本文選題：蛛網(wǎng)膜下腔出血 + 早期腦損傷��； 參考：《浙江大學(xué)》2014年博士論文

【摘要】：研究背景 蛛網(wǎng)膜下腔出血約占全部腦卒中的5%-10%,其中大部分的出血原因?yàn)轱B內(nèi)動(dòng)脈瘤破裂。過(guò)去數(shù)十年來(lái),腦血管痙攣和動(dòng)脈瘤破裂再出血一直被認(rèn)為是導(dǎo)致高死亡和高致殘的一個(gè)主要因素。但多中心的臨床試驗(yàn)研究表明遲發(fā)性血管痙攣的減輕并沒(méi)有改善蛛網(wǎng)膜下腔出血患者的預(yù)后。因此有學(xué)者提出了早期腦損傷是蛛網(wǎng)膜下腔出血致死致殘的主要原因。 早期腦損傷這一概念指從蛛網(wǎng)膜下腔出血開(kāi)始至72小時(shí)這一時(shí)間窗之內(nèi)的腦損傷。目前對(duì)蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷的病理生理學(xué)機(jī)制已經(jīng)有了初步的認(rèn)識(shí),主要包括顱內(nèi)壓升高、腦血流量降低、腦灌注壓下降、有氧呼吸的抑制、血腦屏障破壞、腦水腫及神經(jīng)元的死亡。然而,具體的損傷機(jī)制及信號(hào)通路還需要進(jìn)一步的深入研究。 丙戊酸是臨床上治療癲癇和雙向情感障礙的一線藥物,近年來(lái)的研究表明其有神經(jīng)保護(hù)作用。丙戊酸在MCAO腦缺血模型、顱腦外傷模型、脊髓損傷模型中均能減輕神經(jīng)損傷,改善神經(jīng)功能。其可能的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制：保護(hù)血腦屏障,抑制炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)、炎癥因子的表達(dá),減少細(xì)胞凋亡等。 本研究中我們將在蛛網(wǎng)膜下腔出血模型中探討丙戊酸的神經(jīng)保護(hù)作用,并通過(guò)檢測(cè)血腦屏障和細(xì)胞凋亡兩方面來(lái)明確丙戊酸的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)方法 1.采用線栓穿刺法制作蛛網(wǎng)膜下腔出血模型,成年雄性SD大鼠被隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham組),蛛網(wǎng)膜下腔出血+生理鹽水組(SAH+Vehicle組)和蛛網(wǎng)膜下腔出血+丙戊酸組(SAH+VPA組),術(shù)后24小時(shí)通過(guò)對(duì)死亡率,神經(jīng)功能缺陷評(píng)分,腦水腫含量進(jìn)行測(cè)定來(lái)檢測(cè)腦損傷程度。 2.成年雄性SD大鼠被隨機(jī)分為假手術(shù)組,蛛網(wǎng)膜下腔出血+生理鹽水組和蛛網(wǎng)膜下腔出血+丙戊酸組,術(shù)后24小時(shí)測(cè)量腦組織Evans blue含量,免疫組織化學(xué)檢測(cè)IgG染色和MMP9細(xì)胞定位,巨噬細(xì)胞計(jì)數(shù),采用RT-PCR測(cè)量炎癥因子(MMP9, IL-1β, IL-6, TNF-α)的基因表達(dá),Western blot檢測(cè)蛋白(pERKl/2, MMP9, Occludin, Claudin-5)的表達(dá),明膠酶譜檢測(cè)MMP9的活性。 3.成年雄性大鼠被隨機(jī)分為假手術(shù)組,蛛網(wǎng)膜下腔出血+生理鹽水組和蛛網(wǎng)膜下腔出血+丙戊酸組,術(shù)后24小時(shí)采用Western blot檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白(Bcl-2,cleaved caspase3)以及HSP70, pAkt蛋白的表達(dá),TUNEL法測(cè)定細(xì)胞凋亡程度。 結(jié)果 1、術(shù)后24小時(shí)SAH+VPA治療組神經(jīng)功能較SAH+Vehicle組明顯改善(P0.05),SAH+VPA治療組的腦水含量較SAH+Vehicle組明顯減少(P0.05),但兩組間死亡率沒(méi)有明顯差別。 2、術(shù)后24小時(shí)腦組織中Evans blue含量SAH+VPA組明顯少于SAH+Vehicle組(P0.05), IgG染色和腦實(shí)質(zhì)內(nèi)的巨噬細(xì)胞數(shù)SAH+VPA組明顯少于SAH+Vehicle組,MMP9主要定位于神經(jīng)元和血管內(nèi)皮細(xì)胞,炎癥因子(MMP9, IL-1β, IL-6, TNF-α)的基因表達(dá)在SAH+VPA組也明顯減少。明膠酶譜實(shí)驗(yàn)表明SAH+VPA組的MMP9活性明顯低于SAH+Vehicle組(P0.05),western blot提示緊密連接蛋白(occluding、claudin-5) SAH+VPA組明顯高于SAH+Vehicle組(P0.05),而蛋白pERK1/2, MMP9的水平則相反。 3、術(shù)后24小時(shí)SAH+VPA組的HSP70, pAkt, Bcl-2蛋白表達(dá)量明顯高于SAH+Vehicle組(P0.05), cleaved caspase3的蛋白表達(dá)量SAH+VPA組明顯少于SAH+Vehicle組(P0.05), SAH組和VPA組均出現(xiàn)細(xì)胞凋亡,但SAH+VPA組凋亡指數(shù)明顯低于SAH+Vehicle組(P0.05)。 結(jié)論 1.丙戊酸在蛛網(wǎng)膜下腔出血后急性期減輕了腦組織水腫,并改善大鼠神經(jīng)功能。 2.丙戊酸減輕了蛛網(wǎng)膜下腔出血后血腦屏障的破壞,抑制炎癥細(xì)胞的侵入。 3.丙戊酸激活A(yù)kt通路,增強(qiáng)HSP70蛋白的表達(dá)來(lái)減少細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Research background
Subarachnoid hemorrhage accounts for about 5%-10% of all stroke, most of which are caused by ruptured intracranial aneurysms. Over the past few decades, cerebral vasospasm and aneurysm rupture and rebleeding have been considered as a major cause of high death and high disability. However, a multicenter clinical trial indicates delayed vasospasm. Reduction did not improve the prognosis of patients with subarachnoid hemorrhage. Therefore, some scholars suggested that early brain injury is the main cause of sublethal hemorrhage.
The concept of early brain injury refers to brain damage from the beginning of subarachnoid hemorrhage to 72 hours. The pathophysiological mechanism of early brain injury after subarachnoid hemorrhage has been preliminarily recognized, including intracranial pressure, cerebral blood flow, cerebral perfusion pressure, inhibition of aerobic respiration, and blood brain. Barrier destruction, brain edema and neuronal death. However, specific injury mechanisms and signaling pathways need further in-depth study.
