IL-10基因修飾的BMSCs對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷炎性因子及神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響
發(fā)布時(shí)間:2018-04-09 07:45
本文選題:BMSCs 切入點(diǎn):IL- 出處:《中國(guó)修復(fù)重建外科雜志》2017年02期
【摘要】:目的探討IL-10基因修飾的BMSCs對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷(ischemia reperfusion injury,IRI)炎性因子及神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。方法取SD大鼠骨髓,采用貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)BMSCs,經(jīng)免疫組織化學(xué)染色鑒定后,取第3代BMSCs以重組腺病毒(recombinant adenovirus,Ad)介導(dǎo)IL-10基因轉(zhuǎn)染(Ad IL-10-BMSCs)。取40只清潔級(jí)成年SD雄性大鼠,采用線栓法制備大腦中動(dòng)脈阻塞模型后隨機(jī)分為4組,每組10只。模型制備后3 h于各組大鼠尾靜脈注射1 m L含10%FBS的L-DMEM培養(yǎng)液(A組)、61.78 ng IL-10(B組)、1 m L BMSCs懸液(細(xì)胞濃度為2×10~6個(gè)/m L,C組)、1 m L Ad IL-10-BMSCs懸液(細(xì)胞濃度2×10~6個(gè)/m L,D組)。C、D組細(xì)胞移植前采用Brd U標(biāo)記。7 d后大鼠經(jīng)頸總動(dòng)脈灌注處死取腦組織,免疫染色法檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞(OX42)表達(dá),ELISA法測(cè)定TNF-α、IL-1β含量,TUNEL法檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞凋亡;取C、D組組織行Brd U免疫熒光染色觀察。結(jié)果C、D組腦組織中均見(jiàn)呈綠色熒光的Brdu陽(yáng)性細(xì)胞,主要分布于梗死區(qū)周圍的紋狀體、大腦皮質(zhì)、皮質(zhì)下等。免疫組織化學(xué)染色示,B、C、D組OX42陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯少于A組,D組少于B、C組,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。ELISA檢測(cè)示D組大鼠腦組織中TNF-α、IL-1β含量較其余3組明顯降低(P0.05)。TUNEL法檢測(cè)各組凋亡細(xì)胞(TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞)主要見(jiàn)于梗死灶周圍的紋狀體及額頂皮質(zhì)下腦組織(相當(dāng)于缺血半暗帶),D組與A、B、C組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論Ad IL-10-BMSCs能通過(guò)抑制小膠質(zhì)細(xì)胞分泌促炎性因子TNF-α、IL-1β,抑制梗死灶周圍腦組織神經(jīng)細(xì)胞凋亡,對(duì)大鼠腦IRI起保護(hù)作用。
[Abstract]:鐩殑鎺㈣IL-10鍩哄洜淇グ鐨凚MSCs瀵瑰ぇ榧犺剳緙鴻鍐嶇亴娉ㄦ崯浼,
本文編號(hào):1725493
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