本文選題：腦動(dòng)靜脈畸形　切入點(diǎn)：TGFB1　出處：《山東大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：第一部分TGFB1、ENG、ACVRL1基因多態(tài)性與AVM的相關(guān)研究目的：散發(fā)型腦動(dòng)靜脈畸形(Brain arteriovenous malformations, BAVM)是常見的腦血管發(fā)育畸形性疾病的一種。對(duì)AVM進(jìn)行早期干預(yù)及提供更有效的治療離不開對(duì)AVM發(fā)病機(jī)制的探索。而AVM的遺傳易感性是研究的重點(diǎn)方向。如果要進(jìn)行AVM的遺傳易感性檢測及預(yù)后評(píng)估,對(duì)與AVM密切相關(guān)的易感基因及SNP位點(diǎn)的尋找顯的尤為重要,將有助于了解AVM發(fā)病及自然病程的生物學(xué)機(jī)制,進(jìn)而可以進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分層并為制定個(gè)體化的治療方案提供依據(jù)。TGFB1信號(hào)通路可以對(duì)血管的生成和功能產(chǎn)生影響。而TGFB需要其受體的配合才能發(fā)揮其生物學(xué)作用。由ENG編碼的內(nèi)皮因子(Endoglin)及ACVRL1編碼的絲氨酸／蘇氨酸蛋白激酶受體R3是TGFB受體的重要組成部分。在TGFB信號(hào)通路中,ENG與ACVRL1存在著協(xié)同作用。并且可能影響散發(fā)的AVM發(fā)生。目前尚缺乏基于中國漢族人群的TGFB信號(hào)通路相關(guān)基因多態(tài)性與散發(fā)AVM發(fā)病間的相互關(guān)系的研究。本課題擬通過對(duì)中國漢族人群中,TGFB1基因、ENG基因、ACVRL1基因多態(tài)性位點(diǎn)的分析檢測,了解TGFB1、ENG、ACVRL1基因的SNP分布規(guī)律,應(yīng)用遺傳學(xué)分析方法探討TGFB1、ENG、ACVRL1基因與中國漢族人群AVM的關(guān)系,解釋AVM的遺傳危險(xiǎn)因素,為AVM的基因研究、治療、預(yù)后等提供理論基礎(chǔ)。研究方法：本研究選取散發(fā)AVM患者50例,正常對(duì)照120例。每位患者的診斷均經(jīng)過DSA檢查證實(shí)為AVM,均詳細(xì)追問家族史,并行胸腹部CT等除外其他臟器AVM,以排除遺傳性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥(HHT)及其他遺傳性疾病可能。對(duì)照組收集無重大疾病的及慢性病史的體檢志愿者及輕度顱腦外傷患者,經(jīng)顱腦MRI及胸腹CT排除AVM及其他器官可能存在的AVM。采集受試者靜脈血,用于DNA的制備。提取受試者DNA后,應(yīng)用PCR擴(kuò)增目標(biāo)基因,應(yīng)用連接酶檢測反應(yīng)(ligase detection reaction, LDR)技術(shù)進(jìn)行目標(biāo)基因多態(tài)性的檢測。獲取目標(biāo)基因多態(tài)性分布后,分析其與AVM發(fā)病見得相關(guān)性。結(jié)果：本組研究共納入50例散發(fā)AVM患者及120例正常對(duì)照。其中50例AVM中,以AVM破裂為首發(fā)癥狀就診者46例,占總例數(shù)的92%,位于幕上者為38例,占總例數(shù)的76%,位于大腦表淺部位者40例,占總例數(shù)的80%。1.TGFB1多態(tài)性分布rs2241716位點(diǎn)在AVM組與對(duì)照組中A/A、A/G、G/G基因型頻率間無顯著差別(X2=3.88, P=0.14)。AVM組與對(duì)照組中A和G等位基因頻率間亦無顯著差異(X2=0.99, P=0.32)。rs8105161位點(diǎn)在兩組中C/C、C/T、T/T基因型頻率間無顯著差別(χ2=5.78,P=0.056)；C和T等位基因頻率間亦無顯著差異(x2=2.06,P=0.15)。2. ACVRL1基因多態(tài)性分布rs2071219位點(diǎn)A/A.A/G、G/G基因型頻率在兩組間無顯著性差異(χ2=0.52,P=0.77)；G和A等位基因頻率間亦無顯著差異(X2=0.46, P=0.5)。rs706819的A/A、A/G、G/G基因型頻率在兩組間存在明顯差異(χ2=9.4,P=0.009),但在等位基因頻率中未發(fā)現(xiàn)存在差異(χ2=0.03,P=0.86)。雜合子模型(A/A VS A/G)分析發(fā)現(xiàn)對(duì)AVM的出現(xiàn)有保護(hù)作用(X2=6.42, P=0.01, OR=0.167,95%CI= (0.036-0.768))。rs2293094在AVM患者中未檢測到G/G基因型,AVM組與對(duì)照組中A/A、A/G基因型頻率間有顯著性差異(χ2=10.52,P=0.005)。