發(fā)布時間：2018-04-01 13:39

  本文選題：DMD/BMD　切入點：dystrophin蛋白　出處：《山東大學(xué)》2014年碩士論文

【摘要】：背景和目的 Dystrophin蛋白廣泛存在于所有肌肉細胞、部分神經(jīng)細胞的胞膜上,作為細胞骨架的一部分,該蛋白與dystroglycan、sarcoglycan等一系列蛋白共同構(gòu)成dystrophin相關(guān)蛋白復(fù)合體(dystrophin associated protein complex, D APC),在肌肉收縮過程中維持細胞穩(wěn)定性及力的傳導(dǎo)發(fā)揮重要作用。Dystrophin蛋白的編碼基因定位于Xp21,是迄今發(fā)現(xiàn)的人類最大的基因。當(dāng)dystrophin基因發(fā)生突變,dystrophin蛋白合成障礙,在臨床上表現(xiàn)為Duchenne或Becker肌營養(yǎng)不良(DMD/BMD),此為dystrophin蛋白的原發(fā)性缺失。本文報道兩例繼發(fā)性dystrophin蛋白缺失現(xiàn)象病例,并對常見的dystrophin蛋白缺失現(xiàn)象進行總結(jié)及鑒別。 材料方法 兩例患者均來自山東大學(xué)齊魯醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科門診,因肢體抖動、癲癇及不同程度的肌無力而行肌肉活檢術(shù)。除此二例患者外,另選取山東大學(xué)齊魯醫(yī)院神經(jīng)肌肉病研究室2例DMD患者肌肉標(biāo)本,1例BMD患者肌肉標(biāo)本及1例常規(guī)染色正常的肌肉標(biāo)本作為對照,對上述病例肌肉標(biāo)本進行常規(guī)病理染色、免疫組織化學(xué)染色、dystrophin蛋白免疫熒光染色,提取肌肉組織總蛋白進行dystrophin蛋白印跡分析,并對兩例患者行dystrophin基因檢測。 結(jié)果 病例1常規(guī)病理染色提示輕度神經(jīng)源性損害,免疫組織化學(xué)染色及免疫熒光不dystrophin rod染色肌纖維膜普遍減弱。Dystrophin蛋白免疫印跡提示dystrophin rod表達量降低。Dystrophin基因MLPA檢測提示79個外顯子的結(jié)果均為正常,未檢測到任何缺失突變或重復(fù),NGS測序提示檢測到多個多態(tài)性位點：rs1484852, rs1800280, rs1379871, rs187617705, rs228406。 病例2常規(guī)病理染色示大致正常肌組織,免疫組織化學(xué)染色及免疫熒光示dystrophin rod染色肌纖維膜普遍不著色。Dystrophin蛋白免疫印跡提示蛋白表達量降低。Dystrophin基因MLPA檢測提示79個外顯子的結(jié)果均為正常,未檢測到任何缺失突變或重復(fù),NGS測序提示檢測到一個半合子突變：c.4048CT, p.(Arg1350Cys). 結(jié)論 兩例患者dystrophin基因未發(fā)生致病突變,其肌肉組織為繼發(fā)性dystroph in蛋白缺失。兩例患者均有肌肉異常收縮病史,異常的肌肉收縮導(dǎo)致dystroph in蛋白的繼發(fā)缺失。在神經(jīng)肌肉病的診斷中,應(yīng)在常規(guī)病理、IHC的基礎(chǔ)上,結(jié)合臨床表現(xiàn),必要時借助免疫熒光、WB、基因檢測等手段做出診斷。
[Abstract]:Background and purpose. Dystrophin protein is widely found in all muscle cells, part of the cell membrane, as part of the cytoskeleton. This protein, together with a series of proteins, such as dystroglycan sarcoglycan, constitutes the dystrophin associated protein complex dystrophin associated protein complex. It plays an important role in maintaining cell stability and force conduction during muscle contraction. The gene encoding Dystrophin protein is located in Xp21. When the dystrophin gene mutated dystrophin protein synthesis, The clinical manifestations are Duchenne or Becker dystrophy, which is the primary deletion of dystrophin protein. This paper reports two cases of secondary dystrophin protein deletion, and summarizes and distinguishes the common dystrophin protein deletion phenomenon. Material method. The two patients, all from the Department of Neurology, Qilu Hospital, Shandong University, underwent muscle biopsy because of limb jitter, epilepsy and different degrees of myasthenia. The muscle specimens of 2 cases of DMD patients and 1 case of BMD patients and 1 case of normal muscle specimens with normal staining were selected as control group. The muscle specimens of these cases were stained by routine pathological staining. Immunohistochemical staining of dystrophin protein was performed by immunofluorescence staining. Total protein of muscle tissue was extracted for dystrophin blot analysis and dystrophin gene was detected in two patients. Results. Case 1 showed mild neurogenic damage by routine pathological staining. Immunohistochemical staining and immunofluorescence non dystrophin rod staining showed that the myofibril membrane was generally weakened. Dystrophin immunoblotting indicated that the expression of dystrophin rod decreased. MLPA detection of Dystrophin gene indicated that the results of 79 exons were normal. No deletion mutation or repeated NGS sequencing indicated that multiple polymorphic loci: rs1484852, rs1800280, rs1379871, rs187617705, rs228406 were detected. In case 2, routine pathological staining showed that the muscle tissue was approximately normal. Immunohistochemical staining and immunofluorescence staining showed that the expression of Dystrophin protein was decreased by dystrophin rod staining. Dystrophin gene MLPA showed that the results of 79 exons were normal. No deletion mutation was detected or repeated NGS sequencing indicated that a half zygote mutation was detected: 1 / c. 4048 CTA, p. Arg1350 Cyschus. Conclusion. The dystrophin gene was not mutated in two patients, and its muscle tissue was secondary dystroph in deletion. Both patients had a history of abnormal muscle contraction, and abnormal muscle contraction resulted in the secondary deletion of dystroph in the diagnosis of neuromuscular diseases. The diagnosis should be based on the routine pathology of IHC, combined with clinical manifestations, and the diagnosis should be made by means of immunofluorescence, gene detection and so on.
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R746

【共引文獻】

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本文編號：1695854