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Ptch-1和Smo在不同級別膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及相關(guān)性研究

發(fā)布時間:2018-03-29 07:17

  本文選題:膠質(zhì)瘤 切入點:Ptch-1 出處:《河北醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:目的:研究SHH信號通路中Ptch-1蛋白和Smo蛋白在不同級別膠質(zhì)瘤及正常腦組織中的表達(dá)情況及其相關(guān)性。方法:1收集我院神經(jīng)外科2014年至2016年手術(shù)獲得膠質(zhì)瘤患者標(biāo)本(依據(jù)《中國中樞神經(jīng)系統(tǒng)膠質(zhì)瘤診斷和治療指南》中WHO中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類將膠質(zhì)瘤分為WHOⅠ-Ⅳ級,Ⅰ、Ⅱ級為低級別膠質(zhì)瘤,Ⅲ、Ⅳ級為高級別膠質(zhì)瘤。故將實驗分為高級別膠質(zhì)瘤組和低級別膠質(zhì)瘤組)。2將不同級別的膠質(zhì)瘤組織共65例(其中高級別膠質(zhì)瘤組41例,低級別膠質(zhì)瘤組24例)及正常腦組織共10例,經(jīng)甲醛固定待用。不同級別的膠質(zhì)瘤組織共20例(其中高級別膠質(zhì)瘤10例,低級別膠質(zhì)瘤10例)及正常腦組織共10例,凍存于-80℃冰箱待用。(正常腦組織標(biāo)本均來自神經(jīng)外科顱腦外傷患者需行減壓的正常腦組織,術(shù)前已告知患者家屬標(biāo)本的用途并取得患者家屬同意)3應(yīng)用免疫組織化學(xué)檢測Ptch-1蛋白及Smo蛋白在不同級別的膠質(zhì)瘤組和正常腦組織組中的表達(dá)水平。4應(yīng)用q RT-PCR技術(shù)檢測Ptch-1蛋白及Smo蛋白的mRNA在不同級別的膠質(zhì)瘤組和正常腦組織組中的表達(dá)水平。5應(yīng)用蛋白質(zhì)免疫印跡實驗(Western Blot)檢測Ptch-1蛋白及Smo蛋白在不同級別的膠質(zhì)瘤組和正常腦組織組中的表達(dá)水平。6應(yīng)用統(tǒng)計軟件IBM SPSS 21.0對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。結(jié)果:1免疫組化實驗結(jié)果:Ptch-1蛋白的表達(dá)水平:低級別膠質(zhì)瘤組陽性表達(dá)率為62.5%(15/24),高級別膠質(zhì)瘤組陽性表達(dá)率為92.7%(38/41),兩者之間的陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。正常腦組織組中Ptch-1蛋白的陽性表達(dá)率為10%(1/10)。低級別膠質(zhì)瘤組和高級別膠質(zhì)瘤組陽性表達(dá)率與正常腦組織組的陽性表達(dá)率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。Smo蛋白的表達(dá)水平:低級別膠質(zhì)瘤組陽性表達(dá)率為75.0%(18/24),高級別膠質(zhì)瘤組陽性表達(dá)率為95.1%(39/41),兩者之間的陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。正常腦組織中Smo蛋白的陽性表達(dá)率為:20%(2/10)。正常腦組織組的陽性表達(dá)率分別與低級別膠質(zhì)瘤組、高級別膠質(zhì)瘤組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2 q RT-PCR實驗結(jié)果:各組中均可見目的蛋白mRNA的表達(dá)。其中低級別膠質(zhì)瘤組Ptch-1 mRNA相對表達(dá)量是0.0018364±0.0015966,高級別膠質(zhì)瘤組Ptch-1 mRNA相對表達(dá)量是0.0027659±0.0028038,兩者之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.3740.05)。正常腦組織組Ptch-1 mRNA相對表達(dá)量是0.0006005±0.0005233。正常腦組織組分別和低級別膠質(zhì)瘤組、高級別膠質(zhì)瘤組之間的相對表達(dá)量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。Smo mRNA在高級別膠質(zhì)瘤組的相對表達(dá)量是0.0078187±0.0054682,其在低級別膠質(zhì)瘤組的相對表達(dá)量是0.0037597±0.0016477,兩者之間相對表達(dá)量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。Smo mRNA正常腦組織組相對表達(dá)量是0.0007974±0.0005546,正常腦組織組和低級別膠質(zhì)瘤組、高級別膠質(zhì)瘤組之間相對表達(dá)量差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3 Western Blot實驗結(jié)果:Ptch-1的相對表達(dá)量在低級別膠質(zhì)瘤組中是0.4771±0.1187,在高級別膠質(zhì)瘤中為0.6967±0.1880,兩者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。Ptch-1在正常腦組織組中相對表達(dá)量為0.3155±0.1314。正常腦組織組與低級別膠質(zhì)瘤組及高級別膠質(zhì)瘤組之間相對表達(dá)量差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。Smo的相對表達(dá)量在低級別膠質(zhì)瘤組中為0.4976±0.1039,高級別膠質(zhì)瘤組為0.6477±0.1730,二者之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。正常腦組織中Smo相對表達(dá)量為0.2703±0.0914。正常腦組織組與低級別膠質(zhì)瘤組和高級別膠質(zhì)瘤組之間的相對表達(dá)量差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4 Ptch-1和Smo蛋白相關(guān)性統(tǒng)計:在q RT-PCR實驗中,Ptch-1和Smo蛋白的相關(guān)系數(shù)為:R=0.514(P0.05);在Western Blot實驗中,Ptch-1和Smo蛋白的相關(guān)系數(shù)為:R=0.655(P0.05)。結(jié)論:1 Ptch-1、Smo在膠質(zhì)瘤及正常腦組織中均有表達(dá),但在膠質(zhì)瘤組織中表達(dá)水平顯著高于正常腦組織,提示SHH信號通路在膠質(zhì)瘤中普遍處于激活狀態(tài),其可能參與了膠質(zhì)瘤的發(fā)生。2在高級別膠質(zhì)瘤中Ptch-1、Smo的表達(dá)水平較低級別膠質(zhì)瘤顯著增高,提示隨著SHH信號通路的激活水平的增高,膠質(zhì)瘤的級別增高即惡性程度亦顯著增高。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R739.41

【參考文獻】

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本文編號:1680116

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