本文關(guān)鍵詞：丁苯酞對(duì)氯化鈷誘導(dǎo)SK-N-SH細(xì)胞損傷的保護(hù)作用

  更多相關(guān)文章： 丁苯酞 缺氧損傷 細(xì)胞凋亡 SK-N-SH細(xì)胞 缺氧誘導(dǎo)因子

【摘要】：目的：探討丁苯酞對(duì)氯化鈷誘導(dǎo)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株SK-N-SH細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其作用機(jī)制。方法：將神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株SK-N-SH分為四組,分別是高濃度丁苯酞組、低濃度丁苯酞組、氯化鈷組、對(duì)照組。其中丁苯酞組細(xì)胞株分別用丁苯酞氯化鈉注射液1μmol/L、10μmol/L預(yù)處理4h后,加入250μmol/L的氯化鈷處理6h；氯化鈷組細(xì)胞株用250μmol/L的氯化鈷處理6h；對(duì)照組細(xì)胞不作任何處理,細(xì)胞于5% CO237℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),取對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。鏡下觀察不同組間的SK-N-SH細(xì)胞表型；MTT法檢測(cè)不同組間細(xì)胞活力；通過Western blot法觀察細(xì)胞HIF-1α、Bax、Bcl-2等蛋白的表達(dá)變化；通過Hoechst染色法,了解各組細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果：1.鏡下觀察不同組間的SK-N-SH細(xì)胞表型結(jié)果顯示,氯化鈷組SK-N-SH細(xì)胞有較少神經(jīng)突出,有一定數(shù)量漂浮死亡(與對(duì)照組相比),隨著丁苯酞濃度增加,SK-N-SH細(xì)胞漂浮死亡數(shù)目減少,神經(jīng)細(xì)胞神經(jīng)突出增加。2.MTT結(jié)果顯示,藥物干預(yù)組中細(xì)胞活力顯著降低(P0.001)(與對(duì)照組相比)；低濃度丁苯酞(1μmol/L)組細(xì)胞活力顯著增加(P0.01)(與氯化鈷組相比)；高濃度丁苯酞組(10μmol/L)細(xì)胞活力顯著增加(P0.001)(與氯化鈷相比)；不同濃度丁苯酞間相比,高濃度組細(xì)胞活力顯著增加(P0.001)。3. Hoechst染色法結(jié)果顯示,氯化鈷組SK-N-SH細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞核固縮,鏡下呈現(xiàn)強(qiáng)藍(lán)色熒光,凋亡比例上升(與對(duì)照組相比)。隨著丁苯酞濃度增加,SK-N-SH細(xì)胞強(qiáng)藍(lán)色熒光數(shù)目減少,凋亡比例下降。4. Western blot結(jié)果表明,藥物干預(yù)組(氯化鈷組及丁苯酞組)Bax及HIF-1α蛋白表達(dá)顯著上調(diào)(P0.001),Bc1-2蛋白表達(dá)均顯著下調(diào)(P0.01)(與對(duì)照組相比)；丁苯酞組Bax蛋白表達(dá)顯著下調(diào)(P0.001), Bcl-2、HIF-1α蛋白表達(dá)均顯著上調(diào)(P0.001)(與氯化鈷相比)；高濃度丁苯酞組Bax蛋白表達(dá)顯著下調(diào)(P0.001),Bcl-2、HIF-1α蛋白表達(dá)顯著上調(diào)(P0.001)(與低濃度丁‘苯酞組相比)。結(jié)論：1.丁苯酞明顯升高缺氧導(dǎo)致的SK-N-SH細(xì)胞的存活率,對(duì)其起保護(hù)作用。2.丁苯酞使氯化鈷誘導(dǎo)SK-N-SH細(xì)胞的凋亡比率下降,其機(jī)制通過激活HIF-1α途徑上調(diào)Bcl-2,下調(diào)Bax,從而發(fā)揮可阻斷缺氧所致SK-N-SH細(xì)胞凋亡的過程。
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R743.3

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本文編號(hào)：1229940