發(fā)布時(shí)間：2018-01-20 04:15

  本文關(guān)鍵詞： 熱休克蛋白A(HSPA) -甲基腺嘌呤(-MA) 自噬 缺血再灌注損傷 小鼠　出處：《神經(jīng)解剖學(xué)雜志》2017年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:比較研究熱休克蛋白A5(HSPA5)和3-甲基腺嘌呤(3-MA)介導(dǎo)小鼠腦缺血再灌注(I/R)損傷性自噬的保護(hù)作用。方法:成年雄性BALB/c小鼠30只,分為6組:sham組、缺血再灌注組(I/R組)、vehicle+I/R組、3-甲基腺嘌呤(3-MA)+I/R組、scramble siRNA+I/R組和HSPA5 siRNA+I/R組,每組5只。采用大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)60 min后再灌注24 h制作小鼠I/R模型。Vehicle+I/R組和3-MA+I/R將5μl 0.9%Na Cl或3-MA(30 mg/ml)在MCAO前30 min側(cè)腦室注射;scramble siRNA+I/R group組和HSPA5 siRNA+I/R組將5μl scramble siRNA或HSPA5 siRNA(2μg/μl)在MCAO前24 h側(cè)腦室注射。通過小鼠I/R后神經(jīng)功能評(píng)分確定運(yùn)動(dòng)功能障礙程度。小鼠神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)自噬體形成用透射電子顯微鏡測(cè)定,再灌注24 h缺血大腦皮層(LC3)-II/LC3-I表達(dá)用Western Blot方法檢測(cè)。小鼠I/R后缺血大腦神經(jīng)細(xì)胞損傷用Nissl染色進(jìn)行觀察。結(jié)果:HSPA5和3-MA可以影響I/R小鼠行為學(xué)改變并使腦缺血性損傷和神經(jīng)癥狀加重(P0.05)。透射電子顯微鏡檢測(cè)可見,sham組小鼠大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)正常,I/R組小鼠缺血大腦皮層神經(jīng)元胞質(zhì)中細(xì)胞器減少,形成自噬體。與sham組小鼠比較,I/R組小鼠缺血大腦皮層LC3-II蛋白表達(dá)水平顯著增高(P0.05);3-MA+I/R或HSPA5 siRNA+I/R小鼠缺血大腦皮層LC3-II蛋白表達(dá)水平明顯低于I/R小鼠(P0.05)。結(jié)論:HSPA5和3-MA在介導(dǎo)小鼠腦缺血再灌注損傷導(dǎo)致的自噬可發(fā)揮相同的保護(hù)作用,并且促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Objective: to compare the effects of heat shock protein A5 (HSPA5) and 3-methyladenine 3-MA) on cerebral ischemia-reperfusion (I / R) in mice. Methods: 30 adult male BALB/c mice. They were divided into 6 groups: sham group, ischemia reperfusion group, I / R group, I / R group, I / R group) I / R group. Scramble siRNA I / R group and HSPA5 siRNA I / R group. Middle cerebral artery occlusion (MCAO). Mice I / R model. Vehicle I / R group and 3-MA I / R group were perfused with 5 渭 l NaCl or 3-MAR for 24 h after reperfusion for 60 min. 30 mg / ml was injected into the lateral ventricle 30 min before MCAO. The scramble siRNA I / R group group and the HSPA5 siRNA I / R group will be 5 渭 l scramble siRNA or HSPA5. SiRNAs. 2 渭 g / 渭 l). The degree of motor dysfunction was determined by the neurological function score of mice after I / R 24 hours before MCAO. The formation of autophagy in mouse nerve cells was measured by transmission electron microscope. Cerebral cortex (LC3) after 24 h reperfusion. The expression of -II / LC3-I was detected by Western Blot method. The injury of cerebral nerve cells after I / R in mice was observed by Nissl staining. HSPA5 and 3-MA could affect behavioral changes and aggravate ischemic brain injury and neurological symptoms in I / R mice (P < 0.05). P0.05. Transmission electron microscopy can be seen. The morphology of cerebral cortex neurons in sham group was normal. The organelles in ischemic cortex neurons decreased and autophagy was formed in II-R group, compared with sham group. In I / R group, the expression of LC3-II protein in ischemic cerebral cortex was significantly higher than that in control group (P 0.05). The expression of LC3-II protein in ischemic cerebral cortex of 3-MA I / R or HSPA5 siRNA I / R mice was significantly lower than that of I / R mice (P 0.05). Conclusion: HSPA5 and 3-MA may play the same protective effect on autophagy induced by cerebral ischemia-reperfusion injury in mice. And promote neuronal apoptosis.
【作者單位】： 臨夏州積石山縣醫(yī)院大外科;解放軍169醫(yī)院消化血液科;蘭州大學(xué)附屬第二醫(yī)院;解放軍蘭州總醫(yī)院干部病房;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81200247) 甘肅省自然科學(xué)基金(120RJZA274)
【分類號(hào)】：R743
【正文快照】： 韓世強(qiáng)1△,閔恒2△,任海軍3,張新宇4,付學(xué)鋒4*(1.臨夏州積石山縣醫(yī)院大外科,臨夏731700;2.解放軍169醫(yī)院消化血液科,衡陽(yáng)421000;3.蘭州大學(xué)附屬第二醫(yī)院,蘭州730030;4.解放軍蘭州總醫(yī)院干部病房,蘭州730050)腦缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)損傷是腦部缺血一定時(shí)間而

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