本文關(guān)鍵詞：誘導(dǎo)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的中藥單體化合物的篩選及應(yīng)用研究

  更多相關(guān)文章： 腦缺血 神經(jīng)干細(xì)胞 神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)志物 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 藥物篩選

【摘要】：腦缺血是嚴(yán)重危害人類健康的常見腦血管疾病,腦缺血所致神經(jīng)功能損傷的根本原因是由腦損傷引起的神經(jīng)細(xì)胞死亡或凋亡。因此,減輕腦缺血后神經(jīng)功能損傷和促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)是治療腦缺血的重點(diǎn)。腦內(nèi)神經(jīng)元的再生能力極差,中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后,恢復(fù)神經(jīng)功能非常困難。雖然大腦內(nèi)有神經(jīng)干細(xì)胞,這些神經(jīng)干細(xì)胞可以分化成神經(jīng)元、少突膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞等神經(jīng)細(xì)胞,但神經(jīng)干細(xì)胞存在的部位和數(shù)量有限,將神經(jīng)干細(xì)胞用于神經(jīng)功能損傷修復(fù)存在局限性。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone-Marrow Mesenchymal Stem Cells, BMSCs)是來(lái)自成體的非造血干細(xì)胞,具有自我更新和分化能力。研究發(fā)現(xiàn),體外在特定培養(yǎng)條件下,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可向神經(jīng)干細(xì)胞、神經(jīng)元以及少突膠質(zhì)細(xì)胞等神經(jīng)細(xì)胞分化,這為神經(jīng)損傷后修復(fù)以及再生提供了有利的證據(jù)。中藥治療腦缺血病變(中風(fēng)及其后遺癥)已有數(shù)千年歷史并且療效確切,從這個(gè)寶貴的資源庫(kù)中挖掘高效的中藥單體化合物或其單體復(fù)方以誘導(dǎo)BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化,對(duì)開發(fā)治療腦缺血藥物并闡明其作用機(jī)理具有重要的臨床和理論意義。我們課題組前期構(gòu)建了一種用于腦缺血藥物篩選的細(xì)胞模型,該細(xì)胞含調(diào)控?zé)晒馑孛富虮磉_(dá)的質(zhì)粒,當(dāng)用藥物刺激該細(xì)胞時(shí),如果熒光素酶表達(dá)上調(diào),則表明該藥物具有促進(jìn)基因表達(dá)的功效,這使得我們可以快速、定量篩選具有促神經(jīng)生長(zhǎng)作用的中藥單體或復(fù)方。本研究首先利用細(xì)胞模型對(duì)6種中藥單體進(jìn)行基因表達(dá)上調(diào)劑的初篩；再利用初篩陽(yáng)性的化合物誘導(dǎo)BMSCs,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和免疫熒光技術(shù)檢測(cè)五種神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)志物的mRNA及蛋白表達(dá)情況,從而判斷陽(yáng)性化合物能將BMSC誘導(dǎo)為何種神經(jīng)細(xì)胞。通過初篩,我們獲得了2種對(duì)基因轉(zhuǎn)錄有激活作用的中藥單體；再用初篩的2種中藥單體化合物在不同時(shí)間段、不同濃度誘導(dǎo)處理大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(rMSCs)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果表明,用同一時(shí)間段不同濃度誘導(dǎo)rMSCs后,五種神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)志物的mRNA表達(dá)具有一定的藥物劑量依賴性；分別用3μM,10μM濃度誘導(dǎo)處理rMSC時(shí),5號(hào),6號(hào)化合物對(duì)上述五種mRNA表達(dá)都有上調(diào),且誘導(dǎo)處理72h后,mRNA表達(dá)量第一次達(dá)到高峰。隨后,在用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)這五種神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)志蛋白的表達(dá)時(shí),發(fā)現(xiàn)rMSCs誘導(dǎo)處理72h后,兩種蛋白有陽(yáng)性表達(dá)。由此可以初步判斷,化合物5和6具有一定的誘導(dǎo)rMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化的潛能。本研究篩選出2種中藥單體化合物能夠誘導(dǎo)rMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化,這為從中藥中大規(guī)模篩選更加高效的治療腦缺血的單體化合物或復(fù)方提供了良好范例,也為進(jìn)一步闡釋這兩種化合物的功效和分子機(jī)理提供了支持。
【學(xué)位授予單位】：西南交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R743

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 吳向坤;慕曉玲;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化機(jī)制及研究現(xiàn)狀[J];農(nóng)墾醫(yī)學(xué);2007年06期

2 李東正;王倩;李俊娜;黎興毅;于娜;黃瑾;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的研究[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2010年05期

