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化學方法體外誘導大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞成神經(jīng)樣細胞分化

發(fā)布時間:2018-04-19 06:55

  本文選題:骨髓間充質(zhì)干細胞 + 神經(jīng)細胞; 參考:《生物技術(shù)通訊》2017年06期


【摘要】:目的:研究化學方法體外誘導大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)樣細胞的可持續(xù)性分化。方法:體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞至P5代,流式細胞術(shù)檢測細胞表面標志物,將細胞分為丁羥茴醚(BHA)誘導組、β巰基乙醇(BME)誘導組和對照組,分別進行化學誘導分化,通過熒光定量PCR、Western印跡和免疫細胞化學法分別檢測巢蛋白、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)等神經(jīng)細胞標志分子的表達情況。結(jié)果:BHA誘導組高表達GFAP,而BME誘導組高表達巢蛋白,2組NSE表達均較弱;同時在誘導結(jié)束后繼續(xù)培養(yǎng)的過程中,2組神經(jīng)標志分子表達量持續(xù)降低。結(jié)論:2種方法都能誘導骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)樣細胞分化,但分化結(jié)局不同,BHA誘導分化后細胞主要表達星形膠質(zhì)細胞表面標志GFAP,而BME誘導分化后細胞主要表達神經(jīng)前體細胞表面標志巢蛋白;此外,通過化學方法誘導分化的效果是不可持續(xù)的,在誘導結(jié)束后繼續(xù)培養(yǎng)的過程中神經(jīng)標志分子表達逐漸下調(diào)。
[Abstract]:Aim: to study the sustainable differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells into neural like cells induced by chemical method in vitro.Methods: rat bone marrow mesenchymal stem cells were cultured to P5 passage in vitro. The cell surface markers were detected by flow cytometry. The cells were divided into three groups: BHA-induced group, BME-induced group and control group. The cells were chemically induced and differentiated.The expression of nestin, neuron-specific enolase (NSEE) and glial fibrillary acidic protein (GFAP) were detected by Western blot and immunocytochemistry, respectively.Results the expression of GFAP was higher in BHA group than that in NSE group in BME group, and the expression of nerve marker molecules in group 2 decreased continuously during the further culture after the induction.Conclusion both methods can induce the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into neural like cells.However, the cells with different differentiation outcomes mainly expressed the astrocyte surface marker GFAP, while the BME induced differentiation cells mainly expressed the neural precursor cell surface marker nestin.The effect of inducing differentiation by chemical method was not sustainable, and the expression of neural markers was gradually down-regulated during the process of further culture after induction.
【作者單位】: 鄭州大學第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【基金】:河南省衛(wèi)生廳中青年科技創(chuàng)新人才項目
【分類號】:R329.2

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本文編號:1772042

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