本文關(guān)鍵詞：不同機制細胞毒性藥物對人少突膠質(zhì)細胞系α-突觸核蛋白表達的影響

  更多相關(guān)文章： 多系統(tǒng)萎縮 α-突觸核蛋白 少突膠質(zhì)細胞 MO3.13 3-硝基丙酸 3-甲基腺嘌呤 H_2O_2

【摘要】：目的： 多系統(tǒng)萎縮（MSA）的病因和發(fā)病機制不明，，可能由多種遺傳和環(huán)境因素相互作用引起。研究報道環(huán)境中的有毒物質(zhì)可致病，病理顯示膠質(zhì)細胞的廣泛改變，包括少突膠質(zhì)細胞胞漿包涵體（GCIs）的形成。GCIs為多系統(tǒng)萎縮特征性病理表現(xiàn)，是確診該病的重要病理標志物。GCIs的主要成分為α-突觸核蛋白。許多研究提示α-突觸核蛋白在神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病的發(fā)病過程中起著重要作用。目前，GCIs中α-突觸核蛋的來源及少突膠質(zhì)細胞內(nèi)α-突觸核蛋的聚集機制尚不明確。本研究通過體外細胞實驗觀察不同機制細胞毒性藥物對少突膠質(zhì)細胞內(nèi)α-突觸核蛋白表達的影響，探討多系統(tǒng)萎縮可能的發(fā)病機制。 方法： 本研究選用人類少突膠細胞系MO3.13細胞為研究對象，利用噻唑藍（MTT）法測定不同濃度細胞毒性藥物3-硝基丙酸（3-NP）、3-甲基腺嘌呤（3-MA）、H2O2對MO3.13細胞存活率的影響，篩選合適的藥物濃度。將實驗分為4組：正常對照組、5mM3-NP組、2mM3-MA組、1mM H2O2組，孵育細胞24小時，利用Western blot方法測定MO3.13少突膠質(zhì)細胞內(nèi)α-突觸核蛋白表達水平的變化，篩選陽性組。陽性組不同藥物濃度孵育MO3.13少突膠質(zhì)細胞24小時，利用Western blot方法、實時熒光定量PCR方法、免疫熒光細胞化學染色方法等測定MO3.13少突膠質(zhì)細胞內(nèi)α-突觸核蛋白、SNCA mRNA的表達。 結(jié)果： 1、MTT結(jié)果示，3-NP組、3-MA組、H2O2組的細胞存活率分別隨藥物濃度的增加而遞減，呈濃度依賴性減少（P0.05）。 2、Western blot結(jié)果示，三組不同藥物處理組中，3-NP組與對照組相比明顯增加（34%）MO3.13細胞內(nèi)α-突觸核蛋白表達。3-NP組的細胞存活率降低與MO3.13細胞內(nèi)α-突觸核蛋白表達增加呈正相關(guān)。3-MA組、H2O2組的α-突觸核蛋白表達與對照組相比無明顯差異。 3、不同濃度3-NP處理MO3.13細胞24小時后，分別進行Westernblot、實時熒光定量PCR檢測，結(jié)果示MO3.13細胞內(nèi)α-突觸核蛋白和SNCA基因mRNA表達分別呈濃度依賴性增加（P0.05）。免疫組織細胞染色結(jié)果示，與對照組相比較，10mM3-NP組明顯增加MO3.13細胞內(nèi)α-突觸核蛋白的表達（P0.05）。 結(jié)論： 1、3-NP、3-MA、H2O2均可抑制人少突膠質(zhì)細胞系MO3.13細胞的增殖，對細胞有毒性作用。3-NP組細胞存活率的降低可能與α-突觸核蛋白表達增加有關(guān)。 2、線粒體復合體II不可逆性抑制劑3-NP可使MO3.13少突膠質(zhì)細胞內(nèi)α-突觸核蛋白和SNCA mRNA表達量增加。 3、線粒體功能損傷機制參與少突膠質(zhì)細胞內(nèi)α-突觸核蛋白的表達及聚集過程，該機制可能涉及多系統(tǒng)萎縮發(fā)病過程。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R741

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鐘小玲;黃飚;楊萬群;張玉虎;王麗娟;王麗敏;馮結(jié)映;;磁共振腦橋面積測量在鑒別C型多系統(tǒng)萎縮與帕金森病的診斷價值[J];放射學實踐;2013年11期

2 湯曉紅;崔焱;;多系統(tǒng)萎縮患者生存質(zhì)量的研究進展[J];中國護理管理;2014年01期

3 林志堅;陳旭輝;車秀娟;張海鷗;吳軍;;磁共振成像在多系統(tǒng)萎縮診斷與鑒別診斷中的應用價值[J];神經(jīng)損傷與功能重建;2014年01期

4 何冠勇;劉遠健;馮飛;劉漢橋;劉陽;劉鵬程;;小腦共濟失調(diào)型多系統(tǒng)萎縮腦干白質(zhì)定量DTT研究[J];放射學實踐;2014年05期

5 張沛然;郭改會;張子義;顧衛(wèi)紅;王康;金淼;王偉鋼;;多系統(tǒng)萎縮中醫(yī)證候分型及分布演變規(guī)律[J];中華中醫(yī)藥雜志;2014年11期

6 婁展;謝炳s

本文編號：1201897