Valproic acid is a first-line drug in the clinical treatment of epilepsy and bipolar disorder. Recent studies have shown that it has neuroprotective effects. Valproic acid can reduce nerve damage and improve nerve function in the MCAO cerebral ischemia model, brain injury model, and spinal cord injury model. The possible neuroprotective mechanism: protecting the blood brain barrier and inhibiting inflammation Infiltration of cells, expression of inflammatory factors, and reduction of apoptosis.
In this study, we will explore the neuroprotective effect of valproic acid in the subarachnoid hemorrhage model and identify the neuroprotective mechanism of valproic acid by detecting the blood brain barrier and apoptosis in two aspects.
Experimental method
1. the adult male SD rats were randomly divided into sham operation group (group Sham), subarachnoid hemorrhage + physiological saline group (group SAH+Vehicle) and subarachnoid hemorrhage + valproic acid group (group SAH+VPA). The mortality, neurological deficit score and brain edema were measured at 24 hours after operation. The degree of brain damage was determined.
2. adult male SD rats were randomly divided into sham operation group, subarachnoid hemorrhage + physiological saline group and subarachnoid hemorrhage + valproic acid group. The content of Evans blue in brain tissue was measured at 24 hours after operation. Immunohistochemistry was used to detect IgG staining and MMP9 cell location, macrophage count, and RT-PCR measurement of inflammatory factors (MMP9, IL-1 beta, IL-6, TNF-). Gene expression, Western blot detection of pERKl/2 (MMP9, Occludin, Claudin-5) expression, gelatinase spectrum detection MMP9 activity.
3. adult male rats were randomly divided into sham operation group, subarachnoid hemorrhage + physiological saline group and subarachnoid hemorrhage + valproic acid group. 24 hours after operation, Western blot was used to detect apoptosis related protein (Bcl-2, cleaved Caspase3), HSP70, pAkt protein expression, and TUNEL method was used to determine the degree of apoptosis.
Result
1, 24 hours after the operation, the nerve function in the SAH+VPA group was significantly better than that in the SAH+Vehicle group (P0.05). The brain water content in the SAH+VPA group was significantly lower than that in the SAH+Vehicle group (P0.05), but there was no significant difference in the mortality rate between the two groups.
2, the content of Evans blue in group SAH+VPA was significantly less than that in group SAH+Vehicle (P0.05) after 24 hours of operation, and the number of SAH+VPA in IgG staining and the number of macrophages in brain parenchyma was significantly less than that in group SAH+Vehicle, MMP9 mainly located in neurons and vascular endothelial cells, and the gene expression of inflammatory factors (MMP9, IL-1 beta, IL-6, and alpha) was also significantly reduced. The MMP9 activity of the SAH+VPA group was significantly lower than that of the SAH+Vehicle group (P0.05), and Western blot suggested that the SAH+VPA group of the tightly connexin (occluding, claudin-5) was obviously higher than the SAH+Vehicle group (P0.05), but the level of protein pERK1/2 was the opposite.
3, the expression of HSP70, pAkt, Bcl-2 protein in group SAH+VPA was significantly higher than that in group SAH+Vehicle (P0.05), and the expression of cleaved Caspase3 in SAH+VPA group was significantly less than that in SAH+Vehicle group (P0.05).
conclusion
1. valproic acid alleviated brain edema and improved neurological function in acute phase after subarachnoid hemorrhage.
2. valproic acid alleviated the destruction of blood-brain barrier after subarachnoid hemorrhage and inhibited the invasion of inflammatory cells.
3. valproic acid activates the Akt pathway and enhances the expression of HSP70 protein to reduce apoptosis.

