本文關鍵詞：PI3K-AKT通路對腦缺血損傷神經干細胞的增殖作用

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【摘要】：目的:利用低氧干預分離的小鼠神經干細胞,通過構建腺病毒載體將腺病毒5-絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶3(Ad5-AKT3)基因和絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶3小干擾RNA(AKT3 si RNA)干擾轉染至缺血神經干細胞,探索磷酸肌醇三磷酸激酶-絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶(PI3K-AKT)通路對缺血性神經干細胞的增殖作用。方法:取新生24h昆明小鼠海馬,分離培養(yǎng)原代神經干細胞,并采用巢蛋白(Nestin)免疫熒光檢測和5-溴脫氧尿嘧啶核苷(Brdu)滲入實驗對其進行鑒定;將所培養(yǎng)的傳代神經干細胞隨機分組:正常組、缺血模型組、低氧組(低氧+缺血模型組)、Lip2000組(低氧+缺血模型組+Lip2000空轉染組)、AKT轉染組(低氧+缺血模型組+Ad5-AKT3轉染組)、AKT干擾組(低氧+缺血模型組+Lip2000+AKT3 si RNA干擾組)。建立腦缺血損傷的體外模型,低氧干預,構建腺病毒Ad5-AKT3載體和AKT3 si RNA后,各組行MTT檢測;RT-q PCR檢測AKT3 m RNA表達情況;Werstern Blot檢測PI3K、AKT3、PCNA。結果:通過免疫熒光檢測Nestin鑒定神經干細胞球,在熒光顯微鏡下觀察到綠色明亮且典型的細胞球,球內可見清晰結構;滲入Brdu免疫熒光檢測可見整個著色細胞球。MTT OD值和RT-q PCR檢測AKT3 m RNA均顯示,與正常組相比,模型組和AKT干擾組下降(P0.05),其余各組均升高(P0.05),其中低氧組和Lip2000組之間無明顯差異(P0.05)。與模型組相比,除AKT干擾組下降外(P0.05),其余各組均升高(P0.05)。Western Blot檢測PI3K、AKT3、PCNA蛋白表達與正常組相比,模型組和AKT干擾組表達量減少(P0.05),低氧組、Lip2000組和AKT轉染組均增加(P0.05),其中AKT轉染組差異最明顯(P0.01)。結論:PI3K-AKT信號通路在低氧干預下有效促進神經干細胞的增殖過程。
【作者單位】： 福建醫(yī)科大學附屬教學醫(yī)院南京軍區(qū)福州總醫(yī)院神經內科;南京軍區(qū)福州總醫(yī)院骨科;
【關鍵詞】： PIK-AKT信號通路 神經干細胞 腺病毒AKT載體 AKT干擾
【基金】：南京軍區(qū)醫(yī)藥衛(wèi)生科研基金(12MA100)
【分類號】：R743
【正文快照】： 神經干細胞是一類存在于中樞神經系統(tǒng)內具有高度增殖、自我更新及分化能力,在一定條件下能不斷進行有絲分裂并分化成神經元、星形膠質細胞及少突膠質細胞的原始母細胞。基于神經干細胞上述良好特性,神經干細胞移植研究取得了重要進展,在缺血缺氧性腦病[1—2]、阿爾茨海默病[3]

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1 戴宜武;神經干細胞發(fā)育過程中分化、遷移調控機制研究現狀[J];中華神經醫(yī)學雜志;2003年02期

2 黃毓;神經干細胞的研究進展[J];廣西醫(yī)科大學學報;2004年02期

3 高小青,袁瓊蘭;神經干細胞的分離及培養(yǎng)方法[J];瀘州醫(yī)學院學報;2004年04期

4 王心;神經干細胞(Neural stem cells)[J];日本醫(yī)學介紹;2005年07期

5 安沂華;程洪斌;張儒有;張贊;李紀仲;;神經干細胞臨床應用和前景展望[J];內科急危重癥雜志;2005年05期

6 陳文提;;神經干細胞在中樞神經系統(tǒng)疾病治療的研究進展[J];福建醫(yī)藥雜志;2007年02期

7 田增民;孫君昭;;神經干細胞應用研究進展[J];中國實用內科雜志;2007年10期

8 韋巖;吳琪;;神經干細胞的研究進展[J];菏澤醫(yī)學�？茖W校學報;2007年03期

9 王煥明;徐如祥;;神經干細胞與顳葉癲沲[J];臨床神經外科雜志;2008年03期

10 薛村水;神經干細胞及臨床應用展望[J];臨床醫(yī)藥實踐;2003年11期

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1 劉佩;劉U，

本文編號：1032011