發(fā)布時(shí)間：2018-02-03 06:31

  本文關(guān)鍵詞： 超聲微泡 骨髓間充質(zhì)細(xì)胞 血腦屏障 學(xué)習(xí)記憶　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2014年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：缺血性中風(fēng)是致死、致殘的主要病因之一。腦損傷很容易遺留永久性神經(jīng)功能缺失，其原因體現(xiàn)在腦組織對(duì)自身的損傷修復(fù)能力不強(qiáng)，同時(shí)采用藥物治療效果不佳。研究學(xué)者通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)以及臨床實(shí)驗(yàn)證明：移植胚胎神經(jīng)細(xì)胞和多能干細(xì)胞可促進(jìn)損傷腦組織的修復(fù)，改善神經(jīng)功能缺失癥狀，，提示細(xì)胞移植方法是治療缺血腦損傷的很有希望的途徑。大量實(shí)驗(yàn)研究表明,骨髓間質(zhì)細(xì)胞(bone marrow stromal cells, BMSC)是最有潛力的一種修復(fù)細(xì)胞，其在腦內(nèi)移植后，能夠存活下來，并不斷遷移和分化，而后在一定程度上修復(fù)腦梗死后神經(jīng)功能的障礙。移植細(xì)胞促進(jìn)腦損傷修復(fù)的機(jī)制包括替代壞死細(xì)胞功能、抑制局部瘢痕形成和促進(jìn)損傷局部神經(jīng)再生等，而移植細(xì)胞向腦損傷局部的遷移是促進(jìn)腦損傷修復(fù)的前提。因此，探討促進(jìn)移植細(xì)胞向腦損傷局部遷移的措施有非常重要的實(shí)際意義。 血腦屏障影響經(jīng)靜脈移植細(xì)胞向腦損傷局部的遷移，降低移植治療效果。近年研究發(fā)現(xiàn)，超聲聯(lián)合微泡技術(shù)可安全、有效地暫時(shí)性開放血腦屏障，促進(jìn)治療藥物通過血腦屏障，提高腦實(shí)質(zhì)內(nèi)藥物濃度，達(dá)到提高治療效果的目的。但目前尚未見到超聲聯(lián)合微泡技術(shù)對(duì)移植細(xì)胞向腦內(nèi)遷移影響的研究報(bào)道。因此，深入探討超聲聯(lián)合微泡技術(shù)促進(jìn)經(jīng)靜脈移植骨髓間質(zhì)細(xì)胞向腦內(nèi)遷移的可能性及其機(jī)制，有望為缺血性中風(fēng)帶來新的治療途徑。 研究?jī)?nèi)容：(1)評(píng)價(jià)大鼠前腦缺血/再灌注模型血腦屏障完整性：光鏡和電鏡下觀察模型動(dòng)物血腦屏障完整性：包括腦血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接、基底膜和星形膠質(zhì)細(xì)胞偽足完整性；觀察血腦屏障結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)：包括腦血管內(nèi)皮細(xì)胞；閉合蛋白claudin-5基底膜；IV膠原、層連蛋白星型膠質(zhì)細(xì)胞突起；S100B蛋白等；評(píng)價(jià)血腦屏障功能：光鏡觀察伊文思藍(lán)滲出量，電鏡下觀察硝酸鑭染色。(2)觀察超聲聯(lián)合微泡技術(shù)對(duì)前腦缺血/再灌注大鼠血腦屏障通透性的影響：(3)觀察超聲聯(lián)合微泡技術(shù)能否影響經(jīng)靜脈移植的骨髓間質(zhì)細(xì)胞向缺血性腦損傷區(qū)遷移的活動(dòng)：觀察體外擴(kuò)增和鑒定骨髓間質(zhì)細(xì)胞；觀察經(jīng)靜脈注射移植骨髓間質(zhì)細(xì)胞；不比較骨髓間質(zhì)細(xì)胞向腦缺血損傷區(qū)遷移的數(shù)量和距離；觀察AchE陽性纖維密度。(4)觀察超聲聯(lián)合微泡技術(shù)對(duì)經(jīng)靜脈移植的骨髓間質(zhì)細(xì)胞對(duì)大鼠神經(jīng)功能的影響:水迷宮試驗(yàn)觀察空間學(xué)習(xí)、記憶能力。 研究結(jié)果：(1)缺血再灌注模型可以在一定程度上增加血腦屏障通透性。(2)超聲微泡可以開放腦缺血/再灌注血腦屏障。(3)超聲微泡可以有效開放BBB，并促進(jìn)MSCS向腦內(nèi)遷移和AchE陽性纖維增多。(4)超聲微泡聯(lián)合MSCs移植可以促進(jìn)前腦缺血大鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力。 研究結(jié)論：超聲微泡可以顯著促進(jìn)骨髓間充質(zhì)細(xì)胞向腦內(nèi)的遷移，進(jìn)而促進(jìn)前腦缺血大鼠行為能力的顯著提高，MSCs顱內(nèi)移植可以改善前腦缺血大鼠的空間學(xué)習(xí)能力，對(duì)記憶能力影響小。MSCs取材簡(jiǎn)單，擴(kuò)增迅速，來源豐富，MSCs移植治療腦缺血具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。但超聲微泡開放血腦屏障的機(jī)制和MSCs顱內(nèi)移植移植促進(jìn)神經(jīng)功能改善的機(jī)制尚需要進(jìn)一步的探索。
[Abstract]:Experimental study shows that bone marrow stromal cells ( BMSC ) are the most promising ways to repair ischemic brain injury . In recent years , it has been found that ultrasound combined with micro - bubble technology is safe and effective to temporarily open the blood - brain barrier , promote the drug concentration in brain parenchyma and improve the therapeutic effect . Objective : To investigate the effects of ultrasound combined with micro - bubble technique on blood - brain barrier permeability in rats with cerebral ischemia / reperfusion : ( 3 ) To observe the effect of ultrasound combined with microbubble technology on the permeability of blood - brain barrier in rats with cerebral ischemia / reperfusion . Results : ( 1 ) The model of ischemia - reperfusion can increase the permeability of blood - brain barrier to a certain extent . ( 2 ) The ultrasound microbubble can open the cerebral ischemia / reperfusion blood - brain barrier . ( 3 ) The ultrasound microbubble can effectively open the BBB and promote the increase of the migration and AchE - positive fibers in the brain . Conclusion : Ultrasound microbubble can significantly promote the migration of bone marrow mesenchymal cells to the brain , and further promote the behavior of the rats with cerebral ischemia . MSCs can improve the spatial learning ability of the rats with cerebral ischemia and have a little influence on the memory ability . MSCs can be used for the treatment of cerebral ischemia with a wide prospect of clinical application . However , the mechanism of opening the blood brain barrier and the mechanism of the MSCs transplantation for promoting the improvement of neural function need further exploration .

【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R743.3

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 ;Application of ultrasound microbubble contrast technology in ophthalmic targeted therapy:literature analysis[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2011年05期

2 劉平,高云華,譚開彬,劉政,朱小虎;腦超聲造影中超聲強(qiáng)度對(duì)血腦屏障通透性的影響[J];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)雜志;2005年07期

3 楊延慶;程遠(yuǎn);宋_g;梅杰;李發(fā)琪;王智彪;李攀;;MRI引導(dǎo)聚焦超聲聯(lián)合微泡開放血腦屏障的時(shí)效關(guān)系[J];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)雜志;2008年09期

本文編號(hào)：1486696