本文關(guān)鍵詞：依達(dá)拉奉對大鼠腦出血后神經(jīng)細(xì)胞凋亡及Caspase-3、PARP-1表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的:通過大鼠斷尾取血注入尾狀核的自體血注入法建立腦出血模型,并給予以依達(dá)拉奉治療,觀察不同劑量的依達(dá)拉奉對大鼠腦出血后神經(jīng)功能評分、腦組織中細(xì)胞凋亡和半胱氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartate-specific proteinase-3,Caspase-3)、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1)]表達(dá)的影響,探討依達(dá)拉奉改善腦出血后繼發(fā)性腦損傷的機(jī)制,進(jìn)一步為依達(dá)拉奉治療腦出血提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:將體重在250g-300g之間的健康成年雄性SD大鼠80只隨機(jī)分成假手術(shù)組(5只)、ICH組(25只)、小劑量治療組以下簡稱小劑量組(25只)和大劑量治療組以下簡稱大劑量組(25只)四組,其中假手術(shù)組大鼠在造模過程中只插針但是不注入自體血,僅設(shè)術(shù)后6h時間點(diǎn);ICH組、小劑量治療組和大劑量治療組每組分別采取術(shù)后6h、24h、2d、3d和5d這5個時間點(diǎn)觀察并處死大鼠,每個時間點(diǎn)5只大鼠;實(shí)驗(yàn)采用大鼠斷尾取血自體血注入右側(cè)尾狀核的方法建立大鼠腦出血模型,小劑量治療組按體重1mg/Kg、大劑量治療組按體重3mg/Kg(均用生理鹽水稀釋至2 ml)術(shù)后立即給予依達(dá)拉奉腹腔注射,每12h注射1次,直到處死前12h,ICH組大鼠在術(shù)后同時間給予腹腔注射同劑量的生理鹽水,假手術(shù)組術(shù)中不注入自體血,術(shù)后立即腹腔注射同劑量生理鹽水;腦出血術(shù)后2h后判斷造模是否成功,觀察模型成功的大鼠并于實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的術(shù)后5個時間點(diǎn)對大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能障礙評分;按時間點(diǎn)處死大鼠后,立即斷頭開顱取腦組織,在腦出血血腫周圍組織中分別測定腦組織含水量(干濕法)、caspase-3及parp-1表達(dá)陽性的細(xì)胞(免疫組織化學(xué)染色)、凋亡細(xì)胞(tunel染色)以及進(jìn)行病理染色(he染色)。結(jié)果:1.大鼠腦出血術(shù)后,ich組大鼠6h后就開始出現(xiàn)不同程度神經(jīng)功能障礙,出血灶周圍腦組織含水量增加,隨時間的延長,兩者均在2-3d達(dá)高峰;凋亡細(xì)胞數(shù)目也增加,在第3d時凋亡細(xì)胞數(shù)目最多;he染色顯示腦出血病灶側(cè)血腫腦組織有出血后病理改變的表現(xiàn),且在3d時病理改變最重。2.腦出血后caspase-3、parp-1的動態(tài)變化:腦出血術(shù)后6h開始caspase-3表達(dá)較假手術(shù)組增多,3d達(dá)高峰,以后逐漸下降,到第5d仍有較高表達(dá),與各時間點(diǎn)與假手術(shù)組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),parp-1的表達(dá)顯示同樣規(guī)律。3.依達(dá)拉奉對上述指標(biāo)的影響:(1)腦出血術(shù)后,兩個治療組大鼠神經(jīng)功能評分較ich組大鼠評分明顯升高,小劑量治療組在24h至5d各個時間點(diǎn)與ich組比較即有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),大劑量治療組在術(shù)后6h至5d各個時間點(diǎn)與ich組比較就有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),大劑量治療組在術(shù)后24h至5d后的各個時間點(diǎn)與小劑量治療組比較評分均升高,都有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);(2)大、小劑量治療組術(shù)后血腫周圍腦組織含水量術(shù)后6h至5d各個時間點(diǎn)與ich組比較有所減輕有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),大劑量治療組在術(shù)后6h至5d各時間點(diǎn)與小劑量治療組比較腦組織含水量降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);(3)he染色:大、小劑量治療組出血周圍腦組織神經(jīng)細(xì)胞壞死、細(xì)胞充血水腫及白細(xì)胞浸潤程度在6h至5d各時間點(diǎn)均較ICH組減輕,大劑量治療組在術(shù)后6h至5d各時間點(diǎn)與小劑量治療組比較腦組織病理改變程度減輕更明顯;(4)腦出血術(shù)后,大、小劑量治療組血腫周圍腦組織中Caspase-3及PARP-1表達(dá)在6h至5d各時間點(diǎn)較ICH組明顯下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),大劑量治療組在術(shù)后6h至5d各時間點(diǎn)與小劑量治療組比較Caspase-3及PARP-1表達(dá)水平降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);(5)大、小劑量治療組血腫周圍腦組織中凋亡細(xì)胞數(shù)在術(shù)后6h至5d各時間點(diǎn)較ICH組明顯下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),大劑量治療組在術(shù)后6h至5d各時間點(diǎn)與小劑量治療組比較凋亡細(xì)胞數(shù)目均降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:1.自體血注入法制作大鼠腦出血模型方法較簡單,成功率較高,更易于操作,與臨床上人體自發(fā)性腦出血的病理變化過程相似,是比較理想的研究腦出血的動物模型。2.腦出血后Caspase-3蛋白表達(dá)增高并促進(jìn)PARP-1蛋白的表達(dá),會加重腦水腫及腦組織病理改變程度,導(dǎo)致神經(jīng)功能障礙加重,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,從而加重出血后繼發(fā)性腦損傷。3.腦出血后立即給予依達(dá)拉奉治療可以抑制Caspase-3及PARP-1的表達(dá),減少出血后神經(jīng)細(xì)胞凋亡,減輕腦水腫和腦組織病理改變程度,提高神經(jīng)功能評分,對繼發(fā)性腦損傷發(fā)揮保護(hù)作用。4.依達(dá)拉奉在治療腦出血中的神經(jīng)保護(hù)作用隨劑量增加而增加,大劑量依達(dá)拉奉作用優(yōu)于小劑量。
【關(guān)鍵詞】：依達(dá)拉奉 腦出血 細(xì)胞凋亡 PARP-1 Caspase-3
【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R743.34
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-12
• 前言12-15
• 材料與方法15-24
• 結(jié)果24-41
• 討論41-51
• 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-58
• 英漢縮略詞對照表58-59
• 致謝59-60
• PARP-1 在腦血管疾病中的作用及機(jī)制（綜述）60-71
• 參考文獻(xiàn)67-71

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳達(dá);劉艷;朱杰;王斯聞;;依達(dá)拉奉對腦出血大鼠神經(jīng)保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2009年04期

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本文編號：1117649