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一種改進(jìn)的星形膠質(zhì)細(xì)胞原代培養(yǎng)方法

發(fā)布時(shí)間:2017-11-14 09:43

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【摘要】:目的改進(jìn)大鼠大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng),旨在通過較簡便的方法獲得高純度形態(tài)典型的星形膠質(zhì)細(xì)胞,為研究星形膠質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)作用提供實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀7椒ㄒ孕律笫鬄樾切文z質(zhì)細(xì)胞來源,利用不同規(guī)格的吸頭相互疊套,逐步機(jī)械吹打,使細(xì)胞分散,制備單細(xì)胞懸液;獲得的單細(xì)胞懸液用差速黏附處理去除成纖維細(xì)胞,原代培養(yǎng)14d后,恒溫振蕩法去除小膠質(zhì)細(xì)胞等雜質(zhì)細(xì)胞;膠質(zhì)細(xì)胞原纖維酸性蛋白(GFAP)和S100β免疫熒光共染色,鑒定細(xì)胞純度。結(jié)果這種改進(jìn)的星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)方法 ,分離培養(yǎng)出星形膠質(zhì)細(xì)胞,陽性率達(dá)95%以上。結(jié)論采用機(jī)械吹打方法建立原代星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系,是一種比較簡便、值得推廣的可用于體外細(xì)胞培養(yǎng)研究工作的有效方法。
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系;
【基金】:北京市自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(7142016) 首都醫(yī)科大學(xué)科研基金(技術(shù)類)(2015JS13)
【分類號(hào)】:R741
【正文快照】: 存在,為了深入了解其形態(tài)結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能,需要對星形膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行純化。以往有關(guān)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)的文獻(xiàn)很多,本文在參考了國內(nèi)外有關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上[1-5],對傳統(tǒng)的、使用胰酶消化來制備星形膠質(zhì)細(xì)胞的方法進(jìn)行了改良,旨在為進(jìn)一步深入研究星形膠質(zhì)細(xì)胞的功能奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。材

【相似文獻(xiàn)】

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