本文選題：腦出血 + HDACs　； 參考：《華中科技大學(xué)》2015年博士論文

【摘要】：第一部分大鼠腦出血過(guò)程中HDAC各亞型的表達(dá)變化 目的觀察腦出血大鼠腦組織中各種HDAC亞型的表達(dá)變化,從而明確參與腦出血損傷的病理過(guò)程的HDAC亞型 方法采用Ⅳ型細(xì)菌性膠原酶定向注射誘導(dǎo)大鼠大腦i基底節(jié)出血模型,通過(guò)HE染色進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)觀察,然后通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)分別檢測(cè)腦出血后3、6、12、24、48小時(shí)及假手術(shù)組大鼠腦組織內(nèi)各種HDACmRNA水平變化,免疫蛋自印跡技術(shù)檢測(cè)HDAC蛋白水平變化,免疫熒光技術(shù)對(duì)其進(jìn)行細(xì)胞類型鑒別及亞細(xì)胞定位 結(jié)果HE染色可見(jiàn)大鼠右側(cè)尾狀核區(qū)形成了類圓形血腫,血腫內(nèi)組織疏松,可見(jiàn)大量空泡,神經(jīng)細(xì)胞明顯減少,血腫周圍區(qū)域可見(jiàn)較多紅細(xì)胞和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；假手術(shù)組和腦出血組大鼠腦組織內(nèi)11類亞型的HDAC均有表達(dá),且與假手術(shù)組相比,腦出血組HDAC4、HDAC5和HDAC7mRNA表達(dá)水平增高,而HDAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC6、HDAC8、 HDAC9、HDAC10、HDAC11mRNA表達(dá)水平無(wú)明顯差異：腦出血組HDAC4和HDAC5蛋白水平較假手術(shù)組明顯升高,而兩組HDAC7蛋白表達(dá)量則無(wú)明顯變化；經(jīng)免疫熒光雙標(biāo)發(fā)現(xiàn)HDAC4和HDAC5均主要于神經(jīng)元表達(dá),且同時(shí)存在于細(xì)胞核和細(xì)胞漿。 結(jié)論細(xì)菌性膠原酶定向注射成功建立穩(wěn)定的大鼠右側(cè)紋狀體出血模型；HDAC1-11在正常腦組織和出血腦組織中均有表達(dá),而腦出血僅誘導(dǎo)了HDAC4和HDAC5在mRNA和蛋白水平表達(dá)增多,且表達(dá)HDAC4和HDAC5的細(xì)胞類型主要是神經(jīng)元,表明二者很可能在腦出血性損傷形成過(guò)程中有著重要的調(diào)控作用。 第二部分MC1568對(duì)腦出血大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用 目的觀察MC1568對(duì)腦出血損傷大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用 方法Ⅳ型細(xì)菌性膠原酶成功誘導(dǎo)大鼠腦出血后,將其分為MC1568組和生理鹽水組,分別給予MC1568和生理鹽水(25mg/kg,每天兩次,腹腔注射)三天,于腦出血后1天、3天、7天、14天和28天分別對(duì)其進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分和頭顱磁共振掃描,第3天分別通過(guò)干濕重法和TUNEL法評(píng)估大鼠腦組織水含量和神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果與生理鹽水組比較,MC1568組大鼠改良的神經(jīng)功能嚴(yán)重程度評(píng)分在腦出血后7、14和28天均明顯降低,而第1和3天的評(píng)分則無(wú)明顯差異；血腫體積在第1天兩組無(wú)差異,第3天MC1568組血腫體積明顯縮小：兩組的腦組織水含量無(wú)明顯差異；腦出血后第28天MC1568組腦組織損失百分比較生理鹽水組�。籑C1568組大鼠血腫周圍區(qū)域TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較生理鹽水組減少。 結(jié)論MC1568抑制了腦出血大鼠血腫擴(kuò)大,減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡,減少了出血后腦組織的損失,從而減輕了神經(jīng)功能損傷,表明MC1568對(duì)腦出血誘導(dǎo)的原發(fā)性和繼發(fā)性損傷具有明顯的保護(hù)作用。 第三部分MC1568對(duì)腦出血大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制 目的在分子水平上初步探討MC1568對(duì)腦出血的保護(hù)作用的機(jī)制 方法細(xì)菌性膠原酶成功誘導(dǎo)大鼠腦出血模型,分別給予MC1568和生理鹽水,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)腦組織內(nèi)凋亡因子caspase-3和bcl-2、炎癥因子MMP-9、TNF-α、IL-1β的mRNA水平,免疫蛋白印跡技術(shù)檢測(cè)caspase-3、bcl-2、MMP-9、TNF-α、IL-1β蛋白水平,TUNEL法檢測(cè)腦組織內(nèi)細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果與生理鹽水組比較,MC1568組大鼠腦組織內(nèi)caspase-3、MMP-9、TNF-α、IL-1β的mRNA水平明顯降低,bcl-2mRNA水平則升高,caspase-3、MMP-9、TNF-α、IL-1β蛋白水平也相應(yīng)降低,bcl-2蛋白表達(dá)含量增加,血腫周圍區(qū)域TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目減少。 結(jié)論MC1568對(duì)腦出血的神經(jīng)保護(hù)作用可能一方面通過(guò)減少M(fèi)MP-9、TNF-α、IL-1β炎癥因子的分泌進(jìn)而抑制炎癥反應(yīng)實(shí)現(xiàn)；另一方面則通過(guò)調(diào)節(jié)caspase-3、bcl-2凋亡因子的表達(dá)來(lái)抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡從而減輕腦出血性損傷。
[Abstract]:Changes of the expression of HDAC isoforms in the first part of rats with intracerebral hemorrhage

Objective To observe the expression of various HDAC subtypes in brain tissue of intracerebral hemorrhage rats .

Methods The rat brain i basal ganglia hemorrhage model was induced by directional injection of type 鈪，

本文編號(hào)：1745429