本文選題：膠質(zhì)瘤　切入點(diǎn)：MAGE-A4　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文

【摘要】：目的：膠質(zhì)瘤是神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)腫瘤。目前，其治療方法主要有手術(shù)、放療及化療，但總體療效并不理想。腫瘤免疫治療是一種特異性更強(qiáng)、副作用更小的腫瘤治療方式，其關(guān)鍵是確定理想的免疫治療靶點(diǎn)。黑色素瘤抗原基因（melanoma associated antigen gene，MAGE）是癌-睪丸抗原(cancer testis antigen，CTA)中的一員，其表達(dá)特點(diǎn)是在多種腫瘤組織中有表達(dá)，而在正常組織僅表達(dá)于睪丸生殖細(xì)胞和胎盤組織，故可作為腫瘤免疫治療的理想靶點(diǎn)。MAGE-A4是MAGE家族的一個(gè)成員，其在一些腫瘤中的表達(dá)及意義已進(jìn)行了初步研究，但是關(guān)于MAGE-A4在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況未見報(bào)道。本研究旨在觀察MAGE-A4mRNA在正常腦組織、正常睪丸組織及腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況，探討腦膠質(zhì)瘤患者M(jìn)AGE-A4作為臨床免疫治療靶點(diǎn)的可能及MAGE-A4mRNA表達(dá)與臨床參數(shù)的關(guān)系。 方法：收集腦膠質(zhì)瘤住院患者且接受手術(shù)治療的病例78例，標(biāo)本均來自于河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院神經(jīng)外科2009年2月~2012年2月標(biāo)本。年齡在15~75歲之間，中位年齡45歲，其中男性40例，女性38例。在手術(shù)前由有經(jīng)驗(yàn)的神經(jīng)科醫(yī)師對病人進(jìn)行功能狀態(tài)KPS評分（Karnofsky評分）。KPS評分標(biāo)準(zhǔn)是由美國東部腫瘤協(xié)作組提出，該評分可依據(jù)患者活動(dòng)情況、病情程度、生活自理程度，對患者機(jī)體活動(dòng)狀態(tài)進(jìn)行評價(jià)，10分一個(gè)等級對患者進(jìn)行評分，滿分為100分。KPS評分80分及以上的患者具有獨(dú)立生存能力，評分在50至70分的患者生活需要部分照顧。為確定腫瘤大小根據(jù)患者術(shù)前頭顱CT、MRI測量腫瘤最大直徑。手術(shù)中取出標(biāo)本后立即置入液氮罐中并迅速轉(zhuǎn)運(yùn)到-80℃冰箱保存。術(shù)后病理證實(shí)均為腦膠質(zhì)瘤且術(shù)前未接受手術(shù)、放療和化療。根據(jù)WHO2000對膠質(zhì)瘤組織進(jìn)行病理分級：包括Ⅰ級11例，Ⅱ級26例，Ⅲ級27例，Ⅳ級14例。將Ⅰ~Ⅱ級膠質(zhì)瘤稱為低級別膠質(zhì)瘤，Ⅲ~Ⅳ級膠質(zhì)瘤歸為高級別膠質(zhì)瘤。術(shù)后通過電話，郵件或復(fù)診的方式，隨訪患者1、3、5年的生存情況。本次研究采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription polymerase chainreaction，RT-PCR）技術(shù)從轉(zhuǎn)錄水平上檢測78例腦膠質(zhì)瘤中MAGE-A4的表達(dá)，并以7例正常睪丸組織（均為前列腺癌去勢手術(shù)患者的睪丸組織）作為陽性對照，12例正常腦組織（均為車禍死亡患者捐獻(xiàn)或去骨瓣減壓中去除的腦組織）作為陰性對照�；仡櫺苑治鯩AGE-A4基因表達(dá)與膠質(zhì)瘤患者臨床參數(shù)（包括年齡、性別、腫瘤大小、術(shù)前KPS評分、病理級別）的關(guān)系�？偵嫫谑侵甘中g(shù)之日起到患者死亡的時(shí)間。采用Kaplan-Meier統(tǒng)計(jì)方法分析MAGE-A4mRNA的表達(dá)及臨床參數(shù)與膠質(zhì)瘤患者總生存期的關(guān)系。進(jìn)一步對病理分級及KPS評分進(jìn)行多因素分析。 結(jié)果： 1MAGE-A4mRNA在正常睪丸組織、正常腦組織及膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá) 7例正常睪丸組織中均發(fā)現(xiàn)MAGE-A4mRNA表達(dá)，陽性率為100%。而在12例正常腦組織中均無MAGE-A4mRNA的表達(dá)，陽性率0%。78例腦膠質(zhì)瘤組織中有37例MAGE-A4基因表達(dá)陽性，陽性率為47.44%。MAGE-A4在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)與正常腦組織相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=9.666，P=0.002）。 