本文關(guān)鍵詞： 帕金森病 腦深部電刺激 水迷宮 大鼠 多巴胺受體　出處：《山西醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:研究表明PD患者不但存在運(yùn)動(dòng)障礙,而且伴隨認(rèn)知功能的下降,例如自由回憶能力、工作記憶和策略記憶,這種下降甚至在PD患者的早期就出現(xiàn)[1]。嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量。腦深部電刺激術(shù)(DBS)已成為一種治療帕金森病等運(yùn)動(dòng)障礙性疾病的外科手段[2]。但以往研究者主要將目光投向DBS對異動(dòng)癥的作用,較少關(guān)注對認(rèn)知記憶的影響。本實(shí)驗(yàn)通過6羥基多巴胺(6-OHDA)核團(tuán)注射制備PD大鼠,在丘腦底核深部電刺激術(shù)(STN-DBS)治療后利用Morris水迷宮做行為學(xué)測試,探討經(jīng)深部電刺激治療后帕金森大鼠認(rèn)知和記憶的變化,再通過免疫組化檢測觀察海馬區(qū)多巴胺D1受體是否有變化。方法:本實(shí)驗(yàn)利用腦立體定位技術(shù)在大鼠單側(cè)中腦黑質(zhì)致密部(SNc)和中腦腹側(cè)被蓋區(qū)(VTA)兩點(diǎn)注射6-OHDA建立PD大鼠模型,阿撲嗎啡誘導(dǎo)旋轉(zhuǎn)鑒定模型是否成功。PD模型建立后進(jìn)行觸須前肢反射測試,鑒定PD大鼠運(yùn)動(dòng)機(jī)能的損傷程度。將PD大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為PD組,假刺激組,刺激組。從植入電極的30只PD模型大鼠中以完全隨機(jī)數(shù)字表法取出15只大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。每日固定時(shí)刻給以連續(xù)脈沖刺激,脈沖0.06ms,刺激輸出頻率130Hz,刺激輸出強(qiáng)度1.5v,刺激持續(xù)時(shí)間30mins,共進(jìn)行8d。對于假刺激組,在植入電極的30只PD模型大鼠中剔除刺激組剩余的大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。假刺激組電極植入手術(shù)方式和動(dòng)物飼養(yǎng)條件同刺激組,電極接通電生理刺激器和刺激隔離器,但不予通電。分別于刺激前中后行阿撲嗎啡(APO)旋轉(zhuǎn)行為學(xué)測試和Morris水迷宮各項(xiàng)指標(biāo)測定。組織學(xué)檢查石蠟包埋后切片至STN,觀察刺激電極位置是否準(zhǔn)確。采用免疫組織化學(xué)兩步法進(jìn)行抗酪氨酸羥化酶(TH)和海馬區(qū)多巴胺D1受體染色。探索長時(shí)間的高頻電刺激是否對PD大鼠的認(rèn)知記憶產(chǎn)生保護(hù)作用。結(jié)果:1.尼氏染色結(jié)果顯示:6-ohda制作pd模型藥物被準(zhǔn)確注射到目標(biāo)核團(tuán),即snc和vta。亞鐵氰化鉀灌注結(jié)果顯示:電極準(zhǔn)確植入鼠腦stn位置。2.第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示通過向健康雄性sd大鼠snc和vta二點(diǎn)注射6-ohda,并經(jīng)阿撲嗎啡(apo)誘導(dǎo)判斷的方法制備出成功偏側(cè)的pd模型,再經(jīng)觸須前肢反射測試,pd大鼠出現(xiàn)陽性反射。這對pd大鼠大腦損傷對側(cè)肢體的運(yùn)動(dòng)障礙做出準(zhǔn)確的鑒定。然后通過morris水迷宮做認(rèn)知記憶實(shí)驗(yàn),可見定位航行實(shí)驗(yàn):在連續(xù)4d的訓(xùn)練后:1)pd組與正常組相比,無法通過訓(xùn)練登臺,且游泳軌跡固定分布于各個(gè)象限。正常組與pd組(p=0.009)相比,平均尋臺潛伏期明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01);2)正常組的平均游泳速度明顯小于pd組;3)pd組與正常組相比,游泳距離明顯增多(p0.01)。在空間探索實(shí)驗(yàn):1)正常組大鼠利用空間線索,運(yùn)動(dòng)軌跡多位于平臺象限,帕金森大鼠多繞池壁游泳,軌跡分布于各個(gè)象限;2)正常組大鼠穿越平臺次數(shù)、平臺象限運(yùn)動(dòng)時(shí)間百分比和平臺路程百分比均多于pd組大鼠(p0.05)。3.第二部分在第一部分實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,于術(shù)后第8天起行stn-dbs刺激實(shí)驗(yàn)。從植入電極的30只pd模型大鼠中以完全隨機(jī)數(shù)字表法取出15只大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果三組刺激前的轉(zhuǎn)數(shù)無差異,假刺激組和pd組在刺激前、刺激中和刺激后轉(zhuǎn)數(shù)差異不顯著。