3 李恒;李曉紅;;外周血來(lái)源的具有向神經(jīng)細(xì)胞分化能力干細(xì)胞的研究[J];臨床神經(jīng)病學(xué)雜志;2011年04期

4 許屏;王淑蘭;葉耐永;;神經(jīng)細(xì)胞分化的螢光顯微鏡觀察[J];吉林醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1964年01期

5 白瑞櫻;張艷;朱涵;;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)及其向神經(jīng)細(xì)胞分化的研究[J];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2014年02期

6 卓本慧,萬(wàn)東,江和碧,羅勇,李廷玉;體內(nèi)外環(huán)境對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2004年05期

7 趙連旭,張杰,孟玲,曹豐,王冬梅,南雪,李艷華,王韞芳,徐小虎,裴雪濤;腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子基因轉(zhuǎn)導(dǎo)對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2004年24期

8 張運(yùn)克;;從“腎主骨、生髓”的角度探索骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化[J];中醫(yī)藥學(xué)報(bào);2007年04期

9 劉文忠,孫正義,李強(qiáng);兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的研究[J];中國(guó)臨床康復(fù);2004年32期

10 袁傳順;陸超;陳吉慶;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的可塑性研究[J];醫(yī)學(xué)綜述;2007年05期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 井緒東;陳麗;張洹;;誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)膽堿乙�；D(zhuǎn)移酶[A];第11次中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文匯編[C];2007年

2 王國(guó)權(quán);趙忠新;邵福源;;神經(jīng)細(xì)胞分化相關(guān)蛋白質(zhì)組學(xué)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

3 涂悅;程世翔;石鵬程;張賽;;膜電位調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的初步研究[A];2011中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

4 段萍;張英;韓雪飛;許燕;劉俊玲;鄢文海;邢瑩;;啟動(dòng)子區(qū)甲基化調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)張錫鈞基金第十二屆全國(guó)青年優(yōu)秀生理學(xué)學(xué)術(shù)論文交流及評(píng)獎(jiǎng)會(huì)議綜合摘要[C];2013年

5 鄢文海;張英;段萍;韓雪飛;劉素芳;許燕;邢瑩;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化中相關(guān)基因DNA甲基化狀態(tài)的研究[A];中國(guó)神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議暨第五次會(huì)員代表大會(huì)論文摘要集[C];2011年

6 范存剛;張慶俊;韓忠朝;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的研究[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2006年

7 熊明娣;米美玲;楊蓓;盧夏英;鄒挺;張大雷;王晶磊;徐斯凡;;睪丸支持細(xì)胞誘導(dǎo)骨髓干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的研究[A];2008年神經(jīng)內(nèi)分泌暨神經(jīng)免疫內(nèi)分泌學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2008年

8 王屹;楊慧;孫海梅;曾小蓓;趙春禮;魯玲玲;季鳳清;;人臍帶血干細(xì)胞與神經(jīng)細(xì)胞分化[A];中國(guó)神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)第六屆學(xué)術(shù)會(huì)議暨學(xué)會(huì)成立十周年慶祝大會(huì)論文摘要匯編[C];2005年

9 邵明;畢鄭鋼;;體外誘導(dǎo)BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化及蛋白差異表達(dá)的研究[A];第七屆全國(guó)創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會(huì)議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 衣曉峰;電針可促使骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 侯玲玲;間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2002年

2 周芳芳;GSK3β與E2F1相互作用對(duì)神經(jīng)細(xì)胞分化的影響[D];清華大學(xué);2008年

3 方洪波;全反式維甲酸（RA）誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞分化中NeuroD1基因調(diào)控的分子機(jī)制研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

4 王珊;DDAH在調(diào)節(jié)神經(jīng)細(xì)胞分化及介導(dǎo)藥物抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的作用及機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2008年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 施劍明;Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

2 凱迪日耶·玉蘇普;誘導(dǎo)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的中藥單體化合物的篩選及應(yīng)用研究[D];西南交通大學(xué);2016年

3 馬琳琳;視黃酸誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的研究[D];天津科技大學(xué);2010年

4 劉振東;膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2012年

5 張潔瑜;阻斷間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化與腫瘤發(fā)生相關(guān)性研究[D];蘭州大學(xué);2012年

6 周煜博;碲化鎘量子點(diǎn)對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖與向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響[D];吉林大學(xué);2013年

7 謝義雄;腰痛定體外誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的觀察[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2007年

8 劉娟;體外誘導(dǎo)人羊膜細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2012年

9 李宏圖;RNAi誘導(dǎo)小鼠ES細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2006年

10 姜媛媛;RA序貫誘導(dǎo)小鼠胚胎干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化及對(duì)4.1蛋白表達(dá)的影響[D];鄭州大學(xué);2008年

，

本文編號(hào)：1155005