本文關鍵詞：缺氧缺糖致神經(jīng)元細胞損傷后NO與SDH、Caspase-3相關性研究

  更多相關文章： 神經(jīng)元 缺氧缺糖 一氧化氮 琥珀酸脫氫酶 Caspase-3 氨基胍

【摘要】：目的:觀察大鼠皮層神經(jīng)元經(jīng)缺氧缺糖處理后培養(yǎng)基中一氧化氮(NO)含量變化、琥珀酸脫氫酶(SDH)活性變化,以及Caspase-3蛋白表達的變化。方法:(1)取新生大鼠(24h)皮層腦組織,消化后種植在六孔板內(nèi),用含10%胎牛血清的DMEM-HG培養(yǎng)液接種,4h后用含2%B27的Neurobasal維持培養(yǎng)液培養(yǎng)。(2)不同時間點在倒置相差顯微鏡下觀察神經(jīng)元形態(tài)變化,免疫熒光法對神經(jīng)元進行鑒定。(3)原代培養(yǎng)8天的大鼠皮層神經(jīng)元,隨機分為3組:空白對照組、缺氧缺糖組,氨基胍給藥組。(4)采用硝酸還原法檢測培養(yǎng)基中NO的含量,分光光度法檢測培養(yǎng)液中SDH活性,Western-Blot技術檢測Caspase-3蛋白表達。結(jié)果:(1)成功原代培養(yǎng)新生大鼠皮層神經(jīng)元,經(jīng)免疫熒光法鑒定神經(jīng)元純度達90%以上。(2)缺氧缺糖組NO含量均較空白對照組明顯增加(p0.05),且呈現(xiàn)逐漸增高的趨勢;與缺氧缺糖組相比,氨基胍給藥組各時間點NO含量均明顯減少,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。(3)缺氧缺糖組SDH活力較空白對照組明顯降低(p0.05),且呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢;與缺氧缺糖組相比,氨基胍給藥組各時間點SDH活力均明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。(4)缺氧缺糖組Caspase-3蛋白表達均高于空白對照組(p0.05);與缺氧缺糖組相比,氨基胍給藥組Caspase-3蛋白表達均明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。結(jié)論:缺氧缺糖可導致皮層神經(jīng)元一氧化氮過量產(chǎn)生,造成神經(jīng)元的損傷;氨基胍可以抑制缺氧缺糖大鼠皮層神經(jīng)元NO過量生成、SDH活力的下降以及Caspase-3的表達,從而抑制皮質(zhì)神經(jīng)元的凋亡,對神經(jīng)元具有保護作用。
【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R743.35

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