本文關(guān)鍵詞：大鼠缺氧預(yù)處理與缺血性腦損傷后外周及中樞免疫細(xì)胞的變化研究

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【摘要】：目的:檢測(cè)外周免疫細(xì)胞(T細(xì)胞、NK細(xì)胞)在缺氧預(yù)處理與缺血性腦損傷后外周血中的變化;檢測(cè)中樞免疫細(xì)胞(小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞)在缺氧預(yù)處理與缺血性腦損傷后大腦皮質(zhì)中表面標(biāo)記物的表達(dá)量變化以及細(xì)胞數(shù)目、形態(tài)變化;探討免疫系統(tǒng)在缺氧預(yù)處理與缺血性腦損傷中的變化及可能的作用機(jī)制。方法:將70只SPF級(jí)健康雄性SD(Sprague Dawley)大鼠按隨機(jī)分組法分成5組:正常對(duì)照組(N,12只)、假手術(shù)組(S,15只)、缺氧預(yù)處理組(HP,13只)、腦梗死組(M,15只)、缺氧預(yù)處理+腦梗死組(HM,15只)。MCAO術(shù)后24h用Longa5分評(píng)分法對(duì)大鼠神經(jīng)功能進(jìn)行評(píng)分;用imageJ軟件分析測(cè)量大鼠腦梗死面積;流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周動(dòng)脈血中T細(xì)胞(CD4+、CD8+百分率)和NK細(xì)胞;實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)梗死側(cè)大腦皮質(zhì)中Iba1、CNP-ase、GFAP mRNA表達(dá)水平;免疫組化觀察大鼠正常腦組織與梗死腦組織小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)目與形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果:與M組比較,HM組大鼠神經(jīng)功能缺損癥狀較輕,神經(jīng)功能評(píng)分較低(p0.05),腦梗死面積減小(p0.05);流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組T細(xì)胞(CD4+、CD8+百分率)、NK細(xì)胞(CD161+百分率)無(wú)差異(p0.05);各組PCR結(jié)果顯示:與N組比較,HP組大鼠Iba1基因表達(dá)量降低(p0.05),與M組比較,HM組大鼠Iba1基因表達(dá)量降低(p0.05);與N組比較,HP組大鼠CNP-ase基因表達(dá)量降低(p0.05);GFAP基因在各組無(wú)明顯變化(p0.05);各組免疫組化結(jié)果顯示:N組小膠質(zhì)細(xì)胞呈高度分支狀,HP組細(xì)胞形態(tài)及數(shù)目無(wú)明顯變化(p0.05);M組小膠質(zhì)細(xì)胞活化,突起數(shù)目減少或消失,細(xì)胞形態(tài)呈圓形或阿米巴狀,缺血邊緣區(qū)小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目增多(p0.05);HM組小膠質(zhì)細(xì)胞突起數(shù)目減少無(wú)M組明顯,細(xì)胞多為分支狀,缺血邊緣區(qū)小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目低于M組(p0.05);與N組比較,HP組星形膠質(zhì)細(xì)胞突起增粗,數(shù)目無(wú)明顯變化(p0.05);與N組比較,M組星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目增多(p0.05);M組和HM組星形膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生活化,細(xì)胞胞體增大,突起增長(zhǎng)增粗,缺血邊緣區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目增多,M組與HM組星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目無(wú)明顯差異性變化(p0.05);與N組比較,HP組少突膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目減少(p0.05),少突膠質(zhì)細(xì)胞在M組和HM組形態(tài)發(fā)生了變化,表現(xiàn)為突起增多、增粗,但這兩組間少突膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目未見(jiàn)明顯差異性變化(p0.05)。結(jié)論:1.缺氧預(yù)處理能夠減輕缺血性腦損傷后神經(jīng)功能缺損癥狀、減小腦梗死的面積,發(fā)揮腦保護(hù)作用;2.在腦梗死24h,梗死中心區(qū)神經(jīng)元數(shù)量明顯減少,小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞及少突膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量也減少,并且膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化,提示梗死一旦發(fā)生,會(huì)很快對(duì)腦細(xì)胞產(chǎn)生影響。3.缺氧預(yù)處理后,腦梗死大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)降低,活化狀態(tài)的細(xì)胞減少,提示缺氧預(yù)處理可能通過(guò)抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的進(jìn)一步活化,從而抑制其神經(jīng)毒性,發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用;少突膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞可能也參與了缺氧預(yù)處理腦保護(hù)作用。4.大鼠腦梗死24h后,外周血液中T淋巴細(xì)胞(CD3+/CD4+、CD3+/CD8+)和NK細(xì)胞(CD161+)百分率未見(jiàn)明顯升高,提示外周免疫細(xì)胞可能在卒中后不同時(shí)期變化不一致,免疫細(xì)胞功能的抑制或降低可能參與了腦卒中誘導(dǎo)的免疫抑制綜合征。
【學(xué)位授予單位】：青海大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R743.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1170920