本文選題：視神經(jīng)脊髓炎　切入點(diǎn)：糖皮質(zhì)激素　出處：《中南大學(xué)》2014年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：背景：?jiǎn)魏思?xì)胞作為重要的固有免疫細(xì)胞,具有明顯的異質(zhì)性,根據(jù)細(xì)胞表面CD16分子表達(dá)水平,分為經(jīng)典型亞群(CD14++CD16-)、中間型亞群(CD14++CD16+)和非經(jīng)典型亞群(CD14+CD16++),促炎細(xì)胞因子IL-1β和TNF-α為非經(jīng)典型亞群分泌的主要細(xì)胞因子。CD16+亞群較CD16-亞群具有更強(qiáng)的促炎作用,其在多種炎性疾病,尤其是自身免疫性疾病中出現(xiàn)明顯擴(kuò)增,分泌的促炎細(xì)胞因子IL-1β和TNF-α增加,因而認(rèn)為其在自身免疫性疾病的發(fā)病過(guò)程中具有重要作用。視神經(jīng)脊髓炎(NMO)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)自身免疫性疾病,活化的單核細(xì)胞是最先到達(dá)CNS炎癥部位的免疫細(xì)胞之一,促炎細(xì)胞因子IL-1β和TNF-α參與了NMO發(fā)生的病理過(guò)程。但目前單核細(xì)胞三個(gè)亞群在NMO中的變化情況及常規(guī)的NMO治療藥物糖皮質(zhì)激素對(duì)單核細(xì)胞亞群的影響尚有待闡明。 目的：研究單核細(xì)胞三亞群(經(jīng)典型、中間型和非經(jīng)典型)在NMO患者中的變化情況,探討其在NMO發(fā)病中的可能作用機(jī)制。進(jìn)一步觀察糖皮質(zhì)激素沖擊治療對(duì)單核細(xì)胞亞群分布的影響,為應(yīng)用針對(duì)單核細(xì)胞及其細(xì)胞因子的治療方法治療NMO提供理論依據(jù)。 方法：本研究納入20例急性期NMO患者,以15例健康體檢者及10例非炎癥性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病(NIND)患者為對(duì)照；NMO患者分別于糖皮質(zhì)激素沖擊治療前及沖擊治療結(jié)束時(shí)行EDSS評(píng)分。通過(guò)對(duì)外周血單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行CD14及CD16鼠抗人單克隆抗體染色,流式細(xì)胞儀檢測(cè),根據(jù)單核細(xì)胞上CD14和CD16的表達(dá)情況,將單核細(xì)胞分為三個(gè)亞群：CD14++CD16-(經(jīng)典型)、CD14++CD16+(中間型)和CD14+CD16++(非經(jīng)典型),從而獲得單核細(xì)胞三個(gè)亞群所占百分比數(shù)據(jù)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)單核細(xì)胞IL-1β、TNF-αmRNA表達(dá)及ELISA方法檢測(cè)血漿及腦脊液中IL-1β、TNF-α含量。分析比較各組之間在上述指標(biāo)之間的差異性及相關(guān)性。使用SPSS17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)果：NMO患者較正常對(duì)照組單核細(xì)胞非經(jīng)典型亞群及中間型亞群明顯擴(kuò)增,而經(jīng)典型亞群則明顯減少；糖皮質(zhì)激素治療后NMO患者單核細(xì)胞非經(jīng)典型亞群出現(xiàn)顯著減少,中間型亞群比例無(wú)明顯變化,而單核細(xì)胞經(jīng)典型亞群則明顯增加；NMO患者治療后EDSS評(píng)分較治療前EDSS評(píng)分有顯著改善：?jiǎn)魏思?xì)胞非經(jīng)典型及經(jīng)典型亞群治療前后的變化與治療前后EDSS評(píng)分改善呈正相關(guān),而中間型亞群變化則與EDSS改善無(wú)相關(guān)性；治療前NMO患者,單核細(xì)胞IL-1β、TNF-α mRNA相對(duì)表達(dá)及血漿、腦脊液IL-1β、TNF-α水平升高,經(jīng)糖皮質(zhì)激素沖擊治療后均較治療前下降；治療前NMO患者IL-1β、TNF-α mRNA相對(duì)表達(dá)與非經(jīng)典型單核細(xì)胞亞群比例呈正相關(guān),與中間型單核細(xì)胞亞群及經(jīng)典型單核細(xì)胞亞群比例無(wú)相關(guān)性。NMO患者治療前后血漿IL-1β、TNF-α變化與EDSS評(píng)分改善呈正相關(guān)。 結(jié)論： 1、NMO患者CD16+單核細(xì)胞比例增高,CD16-單核細(xì)胞比例減少,存在CD16+/CD16-單核細(xì)胞比例失衡； 2、急性期NMO患者非經(jīng)典型單核細(xì)胞亞群增高可能通過(guò)增加IL-1β、TNF-α的表達(dá)與分泌,參與NMO疾病的發(fā)生； 3、糖皮質(zhì)激素沖擊治療可通過(guò)抑制單核細(xì)胞非經(jīng)典型亞群的擴(kuò)增及IL-1β、 TNF-α的表達(dá)分泌,糾正CD16+/CD16-單核細(xì)胞失衡,發(fā)揮對(duì)NMO的治療作用。
[Abstract]:Background: mononuclear cells as important innate immune cells, with obvious heterogeneity, based on cell surface expression of CD16 molecules, divided into classical subsets (CD14++CD16-), intermediate subgroup (CD14++CD16+) and non classical subsets (CD14+CD16++), proinflammatory cytokines IL-1 and TNF- alpha - beta the classical subsets cytokine secretion of the major subgroup.CD16+ than CD16- subgroup has stronger proinflammatory effects, which in a variety of inflammatory diseases, especially autoimmune diseases with obvious amplification, the secretion of proinflammatory cytokines and TNF- alpha IL-1 beta increased, so that it plays an important role in the pathogenesis of their own autoimmune diseases in neuromyelitis optica (NMO) is a central nervous system autoimmune disease (CNS), monocyte activation of immune cells is one of the CNS sites of inflammation at first, proinflammatory cytokines IL-1 and TNF- alpha beta in NMO The pathological process of birth. But at present, the change of three subsets of monocytes in NMO and the effect of conventional NMO therapy glucocorticoids on monocyte subsets need to be elucidated.
