Ad.RGD-ING4-PTEN對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲的影響
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【摘要】:目的:探討經(jīng)RGD修飾的生長抑制因子4(inhibitor of growth 4,ING4)基因與第10染色體缺失與張力蛋白同源的磷酸酶基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten,PTEN)雙基因共表達(dá)的腺病毒載體(Ad.RGD-ING4-PTEN)體外對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞的增殖、凋亡及侵襲的影響。方法:以Ad.RGD-ING4-PTEN為實(shí)驗(yàn)組,Ad.RGD-ING4/-PTEN為單基因?qū)φ战M,PBS、Ad.RGD/Ad-GFP為空白對(duì)照組,分別體外感染U87神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞。Western blotting檢測(cè)目的基因ING4和PTEN在U87細(xì)胞中的表達(dá),MTT法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組病毒感染對(duì)U87細(xì)胞增殖的影響,流式細(xì)胞術(shù)及Real-time PCR法檢測(cè)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)基因(Bcl-2、Bax、caspase-3、HIF-1α)表達(dá)變化,劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組病毒感染對(duì)U87細(xì)胞遷移及侵襲能力的影響,Real-time PCR法檢測(cè)侵襲相關(guān)基因(MMP-2、MMP-9)表達(dá)變化。結(jié)果:成功檢測(cè)到ING4和PTEN僅在實(shí)驗(yàn)組及相應(yīng)單基因?qū)φ战M中表達(dá)。實(shí)驗(yàn)組第5天細(xì)胞抑制率可達(dá)(83.1±4.6)%、凋亡率可達(dá)(40.7±4.3)%,與單基因組及空白對(duì)照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);實(shí)驗(yàn)組能明顯上調(diào)U87細(xì)胞中Bax、caspase-3和下調(diào)HIF-1α、Bcl-2等細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)(均P0.05),而且腫瘤侵襲相關(guān)分子MMP-2、MMP-9的表達(dá)也明顯下調(diào)(均P0.05);實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞遷移距離[(70.1±6.2)μm]和穿膜細(xì)胞數(shù)[(26.6±3.5)個(gè)]均明顯減少,與單基因組及空白對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.05)。結(jié)論:與單基因腺病毒相比,Ad.RGD-ING4-PTEN雙基因具有更顯著的抑制U87神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)其凋亡,并抑制其遷移及侵襲能力。
【作者單位】: 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬上海兒童醫(yī)學(xué)中心血液腫瘤科;蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部細(xì)胞與分子生物學(xué)教研室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金青年基金資助項(xiàng)目(No.81001016)~~
【分類號(hào)】:R739.41
【正文快照】: 神經(jīng)膠質(zhì)瘤是人類發(fā)病率最高的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤,約占顱腦腫瘤的46%[1];中位生存時(shí)間約為1年,5年生存率不足5%[2]。該病確切的發(fā)病機(jī)制尚不清楚,其發(fā)展過程是多步驟多因素所致[3]。現(xiàn)階段主要治療手段是手術(shù)治療,術(shù)后輔以放療和化療,但總體療效不理想。近年來,隨著
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1 陳贊,楊立莊,葉偉,王伊龍,趙鵬,李永利,康軍,鄭永日,曹陽;神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞熱休克蛋白抗原肽復(fù)合物的研究[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2003年05期
2 陳贊 ,楊立莊 ,葉偉;神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞熱休克蛋白抗原肽復(fù)合物的研究[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2003年05期
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4 周文光;李南華;王廷芳;;鼻內(nèi)型神經(jīng)膠質(zhì)瘤一例[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;1990年02期
5 ;顱面神經(jīng)膠質(zhì)瘤[J];國外醫(yī)學(xué).耳鼻咽喉科學(xué)分冊(cè);1997年02期
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本文編號(hào):1208218
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