發(fā)布時間：2018-04-13 17:10

  本文選題：腦出血 + HDACs　； 參考：《華中科技大學》2015年博士論文

【摘要】：第一部分大鼠腦出血過程中HDAC各亞型的表達變化 目的觀察腦出血大鼠腦組織中各種HDAC亞型的表達變化,從而明確參與腦出血損傷的病理過程的HDAC亞型 方法采用Ⅳ型細菌性膠原酶定向注射誘導大鼠大腦i基底節(jié)出血模型,通過HE染色進行病理形態(tài)學觀察,然后通過實時熒光定量PCR技術分別檢測腦出血后3、6、12、24、48小時及假手術組大鼠腦組織內各種HDACmRNA水平變化,免疫蛋自印跡技術檢測HDAC蛋白水平變化,免疫熒光技術對其進行細胞類型鑒別及亞細胞定位 結果HE染色可見大鼠右側尾狀核區(qū)形成了類圓形血腫,血腫內組織疏松,可見大量空泡,神經細胞明顯減少,血腫周圍區(qū)域可見較多紅細胞和炎性細胞浸潤；假手術組和腦出血組大鼠腦組織內11類亞型的HDAC均有表達,且與假手術組相比,腦出血組HDAC4、HDAC5和HDAC7mRNA表達水平增高,而HDAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC6、HDAC8、 HDAC9、HDAC10、HDAC11mRNA表達水平無明顯差異：腦出血組HDAC4和HDAC5蛋白水平較假手術組明顯升高,而兩組HDAC7蛋白表達量則無明顯變化；經免疫熒光雙標發(fā)現(xiàn)HDAC4和HDAC5均主要于神經元表達,且同時存在于細胞核和細胞漿。 結論細菌性膠原酶定向注射成功建立穩(wěn)定的大鼠右側紋狀體出血模型；HDAC1-11在正常腦組織和出血腦組織中均有表達,而腦出血僅誘導了HDAC4和HDAC5在mRNA和蛋白水平表達增多,且表達HDAC4和HDAC5的細胞類型主要是神經元,表明二者很可能在腦出血性損傷形成過程中有著重要的調控作用。 第二部分MC1568對腦出血大鼠的神經保護作用 目的觀察MC1568對腦出血損傷大鼠的神經保護作用 方法Ⅳ型細菌性膠原酶成功誘導大鼠腦出血后,將其分為MC1568組和生理鹽水組,分別給予MC1568和生理鹽水(25mg/kg,每天兩次,腹腔注射)三天,于腦出血后1天、3天、7天、14天和28天分別對其進行神經功能評分和頭顱磁共振掃描,第3天分別通過干濕重法和TUNEL法評估大鼠腦組織水含量和神經細胞凋亡情況。 結果與生理鹽水組比較,MC1568組大鼠改良的神經功能嚴重程度評分在腦出血后7、14和28天均明顯降低,而第1和3天的評分則無明顯差異；血腫體積在第1天兩組無差異,第3天MC1568組血腫體積明顯縮�。簝山M的腦組織水含量無明顯差異；腦出血后第28天MC1568組腦組織損失百分比較生理鹽水組�。籑C1568組大鼠血腫周圍區(qū)域TUNEL陽性細胞數(shù)較生理鹽水組減少。 結論MC1568抑制了腦出血大鼠血腫擴大,減少神經細胞凋亡,減少了出血后腦組織的損失,從而減輕了神經功能損傷,表明MC1568對腦出血誘導的原發(fā)性和繼發(fā)性損傷具有明顯的保護作用。 第三部分MC1568對腦出血大鼠的神經保護作用的機制 目的在分子水平上初步探討MC1568對腦出血的保護作用的機制 方法細菌性膠原酶成功誘導大鼠腦出血模型,分別給予MC1568和生理鹽水,通過實時熒光定量PCR檢測腦組織內凋亡因子caspase-3和bcl-2、炎癥因子MMP-9、TNF-α、IL-1β的mRNA水平,免疫蛋白印跡技術檢測caspase-3、bcl-2、MMP-9、TNF-α、IL-1β蛋白水平,TUNEL法檢測腦組織內細胞凋亡情況。 結果與生理鹽水組比較,MC1568組大鼠腦組織內caspase-3、MMP-9、TNF-α、IL-1β的mRNA水平明顯降低,bcl-2mRNA水平則升高,caspase-3、MMP-9、TNF-α、IL-1β蛋白水平也相應降低,bcl-2蛋白表達含量增加,血腫周圍區(qū)域TUNEL陽性細胞數(shù)目減少。 結論MC1568對腦出血的神經保護作用可能一方面通過減少MMP-9、TNF-α、IL-1β炎癥因子的分泌進而抑制炎癥反應實現(xiàn)；另一方面則通過調節(jié)caspase-3、bcl-2凋亡因子的表達來抑制神經細胞凋亡從而減輕腦出血性損傷。
[Abstract]:Changes of the expression of HDAC isoforms in the first part of rats with intracerebral hemorrhage

Objective To observe the expression of various HDAC subtypes in brain tissue of intracerebral hemorrhage rats .

Methods The rat brain i basal ganglia hemorrhage model was induced by directional injection of type 鈪，

本文編號：1745429