Objective: To study the mononuclear cells of Sanya group (classic type, intermediate type and non classical) changes in NMO patients and to explore its possible role in the pathogenesis of NMO. The mechanism to further observe the impact of glucocorticoid treatment on monocyte subsets, and provide a theoretical basis for the treatment methods for the single nuclear cells and the treatment of NMO.
Methods: the study included 20 cases of acute NMO patients, 15 healthy subjects and 10 patients with non inflammatory diseases of the central nervous system (NIND) were selected as control; NMO patients were treated with corticosteroid treatment before and after treatment by EDSS scores. The impact of CD14 and CD16 monoclonal antibody staining by peripheral blood mononuclear cells, flow cytometry, according to the expression of mononuclear cells of CD14 and CD16, the mononuclear cells were divided into three subgroups: CD14++CD16- (classical), CD14++CD16+ (intermediate) and CD14+CD16++ (non classical), so as to obtain mononuclear cells of three subgroups the percentage of data. Real time fluorescence quantitative PCR detection of monocyte IL-1 beta, plasma and cerebrospinal fluid detection of alpha mRNA expression and ELISA method in TNF- IL-1 beta, TNF- alpha content. Analysis and comparison between the differences in the above indexes and the correlation between the use of SPSS17. .0 software packages are statistically processed.
Results: NMO patients compared with normal control group, mononuclear cells of non classical subsets and intermediate subsets significantly amplified, and classical subsets decreased; after glucocorticoid treatment of monocytes in patients with NMO non classical subsets significantly reduced, intermediate subgroup had no obvious change, while the single core classic cell subsets increased significantly; NMO patients EDSS score before treatment EDSS score improved significantly: mononuclear cells and non changes before and after the treatment of classic and classic subsets of treatment EDSS score improvement was positively correlated, and changes of subsets and EDSS to improve the relevance of NMO before treatment; patients, monocyte IL-1 beta, TNF- alpha and mRNA expression in plasma, CSF IL-1 beta, elevated TNF- levels, the impact of glucocorticoid treatment were decreased than before treatment; before treatment in patients with NMO IL-1 beta, TNF- alpha and mRNA expression The proportion of classical monocyte subsets is positively correlated, and has no correlation with the proportion of intermediate monocyte subsets and classical monocyte subsets. The changes of plasma IL-1 beta and TNF- alpha in.NMO patients are positively correlated with the improvement of EDSS score.
Conclusion:
1, the proportion of CD16+ mononuclear cells in NMO patients was higher, and the proportion of CD16- monocytes decreased, and the proportion of CD16+/CD16- mononuclear cells was unbalance.
2, the increase of non classical monocyte subsets in acute NMO patients may be involved in the occurrence of NMO disease by increasing the expression and secretion of IL-1 beta, TNF- alpha.
3, glucocorticoid pulse therapy can suppress the imbalance of CD16+/CD16- monocyte and play a role in the treatment of NMO by inhibiting the amplification of monocyte non classical subpopulations and the expression and secretion of IL-1 and TNF-.

【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R744.52

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