本文關鍵詞：卵巢切除對SOD1G93A轉基因鼠腰段脊髓caspase-12基因表達的影響

  更多相關文章： Caspase-12 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激 凋亡 肌萎縮側索硬化 脊髓 卵巢切除 基因芯片 逆轉錄定量PCR

【摘要】：目的:肌萎縮側索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一慢性進行性神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病,主要累及上、下運動神經(jīng)元,表現(xiàn)為肌無力、肌萎縮和錐體束征。有研究證實在ALS病人和SOD1轉基因鼠的脊髓前角運動神經(jīng)元內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激相關蛋白水平呈現(xiàn)上調(diào)趨勢。另有報道在SOD1轉基因小鼠癥狀前期,與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激相關的促凋亡蛋白和抑凋亡蛋白平衡失常。以上都說明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激與ALS發(fā)病及病程進展有關。Caspase-12為位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)外膜的半胱氨酸蛋白酶家族成員之一。有報道稱caspase-12基因敲除小鼠可對抗內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激誘發(fā)的凋亡,而對其他形式凋亡信號刺激仍有反應。Caspase-12在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激凋亡過程中處于關鍵位置,在死亡受體和線粒體凋亡途徑中不被激活。說明caspase-12參與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激介導的凋亡,與其他類型凋亡進程無關。本實驗室前期研究證實SOD1G93A轉基因鼠卵巢切組比SOD1G93A轉基因鼠非卵巢切組提前發(fā)病,說明雌激素在ALS中發(fā)揮神經(jīng)保護作用(《卵巢切除對家族性肌萎縮側索硬化動物模型的影響》,學位論文,2012,鄭倩)。許多研究顯示雌激素可作用于其相應受體干預內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激。本實驗通過觀察卵巢切除對SOD1G93A轉基因鼠腰段脊髓caspase-12基因表達的影響,探討caspase-12、雌激素在SOD1G93A轉基因鼠發(fā)病進程中可能存在的關系。方法:1動物模型及分組繁殖并飼養(yǎng)家族性肌萎縮側索硬化動物模型即經(jīng)聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)鑒定為SOD1G93A轉基因的雌性小鼠,隨機將10只5周齡攜帶SOD1G93A基因的小鼠分為2個實驗組(n=5只):卵巢切除組(OVX組)、陽性對照組(NO-OVX組)。對照組為同窩、同月齡非SOD1G93A轉基因雌性小鼠(CON組)。2取材用10%水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉后,摘除眼球取血后,迅速斷頭并剝離取出腦和脊髓組織,置于Eppendorf管內(nèi),投于盛有液氮的保溫桶內(nèi),轉移至超低溫冰箱儲存待用(OVX組、NO-OVX組分別于各組發(fā)病期取材,CON組與NO-OVX組同時取材)。3基因表達譜研究利用基因芯片技術對3組小鼠腰段脊髓進行基因表達譜分析。4逆轉錄定量PCR(q RT-PCR)使用q RT-PCR技術檢測不同分組SODIG93A小鼠及陰性對照鼠腰段脊髓內(nèi)caspase-12基因表達情況。5統(tǒng)計學處理采用SPSS 13.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計處理。數(shù)據(jù)的比較采用單因素方差分析,組間行兩兩比較采用LSD檢驗,以a=0.05為顯著性檢驗標準。結果:1基因芯片結果1.1聚類分析結果將OVX組、NO-OVX組、CON組3組樣本得到的差異基因進行聚類分析,聚類分析后得到聚類熱圖,每組樣本均聚集在一起。OVX組與NO-OVX組、CON組比較差異基因表達明顯。1.2基因篩選結果選取SOD1G93A轉基因雌性小鼠OVX組、NO-OVX組、CON組基因表達譜進行對比,取P≤0.05,fold-change值≥+2或≤-2為篩選條件。其中OVX組與NO-OVX組相比共篩選出差異表達基因21個,表達上調(diào)的基因有19個,表達下調(diào)的基因有2個。OVX組與NO-OVX組差異基因列于Table 1。其中caspase-12基因OVX組與NO-OVX組相比fold-change值為2.2458。2 Caspase-12在OVX組、NO-OVX組、CON組的表達。q RT-PCR結果顯示,OVX組腰段脊髓caspase-12基因表達量與NO-OVX組相比升高,差異有統(tǒng)計學意義。NO-OVX組腰段脊髓caspase-12基因表達量與CON組相比差異無統(tǒng)計學意義。結論:1 Caspase-12基因在卵巢切除SOD1G93A轉基因鼠腰段脊髓表達增加。2雌激素可能通過抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激介導的凋亡對SOD1G93A轉基因鼠發(fā)揮神經(jīng)保護作用。
【關鍵詞】：Caspase-12 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激 凋亡 肌萎縮側索硬化 脊髓 卵巢切除 基因芯片 逆轉錄定量PCR
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R744.8
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮寫10-11
• 前言11-12
• 材料與方法12-19
• 結果19-20
• 附圖20-22
• 附表22-23
• 討論23-27
• 結論27-28
• 參考文獻28-32
• 綜述 Caspase家族與中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病32-47
• 參考文獻38-47
• 致謝47-48
• 個人簡歷48

