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化學(xué)方法體外誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成神經(jīng)樣細(xì)胞分化

發(fā)布時(shí)間:2018-04-19 06:55

  本文選題:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 + 神經(jīng)細(xì)胞 ; 參考:《生物技術(shù)通訊》2017年06期


【摘要】:目的:研究化學(xué)方法體外誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞的可持續(xù)性分化。方法:體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞至P5代,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物,將細(xì)胞分為丁羥茴醚(BHA)誘導(dǎo)組、β巰基乙醇(BME)誘導(dǎo)組和對(duì)照組,分別進(jìn)行化學(xué)誘導(dǎo)分化,通過熒光定量PCR、Western印跡和免疫細(xì)胞化學(xué)法分別檢測巢蛋白、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)等神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)志分子的表達(dá)情況。結(jié)果:BHA誘導(dǎo)組高表達(dá)GFAP,而BME誘導(dǎo)組高表達(dá)巢蛋白,2組NSE表達(dá)均較弱;同時(shí)在誘導(dǎo)結(jié)束后繼續(xù)培養(yǎng)的過程中,2組神經(jīng)標(biāo)志分子表達(dá)量持續(xù)降低。結(jié)論:2種方法都能誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化,但分化結(jié)局不同,BHA誘導(dǎo)分化后細(xì)胞主要表達(dá)星形膠質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志GFAP,而BME誘導(dǎo)分化后細(xì)胞主要表達(dá)神經(jīng)前體細(xì)胞表面標(biāo)志巢蛋白;此外,通過化學(xué)方法誘導(dǎo)分化的效果是不可持續(xù)的,在誘導(dǎo)結(jié)束后繼續(xù)培養(yǎng)的過程中神經(jīng)標(biāo)志分子表達(dá)逐漸下調(diào)。
[Abstract]:Aim: to study the sustainable differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells into neural like cells induced by chemical method in vitro.Methods: rat bone marrow mesenchymal stem cells were cultured to P5 passage in vitro. The cell surface markers were detected by flow cytometry. The cells were divided into three groups: BHA-induced group, BME-induced group and control group. The cells were chemically induced and differentiated.The expression of nestin, neuron-specific enolase (NSEE) and glial fibrillary acidic protein (GFAP) were detected by Western blot and immunocytochemistry, respectively.Results the expression of GFAP was higher in BHA group than that in NSE group in BME group, and the expression of nerve marker molecules in group 2 decreased continuously during the further culture after the induction.Conclusion both methods can induce the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into neural like cells.However, the cells with different differentiation outcomes mainly expressed the astrocyte surface marker GFAP, while the BME induced differentiation cells mainly expressed the neural precursor cell surface marker nestin.The effect of inducing differentiation by chemical method was not sustainable, and the expression of neural markers was gradually down-regulated during the process of further culture after induction.
【作者單位】: 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【基金】:河南省衛(wèi)生廳中青年科技創(chuàng)新人才項(xiàng)目
【分類號(hào)】:R329.2

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本文編號(hào):1772042

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