A和G等位基因頻率在兩組間亦存在顯著差異(X2=8.65, P=0.003, OR=2.28,95%CI= (1.31-3.98)). rs11169953位點(diǎn)的T/T、C/T、C/C基因型頻率在AVM組與對(duì)照組間存在明顯差異(χ2=6.07,P=0.045)。C和T等位基因頻率在兩組間亦存在顯著差異(X2=1.88, P=0.01, OR=1.88,95%CI= (1.16-3.05))。隱性模型對(duì)AVM發(fā)病存在影響(X2=5.23, P=0.022, OR=2.9,95%CI= (1.132-7.428))。rs706819、rs2293094、rs11169953三個(gè)位點(diǎn)的單倍體型分析顯示：GGT單倍體型存在時(shí),可降低AVM發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)(X2=13.808, P=0.0002, OR=0.279,95%CI= (0.138-0.565)); GAC單倍體型存在時(shí),可增加AVM發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)(X2=8.21, P=0.004, OR=2.17,95%CI= (1.27-3.7))=3.ENG基因多態(tài)性分布rs1 1545664位點(diǎn)在AVM組與對(duì)照組中無A/A基因型,A/G、G/G基因型頻率在兩組間無顯著性差異(χ2=2.91,P=0.08),A和G等位基因頻率在兩組間亦無顯著差異(X2=0.42,P=0.1)。rs1998923位點(diǎn)中未檢測到C/C基因型,C/T、T/T基因型頻率在兩組間無顯著性差異(χ2=0.72,P=0.38)。C和T等位基因頻率在兩組間無顯著差異(X2=0.77,P=0.43)。rs4837192位點(diǎn)未檢測到G/G基因型,A/G、A/A基因型頻率在兩組間無顯著性差異(χ2=0.028,P=0.87)。G和A等位基因頻率在兩組間無顯著差異(X2=0.02,P=0.88)。rs1330684位點(diǎn)的G/G、A/G、A/A基因型頻率間在AVM及對(duì)照組間無顯著性差異(X2=2.51, P=0.29)。AVM組與對(duì)照組中G和A等位基因頻率間無顯著差異(χ2=0.0008,P=0.93)。4.各位點(diǎn)與AVM臨床特點(diǎn)間的關(guān)系應(yīng)用logistics回歸分析尋找與破裂、位置關(guān)系等相關(guān)的因素,未發(fā)現(xiàn)上述10個(gè)SNP與AVM的破裂、位置(包括幕上下、表淺)等存在相關(guān)性(P0.05)。結(jié)論：本研究發(fā)現(xiàn)ACVRL基因的rs706819、rs2293094、rsl 1169953單核苷酸多態(tài)性與中國漢族人群的散發(fā)AVM存在相關(guān)性。并且rs706819、rs2293094、 rs11169953的GGT單倍體型可降低AVM發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)；GAC單倍體型存在時(shí),可增加AVM發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。這為預(yù)測AVM發(fā)生提供了可能的檢測位點(diǎn)及理論基礎(chǔ)。第二部分貝伐單抗對(duì)GBM治療效果的meta分析目的：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(glioblastoma, GBM),是作為膠質(zhì)瘤中惡性程度最高的病理組織學(xué)類型,目前最有效的治療仍是首先進(jìn)行進(jìn)行最大化的手術(shù)切除后進(jìn)行放化療。但是不能獲得理想的治療效果。膠質(zhì)瘤的病理級(jí)別與腫瘤血管生成密切相關(guān),VEGF是與膠質(zhì)瘤血管生成密切相關(guān)細(xì)胞因子,可以進(jìn)而促進(jìn)腫瘤內(nèi)血管的生成,改善腫瘤內(nèi)缺氧狀態(tài),改善腫瘤營養(yǎng)供應(yīng),促進(jìn)腫瘤的生長。針對(duì)VEGF的重要作用,其單克隆抗體貝伐單抗(Bevacizumab, BV)被用于復(fù)發(fā)GBM患者的治療。雖然已有多個(gè)臨床試驗(yàn)進(jìn)行了貝伐單抗對(duì)新診斷原發(fā)GBM治療效果的評(píng)價(jià)的,但是一線使用貝伐單抗用于治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者的效果目前尚不明確。為了更好地評(píng)估貝伐單抗聯(lián)合放療-替莫唑胺治療新診斷的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者的療效及分析貝伐單抗聯(lián)合放療-替莫唑胺是否會(huì)增加額外嚴(yán)重副作用,我們對(duì)已完成的貝伐單抗的臨床試驗(yàn)進(jìn)行了完善的系統(tǒng)綜述及meta分析。