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張順業(yè),孫宗全,劉立新,哈斯朝努;Carvedilol attenuates CPB-induced apoptosis in dog heart: regulation of Fas/FasL and caspase-3 pathway[J];Chinese Medical Journal;2003年05期

2 姚克,王凱軍,徐雯,孫朝暉,申屠形超,邱培瑾;Caspase-3 and its inhibitor Ac-DEVD-CHO in rat lens epithelial cell apoptosis induced by hydrogen in vitro[J];Chinese Medical Journal;2003年07期

3 鄭廣瑛,張成,李志剛;Early activation of caspase-1 after retinal ischemia and reperfusion injury in mice[J];Chinese Medical Journal;2004年05期

4 張曉華,李兆申,屠振興,許國銘,龔燕芳,滿曉華;Therapeutic effect of Caspase-1 inhibitor on liver injury in experimental severe acute pancreatitis[J];Journal of Medical Colleges of PLA;2004年02期

5 高慧;鄒麗;;The Effects of Magnesium Sulfate on Fetal Rats of FGR and the Expression of Caspase-3 in the Placenta of Maternal Rat[J];華中科技大學學報(醫(yī)學英德文版);2005年06期

6 屈軍樂;潘文良;趙伶羚;孫磊;王小平;陳同生;;蟾酥靈誘導細胞內(nèi)caspase-3活化特性熒光分析[J];深圳大學學報(理工版);2008年03期

7 ;Analysis of in vivo patterns of caspase 3 gene expression in primary hepatocellular carcinoma and its relationship to p21~(WAF1) expression and hepatic apoptosis[J];World Journal of Gastroenterology;2000年03期

8 徐人歡 ,劉靜 ,徐豐 ,江舸 ,謝青 ,周霞秋 ,金由辛 ,王德寶;Activity identification of chimeric anti-caspase-3 mRNA hammerhead ribozyme in vitro and in vivo[J];Science in China(Series C:Life Sciences);2001年06期

9 黃偉;Caspase研究進展[J];國外醫(yī)學.輸血及血液學分冊;2001年04期

10 崔銀珠;Caspase抑制劑有望成為一類新藥[J];國外醫(yī)藥(合成藥 生化藥 制劑分冊);2002年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 Qiang Su;Lang Li;Yang-chun Liu;You Zhou;;Effect of metoprolol on myocardial apoptosis and caspase-9 activation after coronary microembolization in rats[A];中華醫(yī)學會第十五次全國心血管病學大會論文匯編[C];2013年

2 韓志君;蔣廷旺;唐裕杰;胡志德;孫懿;周曄;陳燕;谷明莉;鄧安梅;仲人前;;Caspase在原發(fā)性膽汁性肝硬化患者外周血單個核細胞的表達及其臨床意義[A];全國臨床免疫檢驗研討會暨第六屆全國臨床免疫學術會議論文匯編[C];2009年

3 葉月芳;周韌;;漢族人群caspase-10基因中可能存在一個新的微衛(wèi)星位點[A];中華醫(yī)學會病理學分會2005年學術年會論文匯編[C];2005年

4 ;Effect of atorvastatin on myocardial apoptosis and caspase-8 activation following coronary microembolization[A];第十三次全國心血管病學術會議論文集[C];2011年

5 ;The Effect of Theanine on the Expression of Survivin,Bax,Caspase-3 in the Hippocampus and the Ability of Spatial Learning and Memory after Global Cerebral Ischemia /Reperfusion in Rats[A];全國第三次麻醉藥理學術會議論文集[C];2012年