【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R743.35

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王永新;蛛網(wǎng)膜下腔出血致心電圖出現(xiàn)心梗樣改變1例[J];山東醫(yī)藥;2000年11期

2 王頂秀,劉舉祥,車(chē)峰遠(yuǎn),李德香;以精神異常為首發(fā)癥狀的蛛網(wǎng)膜下腔出血35例誤診分析[J];山東醫(yī)藥;2000年14期

3 王建明,周晴華,劉正松;蛛網(wǎng)膜下腔出血后遲發(fā)性腦血管痙攣40例臨床分析[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2000年06期

4 藍(lán)健;老年人蛛網(wǎng)膜下腔出血30例臨床分析[J];廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年02期

5 劉魯霞,程顯山;蛛網(wǎng)膜下腔出血的護(hù)理[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).護(hù)理學(xué)分冊(cè);2000年05期

6 張珍先,馮靜克,宋穎民;中西醫(yī)結(jié)合治療蛛網(wǎng)膜下腔出血50例[J];國(guó)醫(yī)論壇;2000年05期

7 鄭繪春;蛛網(wǎng)膜下腔出血患者數(shù)字減影血管造影的護(hù)理[J];黑龍江護(hù)理雜志;2000年03期

8 郭仁永,樊斌,劉韌;老年人蛛網(wǎng)膜下腔出血165例臨床分析[J];河南實(shí)用神經(jīng)疾病雜志;2000年04期

9 亢小迪;老年人蛛網(wǎng)膜下腔出血29例臨床分析[J];河南實(shí)用神經(jīng)疾病雜志;2000年05期

10 廖紀(jì)華;21例蛛網(wǎng)膜下腔出血誤診分析[J];衡陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2000年05期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 胡彩花;;蛛網(wǎng)膜下腔出血患者絕對(duì)臥床認(rèn)知程度的調(diào)查及護(hù)理干預(yù)[A];2009年浙江省神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

2 魏梁鋒;王守森;張小軍;鄭兆聰;洪景芳;;腦靜脈竇血栓形成致蛛網(wǎng)膜下腔出血臨床分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

3 許象成;俞先海;俞衛(wèi)東;張飚;;16例蛛網(wǎng)膜下腔出血致死的分析研究[A];第五次全國(guó)法醫(yī)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];1996年

4 莊景甫;;蛛網(wǎng)膜下腔出血影響預(yù)后的因素[A];華東地區(qū)第二次急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];1993年

5 羅長(zhǎng)榮;;老年人蛛網(wǎng)膜下腔出血臨床分析[A];2000年全國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2000年

6 袁志新;;談蛛網(wǎng)膜下腔出血[A];全國(guó)第六次法醫(yī)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要集[C];2000年

7 邵宏元;路順義;張振國(guó);孫利明;;78例自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血預(yù)后分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

8 師桂萍;潘登;薛釙;;以眩暈為主要癥狀的老年蛛網(wǎng)膜下腔出血25例臨床誤診分析[A];第七屆全國(guó)老年醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨海內(nèi)外華人老年醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

