本文選題：多巴胺 + 谷氨酸��； 參考：《中國病理生理雜志》2017年10期

【摘要】：目的:研究多巴胺(dopamine,DA)對星形膠質(zhì)細胞谷氨酸(glutamate,Glu)攝取能力的影響,以及DA通過哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)-興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運體2(EAAT2)信號通路對星形膠質(zhì)細胞Glu攝取能力的影響。方法:采用Amplex Red谷氨酸測定試劑盒檢測經(jīng)過干預的原代皮層星形膠質(zhì)細胞對Glu攝取含量的變化,RT-q PCR、Western blot和免疫熒光染色等檢測EAAT2和m TOR mRNA和蛋白質(zhì)相對表達量,m TOR拮抗劑雷帕霉素或m TOR興奮劑MHY1485干預在DA中共培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細胞,檢測m TOR和EAAT2的表達情況,以及培養(yǎng)上清液Glu的含量。結(jié)果:DA干預的原代星形膠質(zhì)細胞中m TOR表達下調(diào),EAAT2表達下調(diào),培養(yǎng)上清液Glu水平上升;雷帕霉素干預后,EAAT2表達下調(diào),培養(yǎng)上清液中Glu的含量增加;MHY1485干預后,EAAT2表達上調(diào),培養(yǎng)上清液中Glu的含量下降。結(jié)論:DA通過與星形膠質(zhì)細胞m TOR-EAAT2通路相互作用,減弱星形膠質(zhì)細胞攝取Glu的能力,引起細胞外Glu蓄積,最終損傷星形膠質(zhì)細胞的功能。
[Abstract]:Aim: to study the effect of dopamine dopamine (DA) on the glutamate glutamate (Glu) uptake in astrocytes and the effect of DA on the Glu uptake of astrocytes through the mammalian Rapamycin target protein (ORM) -excitatory amino acid transporter (2EAAT2) signaling pathway. Methods: the changes of Glu uptake by primary cortical astrocytes were detected by Amplex Red assay kit. The relative expression of EAAT2 and m TOR mRNA and protein were detected by RT-PCR blot and immunofluorescence staining. The antagonist rapamycin or m TOR stimulant MHY1485 interfered with astrocytes co-cultured in DA. The expression of m TOR and EAAT2 and the content of Glu in culture supernatant were detected. Results the expression of m TOR was down-regulated and the level of Glu in culture supernatant was increased in primary astrocytes treated with 1: DA, and the expression of Glu in culture supernatant was increased after intervention of rapamycin, and the expression of Glu in culture supernatant increased after intervention by MHY1485, and the expression of EAAT2 increased after intervention by rapamycin. The content of Glu in culture supernatant decreased. Conclusion by interacting with the m TOR-EAAT2 pathway of astrocytes, the ability of Glu uptake by astrocytes is weakened, and the accumulation of extracellular Glu is induced and the function of astrocytes is damaged.
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院浙江省神經(jīng)老化與疾病研究重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No.81671042;No.81300308)
【分類號】：R741

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本文編號：1800744