6 Ki Seong Eom;Gil-Saeng Jeong;Tae Young Kim;;Ophiobolin B inhibits proliferation of glioblastoma U87MG cells by inducing S phase arrest and caspase-dependent apoptosis[A];中國抗癌協(xié)會神經(jīng)腫瘤專業(yè)委員會第八屆學術會議論文集[C];2011年

7 鄧常清;唐映紅;李花;陳北陽;陳瑞芬;;補陽還五湯有效部位對局灶性腦缺血再灌注后caspase表達的作用[A];第六次全國中西醫(yī)結合血瘀證及活血化瘀研究學術大會論文匯編[C];2005年

8 鄭世營;葛錦峰;趙軍;蔣東;紀勇;邵峰;;Caspase活化的細胞凋亡在老年非小細胞肺癌組織中的表達[A];第八屆華東六省一市胸心血管外科學術會議論文匯編[C];2005年

9 吳小候;李俊;;Expression of TRAIL and caspase 3 and their significance in rat’s renal ischemia-reperfusion injury[A];第十五屆全國泌尿外科學術會議論文集[C];2008年

10 朱秋華;江煥峰;李佳;劉叔文;;新型Caspase-3抑制劑二氫吡咯衍生物的研究[A];第十屆全國抗炎免疫藥理學學術會議論文集[C];2010年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 一帆;caspase—8缺陷導致免疫紊亂[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張放;阻斷NLRP3炎癥小體中Caspase-1活化治療小鼠急性胃潰瘍的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學;2015年

2 程進;蛋白激酶C在腫瘤再增殖中的作用及作用機制研究[D];上海交通大學;2014年

3 唐楊順;Caspase-1在熱驚厥發(fā)生中的作用及以Caspase-1為靶點的新型小分子抑制劑研究[D];浙江大學;2016年

4 胡瑩;瀉火化瘀通竅法對耳蝸IRI模型大鼠Caspase-9/6及Bax/Bcl-2影響的實驗研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學;2016年

5 楊杰凌;三型分泌系統(tǒng)針狀蛋白和梭菌大毒素激活炎癥小體的分子機制[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

6 賽佳明;慢病毒GV115-Survivin轉染反分化椎間盤髓核細胞的生物學效應以及GV115-Caspase3 siRNA的構建及其生物學效應[D];青島大學;2016年

7 張曉芳;體內(nèi)外研究CXCL1誘導以caspase-3為依賴的微管相關蛋白Tau的剪切[D];昆明醫(yī)科大學;2016年

8 謝金鑫;豬瘟病毒非結構蛋白NS5A切割的機制研究[D];吉林大學;2016年

9 林居強;細胞凋亡過程中caspase蛋白酶激活的光學成像研究[D];華中科技大學;2006年

10 楊銳;硬脂酰酪氨酸對非caspase依賴的細胞損傷的神經(jīng)保護作用及其機制研究[D];上海交通大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 薛子成;樺木酸及其衍生物與Caspase-3分子對接及分子動力學研究[D];哈爾濱理工大學;2014年

2 臧韻;TTF1-NP通過活化內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激的Caspase通路抑制大鼠原發(fā)性肝癌的生長[D];延邊大學;2015年

3 胡麗華;四氯苯醌激活Caspase 8/t-Bid誘導PC12細胞凋亡的信號通路分析[D];西南大學;2015年

4 董娜;Nestin和活化型caspase-3在狼掩性腎炎腎小球中的表達及意義[D];河北醫(yī)科大學;2015年

5 常貫超;klotho蛋白、Caspase12蛋白在糖尿病腎病中的表達及意義[D];河北醫(yī)科大學;2015年

6 徐彥楠;異牛肝菌素誘導人胃癌細胞BGC-823凋亡的機制研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

7 武辰楠;沙利度胺對人真皮成纖維細胞Caspase-3、Bcl-2和BAX mRNA的表達影響[D];河北醫(yī)科大學;2015年

8 陳素艷;不同時間和濃度的常壓氧對大鼠腦缺血半暗帶細胞凋亡的影響[D];鄭州大學;2015年

9 丁麗;甘油對豬冷凍精子細胞調(diào)亡信號通路相關基因表達的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2014年

10 何蓮;冷凍保護劑及抗氧化劑對豬冷凍精子中Caspase介導的細胞調(diào)亡的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2014年

，

本文編號：1115827