered clinical stage 鈪，

本文編號：1919439