本文選題：皮質(zhì)發(fā)育畸形 + 癲癇　； 參考：《中南大學》2014年碩士論文

【摘要】：目的建立卡莫斯汀(BCNU)誘導的皮質(zhì)發(fā)育畸形(malformation of cortical development, MCD)大鼠模型,觀察MCD大鼠模型對氯化鋰-匹羅卡品(LiCl-PILO)致癇敏感性,研究致癇后皮質(zhì)神經(jīng)元軸突起始段(axon initial segment, AIS)的可塑性變化規(guī)律,探討AIS的可塑性變化在MCD大鼠癲癇易感性中的作用。 方法 1.在孕鼠懷孕17天(E17d)時腹腔注射卡莫斯汀(BCNU),懷孕21天時生產(chǎn)仔鼠為MCD大鼠模型,Map1b免疫組化染色,驗證MCD造模是否成功,取6-8周齡MCD大鼠和正常發(fā)育大鼠,腹腔注射LiCl-PILO誘導癲癇持續(xù)狀態(tài)(status epileptics, SE),建立MCD癲癇大鼠模型； 2.記錄和比較急性SE誘導成功率和死亡率,記錄MCD和普通正常發(fā)育大鼠癲癇模型急性期和慢性期腦電圖(EEG)； 3.免疫熒光研究AIS區(qū)可塑性：a.分組：MCD+SE組、MCD組、SE組和正常對照組；b.以SE后24小時、30天和60天為時間點取大鼠大腦組織制備冰凍切片,采用免疫熒光方法標記AIS區(qū)特異性蛋白ankyrinG,觀察并測量各四組大鼠皮質(zhì)感覺運動區(qū)神經(jīng)元AIS區(qū)長度變化。 結果 1.Map1b免疫組化染色提示成功建立了MCD模型。 2.MCD大鼠致癇成功率和總死亡率與正常發(fā)育大鼠無明顯差異(P0.05),但致癇成功大鼠死亡率較高(P0.05)； 3.MCD大鼠和正常發(fā)育大鼠致癇急性期EEG形態(tài)相似,慢性期EEG可見自發(fā)放電,且自發(fā)放電幅度、持續(xù)時間、平均每小時自發(fā)放電次數(shù)均較正常發(fā)育大鼠增高(P0.001)； 4.皮質(zhì)感覺運動區(qū)神經(jīng)元AIS區(qū)長度：a.SE后24小時,MCD+SE組較SE組、MCD組顯著縮短(P0.001),SE組較正常對照組亦明顯縮短(P0.001),而MCD組與正常對照組相比無顯著差異(P0.05); b.SE后30天和60天,MCD+SE組較MCD組明顯縮短(P0.01和P0.001),SE組亦較正常對照組明顯縮短,但MCD+SE組和SE組、MCD組和正常對照組之間無顯著差異(P0.05)。 結論MCD大鼠皮質(zhì)感覺運動區(qū)神經(jīng)元AIS區(qū)在致癇后出現(xiàn)縮短,結合腦電生理監(jiān)測推斷,AIS區(qū)形態(tài)與結構的可塑性改變可能參與了MCD大鼠模型對癲癇的易感。
[Abstract]:Objective to establish a rat model of cortical malformation of cortical development induced by carmosine (BCNU) and observe the sensitivity of MCD rat model to lithium-pilocarpine chloride (LiCl-PILO) induced epilepsy.To study the plasticity of axon initial segmenting (AIS) in the initial axon of post-epileptic cortical neurons, and to explore the role of the plasticity of AIS in the susceptibility to epilepsy in MCD rats.Method1.At the 17th day of gestation, carmosine was injected intraperitoneally into BCNU. On the 21st day of gestation, mice were produced as MCD rat model with Map1b immunohistochemical staining to verify the success of MCD model. 6-8 week-old MCD rats and normal developing rats were taken.The MCD epileptic model was established by intraperitoneal injection of LiCl-PILO status epileptics.2.The success rate and mortality rate of acute SE induction were recorded and compared. MCD and EEGG were recorded in the acute and chronic phase of epileptic model of normal developmental rats.3.The plasticity of AIS region was studied by immunofluorescence.The mice were divided into two groups: 1% MCD SE group, 2% MCD SE group and 2 normal control group.Frozen sections were prepared from rat brain tissue at 30 and 60 days after SE, and the length of AIS area of neurons in the sensory motor area of each group was observed and measured by immunofluorescence labeling of ankyrinG, a specific protein in the AIS region.Result1.Map1b immunohistochemical staining indicated that MCD model was successfully established.There was no significant difference in the success rate and the total mortality rate between the 2.MCD rats and the normal development rats (P 0.05), but the mortality rate of the rats with successful epilepsy was higher than that of the normal development rats (P 0.05).The morphology of EEG in 3.MCD rats was similar to that in normal developing rats. Spontaneous discharges were observed in chronic EEG, and the amplitude and duration of spontaneous discharges, the average number of spontaneous discharges per hour in 3.MCD rats were higher than those in normal developmental rats (P 0.001).4.The length of the AIS area of the cortical sensorimotor neurons was significantly shorter in the MCDSE group than that in the control group at 24 hours after 1: 00 a.SE, and in the MCD group, which was significantly shorter than that in the normal control group (P 0.05), and 30 and 60 days after b.SE.Compared with the MCD group, the SE group was significantly shorter than the MCD group, and the SE group was also significantly shorter than the normal control group.But there was no significant difference between MCD SE group and SE group and normal control group (P 0.05).Conclusion the cortical sensorimotor area AIS area of MCD rats is shortened after epilepsy. The plasticity of morphology and structure of MCD area may be involved in the susceptibility to epilepsy in MCD rat model combined with electrophysiological monitoring.
【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R742.1

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