2MAGE-A4mRNA的表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤患者臨床參數(shù)的關(guān)系 2.1MAGE-A4mRNA的表達(dá)與性別的關(guān)系 40例男性病例中，有20例MAGE-A4mRNA表達(dá)陽性，陽性率為50.00%；而38例女性中，有17例MAGE-A4mRNA表達(dá)陽性，陽性率為44.74%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩者之間的比較未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=0.216，P=0.642）。 2.2MAGE-A4mRNA的表達(dá)與年齡的關(guān)系。 50歲以下的腦膠質(zhì)瘤病例共有47例，有26例MAGE-A4mRNA表達(dá)陽性，陽性率為55.32%；50歲及以上的病例共有31例，有12例MAGE-A4mRNA表達(dá)陽性，陽性率為38.71%。兩者之間進(jìn)行比較未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=2.063，P=0.151）。 2.3MAGE-A4mRNA的表達(dá)與KPS評分的關(guān)系。 對每位患者M(jìn)AGE-A4mRNA表達(dá)情況及術(shù)前的KPS評分進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，70分以下共有42例，其中22例MAGE-A4mRNA表達(dá)陽性，陽性率為52.38%；70分以上共36例，其中15例MAGE-A4mRNA表達(dá)陽性，陽性率為41.67%。兩者之間的比較未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=0.892，P=0.345）。 2.4MAGE-A4mRNA的表達(dá)與腫瘤大小的關(guān)系。 將腫瘤最大直徑進(jìn)行比較，5cm以下的病例共有20例，其中有11例MAGE-A4mRNA表達(dá)陽性，陽性率55.00%，5cm及以上病例共有58例，其中26例表達(dá)陽性，陽性率為44.83%。兩者之間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=0.617，P=0.432）。 2.5MAGE-A4mRNA的表達(dá)與病理分級的關(guān)系。 根據(jù)病理結(jié)果，78例標(biāo)本中，低級別腦膠質(zhì)瘤（Ⅰ~Ⅱ級）共37例，其中12例MAGE-A4mRNA表達(dá)陽性，陽性率為32.43%；高級別腦膠質(zhì)瘤（Ⅲ~Ⅳ級）共41例，其中25例MAGE-A4mRNA表達(dá)陽性，，陽性率為60.98%。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明兩者有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=6.355，P=0.012）。 3MAGE-A4mRNA在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)與患者臨床預(yù)后之間的關(guān)系 MAGE-A4表達(dá)陽性組共37例，中位生存期為24個(gè)月，其中總生存期達(dá)1年者占77.7%，3年者占37.3%，5年者占9.3%；MAGE-A4表達(dá)陰性組共41例，中位生存期為20個(gè)月，其中總生存期達(dá)1年者占85.2%，3年者占36.7%，5年者占9.5%。用Kaplan-Meier法對MAGE-A4陽性表達(dá)組總生存期與陰性表達(dá)組總生存期進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)兩者未見顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=0.007，P=0.935）。 4臨床參數(shù)與膠質(zhì)瘤患者預(yù)后之間的關(guān)系 采用單因素分析結(jié)果表明臨床參數(shù)中的性別、年齡、腫瘤大小均與膠質(zhì)瘤患者的預(yù)后無關(guān)，而與病理級別相關(guān)（P=0.000）；與KPS評分相關(guān)（P=0.013）。進(jìn)一步通過多因素分析，與低級別膠質(zhì)瘤（Ⅰ~Ⅱ級）相比，高級別膠質(zhì)瘤（Ⅲ~Ⅳ級）的死亡風(fēng)險(xiǎn)要高3.175倍。術(shù)前KPS評分70分以下的死亡風(fēng)險(xiǎn)是70分及以上患者的2.045倍。 結(jié)論： 1在正常腦組織中無MAGE-A4基因的表達(dá)，在正常睪丸組織中均有MAGE-A4基因表達(dá)。 2在腦膠質(zhì)瘤組織中，MAGE-A4有特異性表達(dá)，可作為膠質(zhì)瘤免疫治療的理想靶點(diǎn)。 3MAGE-A4mRNA在腦膠質(zhì)瘤組織的表達(dá)與病理級別顯著相關(guān)，可作為腫瘤惡性程度的參考指標(biāo)；而與患者性別、年齡、KPS評分、腫瘤大小均無關(guān)。 4膠質(zhì)瘤患者術(shù)前KPS評分和術(shù)后病理分級可作為判斷患者預(yù)后的重要依據(jù)。
[Abstract]:Objective : To study the expression of MAGE - A4 mRNA in normal brain tissues , normal testis tissues and brain glioma , and to investigate the expression of MAGE - A4 in normal brain tissues , normal testis tissues and brain glioma .