9 陶靜;李從海;;老年蛛網(wǎng)膜下腔出血36例臨床診治分析[A];第五屆全國(guó)老年醫(yī)學(xué)進(jìn)展學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

10 劉丹;包秀榮;張敏;;顱內(nèi)靜脈竇血栓形成誤診為蛛網(wǎng)膜下腔出血9例分析[A];第三屆全國(guó)少數(shù)民族地區(qū)神經(jīng)病學(xué)會(huì)論文匯編[C];2005年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 黃遠(yuǎn)桃;老人蛛網(wǎng)膜下腔出血易誤診[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2004年

2 霍濱;蛛網(wǎng)膜下腔出血可呈現(xiàn)癲癇發(fā)作[N];健康報(bào);2006年

3 白軼南;蛛網(wǎng)膜下腔出血后易復(fù)發(fā)[N];健康時(shí)報(bào);2007年

4 禾豐;頭痛與蛛網(wǎng)膜下腔出血[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2007年

5 指導(dǎo)專(zhuān)家 第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院腦血管病醫(yī)院第三科主任 蔣曉江 記者 李艷 通訊員 朱廣平;蛛網(wǎng)膜下腔出血 保守治療風(fēng)險(xiǎn)高[N];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2006年

6 王惠英 臧海玉;精神異常者要警惕蛛網(wǎng)膜下腔出血[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2004年

7 衣曉峰　王慧穎 記者 韓雪;蛛網(wǎng)膜下腔出血研究獲突破[N];黑龍江日?qǐng)?bào);2011年

8 霍濱;蛛網(wǎng)膜下腔出血也可表現(xiàn)為癲癇發(fā)作[N];家庭醫(yī)生報(bào);2005年

9 趙強(qiáng) 楊聲瑞;蛛網(wǎng)膜下腔出血治療技術(shù)創(chuàng)新[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

10 ;蛛網(wǎng)膜下腔出血急救方法[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 于濤;兔蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦微循環(huán)改變的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2005年

2 荊朝暉;自噬在大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中的作用及機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2012年

3 李志清;蛛網(wǎng)膜下腔出血后血腦屏障通透性變化及其調(diào)控機(jī)制研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2010年

4 史煥昌;Celecoxib對(duì)實(shí)驗(yàn)性蛛網(wǎng)膜下腔出血腦血管痙攣?zhàn)饔醚芯縖D];四川大學(xué);2006年

5 于耀宇;蛛網(wǎng)膜下腔出血的分子病理及腰池引流的基礎(chǔ)與臨床研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

6 李平;蛛網(wǎng)膜下腔出血的基礎(chǔ)和臨床研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

7 高陽(yáng);依達(dá)拉奉治療大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血神經(jīng)保護(hù)機(jī)制的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2008年

8 陳笛;藁苯內(nèi)酯對(duì)大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

9 徐寧;蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣的診斷與治療的相關(guān)研究[D];吉林大學(xué);2004年

10 吳騁;丙戊酸在大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 柳敬偉;206例蛛網(wǎng)膜下腔出血臨床分析[D];吉林大學(xué);2009年

2 譚相如;261例蛛網(wǎng)膜下腔出血臨床分析[D];大連醫(yī)科大學(xué);2010年

3 韋博;動(dòng)脈瘤蛛網(wǎng)膜下腔出血病人血鈉變化對(duì)臨床預(yù)后是否存在預(yù)測(cè)意義[D];吉林大學(xué);2006年

4 郭偉;硫酸鎂在蛛網(wǎng)膜下腔出血后作用的初步探討[D];石河子大學(xué);2011年

5 劉玉武;大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦組織中神經(jīng)元凋亡和水腫的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2008年

6 李連峰;生物電阻抗斷層成像技術(shù)對(duì)豬蛛網(wǎng)膜下腔出血模型早期監(jiān)護(hù)的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

7 徐遠(yuǎn)勝;蛛網(wǎng)膜下腔出血對(duì)心臟的影響52例分析[D];浙江大學(xué);2007年

8 梁宇杰;中青年蛛網(wǎng)膜下腔出血病因及臨床特點(diǎn)分析[D];山西醫(yī)科大學(xué);2004年

9 邵偉;大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血?jiǎng)游锬Ｐ偷慕⒓耙葝u素樣生長(zhǎng)因子-1的表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2004年

10 金清東;蛻皮甾酮對(duì)蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2007年

，

本文編號(hào)：1844109