研究方法：參考Cochrane meta分析手冊(cè),對(duì)生存數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)的meta分析,參照手冊(cè)規(guī)范進(jìn)行數(shù)據(jù)文獻(xiàn)的報(bào)告。文獻(xiàn)檢索數(shù)據(jù)庫包括PubMed, Embase和Cochrane圖書館,檢索時(shí)間截止至2016年5月1日。檢索關(guān)鍵詞為：bevacizumab, temozolomide, glioblastoma, radiotherapy。嚴(yán)格按照納入標(biāo)準(zhǔn),由三名獨(dú)立的評(píng)價(jià)者進(jìn)行文獻(xiàn)檢索、篩選及數(shù)據(jù)提取。提取數(shù)據(jù)主要包括總生存期(overall survival, OS)和無癥狀進(jìn)展期(progression free survival, PFS)及不良反應(yīng)事件的患者數(shù)。結(jié)果：本研究共納入6篇文章進(jìn)行meta分析,共包括2181名受試者,其中1068位GBM患者接受貝伐單抗/替莫唑胺/放療,1113位GBM患者接受替莫唑胺/放療。1.生存分析所有患者中,接受聯(lián)合BV和替莫唑胺-放療者,OS沒有改善,匯總風(fēng)險(xiǎn)比為0.977(95% CIs 0.886-1.078; P=0.886)。而PFS卻獲得了明顯的改善(匯總HRs=0.709,95% CIs 0.645-0.779；P0.001).有三項(xiàng)研究提供了GBM患者的MGMT (O6-methylguanine-DNA methyltransferase)甲基化狀態(tài)的數(shù)據(jù)。BV組患者中,MGMT甲基化者共248例,未甲基化者469例,對(duì)照組數(shù)據(jù)分別為：248例及478例。BV組MGMT甲基化及未甲基化患者在接受貝伐單抗治療后,未獲得OS的明顯受益,HRs分別為1.132(95%CIs 0.876-1.462；P=0.345)；1.018(95%CIs 0.879-1.179；P=0.345).不同MGMT甲基化狀態(tài)的GBM患者接受BV治療后,PFS卻獲得了明顯的受益(HRs:0.769,95%CIs 0.604-0.978, P=0.032;0.675,95%CIs 0.466-0.979, P=0.038).2.不良反應(yīng)事件分析在放化療期間,兩組血液系統(tǒng)不良反應(yīng)的發(fā)生率沒有顯著性差異(RR 1.228, 95%CIs0.965-1.563,P=0.094).然而,在輔助治療階段,BV組患者患血液系統(tǒng)不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)更高(RR 1.311,95%CIs 1.051--1.634,P=0.016),特別是中性粒細(xì)胞減少癥的發(fā)生率更高(RR 2.00,95%CIsl.18--3.391,P=0.01)BV組主要的三級(jí)或更高級(jí)別非血液系統(tǒng)不良反應(yīng)主要有疲勞,高血壓,出血,血栓,和傷口愈合相關(guān)并發(fā)癥(包括傷口裂開,傷口感染),其匯總比率分別為12.4%(95%CIs 6.2%-18.6%),9.3%(95%CIs 3.5%-15.2%),2.6%(95%Cls 0.7%-4.5%),12.9%(95%CIs 10.6%-15.2%),3.1%(95%CIs 1.9%-4.3%)。結(jié)論：貝伐單抗治療可以改善新診斷膠質(zhì)母細(xì)胞瘤治療效果,但是GBM患者并沒有從貝伐單抗治療中獲得總生存期的延長。在接受貝伐單抗治療的患者中,有更多的3級(jí)或更高級(jí)別的不良反應(yīng)事件出現(xiàn)。
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【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R743.4

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;SHEsis,a powerful software platform for analyses of linkage disequilibrium,haplotype construction,and genetic association at polymorphism loci[J];Cell Research;2005年02期

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本文編號(hào)：1698563