當(dāng)刺激組受刺激時(shí)轉(zhuǎn)數(shù)顯著下降(p0.01),刺激后2min時(shí)轉(zhuǎn)數(shù)有回升但仍顯著低于刺激前。morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果示:在連續(xù)4d的定位航行實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練后,1)刺激組大鼠經(jīng)過一段時(shí)間的訓(xùn)練和引導(dǎo),最終有部分大鼠可以找到并且爬上平臺。刺激組分別與pd組(p=0.009)和假刺激組(p=0.006)相比,平均尋臺潛伏期明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01),而正常組平均逃避潛伏期明顯少于其余三組。假刺激組與pd組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);2)刺激組的平均游泳速度明顯小于pd組(p=0.002)和假刺激組(p=0.002)而大于正常對照組(p=0.001),pd組與假刺激組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);3)PD組(P=0.002)和假刺激組(P=0.001)的游泳距離明顯多于刺激組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義�？臻g探索實(shí)驗(yàn):1)正常組大鼠利用空間線索,運(yùn)動(dòng)軌跡多位于平臺象限,帕金森大鼠和假刺激大鼠多繞池壁游泳,軌跡分布于各個(gè)象限。刺激組大鼠在平臺象限運(yùn)動(dòng)時(shí)間和路程均多于PD組和假刺激組大鼠;2)刺激組穿越平臺次數(shù)比PD組(P=0.003)和假刺激組(P=0.022)增加,PD組和假刺激組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.510)。刺激后免疫組化結(jié)果示:酪氨酸羥化酶(TH)和海馬區(qū)多巴胺D1受體中PD組、假刺激組和刺激組比正常對照組的細(xì)胞均減少。除正常組外,其余三組的TH組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。刺激組的多巴胺D1受體細(xì)胞比PD組和假刺激組細(xì)胞數(shù)有所增加(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:PD大鼠存在認(rèn)知和記憶問題,與正常大鼠存在明顯差異;經(jīng)過STN-DBS治療后,行為學(xué)檢測有明顯療效。水迷宮實(shí)驗(yàn)證明認(rèn)知能力得到了改善。影響認(rèn)知能力的多巴胺受體得到了一定的保護(hù)作用,可能由于DBS促使某神經(jīng)保護(hù)因子的釋放,延緩了病情的發(fā)展。
[Abstract]:Objective : The study showed that PD patients had not only movement disorders but also decreased cognitive function , such as free recall ability , working memory and strategy memory , and this decrease even occurred early in PD patients . Deep brain electrical stimulation ( DBS ) has become a surgical instrument for the treatment of Parkinson ' s disease . The experimental results were as follows : 6 - ohda was used to study the changes of cognitive and memory of PD rats . There was no significant difference between stimulation group ( P = 0.002 ) and sham stimulation group ( p = 0 . 002 ) and sham stimulation group ( p = 0 . 001 ) .

【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R742.5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 王曼;劉曉莉;;多巴胺在運(yùn)動(dòng)改善帕金森病學(xué)習(xí)記憶障礙中的調(diào)節(jié)作用[J];中國老年學(xué)雜志;2016年10期

，

本文編號：1522154