Methods : The expression of MAGE - A4 was measured by reverse transcription polymerase chain reaction ( RT - PCR ) .

Results :

Expression of 1MAGE - A4mRNA in normal testis tissues , normal brain tissues and glioma tissues

The expression of MAGE - A4mRNA was found in 7 normal testis tissues , and the positive rate was 100 % . There were no MAGE - A4mRNA expression in 12 normal brain tissues , the positive rate was 0 % . There were 37 cases of MAGE - A4 gene expression in 78 brain glioma tissues , the positive rate was 47.44 % . The expression of MAGE - A4 in glioma was significantly different from that of normal brain tissue ( 蠂2 = 9.666 , P = 0.002 ) .

Relationship between expression of 2MAGE - A4mRNA and clinical parameters in glioma patients

2.1 Relationship between expression of MAGE - A4mRNA and sex

Among 40 male cases , 20 cases of MAGE - A4mRNA were positive and the positive rate was 50.00 % .
Among 38 women , 17 cases of MAGE - A4mRNA were positive and the positive rate was 44.74 % . Statistical analysis showed that there was no statistical difference between them ( 蠂2 = 0.216 , P = 0.642 ) .

2 . The expression of MAGE - A4mRNA was correlated with age .

There were 47 cases of glioma under the age of 50 . There were 26 cases of MAGE - A4mRNA positive , the positive rate was 55.32 % .
There were 31 cases in 50 years old and over . There were 12 cases of MAGE - A4mRNA positive , the positive rate was 38.71 % . There was no statistical difference between them ( 蠂2 = 2.063 , P = 0.151 ) .

2 . The relationship between expression of MAGE - A4mRNA and kps score was studied .

The expression of MAGE - A4mRNA in each patient and the pre - operatively were analyzed statistically . There were 42 cases of MAGE - A4mRNA expression in 22 cases , and the positive rate was 52.38 % .
The positive rate of MAGE - A4mRNA was 41.67 % . There was no statistical difference between them ( 蠂2 = 0.892 , P = 0.345 ) .

2.4MAGE - A4mRNA expression is related to tumor size .

There were 20 cases with the largest diameter of tumor , including 11 cases of MAGE - A4mRNA positive , the positive rate was 55.00 % , the positive rate was 54.00 % , the positive rate was 44.83 % . There was no statistical difference between them ( 蠂2 = 0.617 , P = 0.432 ) .

2.5MAGE - A4mRNA expression was correlated with pathological grade .

According to the pathological results , 37 cases of low grade gliomas ( grade 鈪

本文編號：1725173