本文關(guān)鍵詞：Hr突變體轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建和表型分析

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【摘要】：無毛基因(Hr)定位于8p12,在染色體上跨越14 kb,包含19個外顯子。無毛基因的自發(fā)突變能引起人和動物毛發(fā)脫落及相關(guān)毛發(fā)疾病的產(chǎn)生。為深入研究Hr基因的功能,本文利用Gateway技術(shù)構(gòu)建Hr表達載體,在該基因的3 427位引入點突變(G→A),通過顯微注射建立轉(zhuǎn)基因小鼠。采用PCR方法鑒定出陽性的轉(zhuǎn)基因小鼠,確定首建鼠,通過與C57BL/6小鼠回交后互交數(shù)代建系。觀察轉(zhuǎn)基因小鼠毛發(fā)生長發(fā)育規(guī)律。結(jié)果表明,成功構(gòu)建了pRP(Exp)-EF1Am Hairless mutantIRES/EGFP真核表達載體,通過與野生型小鼠雜交獲得陽性子代,進行同窩交配,第2代小鼠出生后14 d開始脫發(fā),30 d左右脫落的毛發(fā)重新長出。取部分皮膚組織做石蠟切片,皮膚組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn),脫毛期無毛小鼠毛囊瓦解,真皮內(nèi)形成大小不等的包囊,毛發(fā)重新生長時,真皮內(nèi)見大量新生的毛囊。蛋白印跡實驗表明,轉(zhuǎn)基因小鼠脫發(fā)時HR蛋白表達量明顯高于同齡陰性小鼠。本文成功建立穩(wěn)定遺傳的Hr突變的轉(zhuǎn)基因小鼠品系,推測無毛基因突變引發(fā)轉(zhuǎn)基因小鼠的脫發(fā),為研究Hr基因的功能提供了良好的動物模型。
【作者單位】： 河南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;鄭州大學(xué)實驗動物中心;
【關(guān)鍵詞】： 無毛基因 轉(zhuǎn)基因小鼠 表型
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.39970119,No.31372270)資助~~
【分類號】：R758.71;R-332
【正文快照】： 毛發(fā)為何生長?為何脫落?這個問題多年來一直困擾著人們[1]。毛發(fā)生長和脫落是一個高度復(fù)雜的過程,受到許多基因的調(diào)控[2]。盡管毛發(fā)基因調(diào)控的研究使人們對毛發(fā)的生長發(fā)育有了更為深刻的認識,但許多分子機制仍不清楚。因此,尋找影響毛發(fā)生長的因子,研究毛發(fā)脫落的原因仍是今后

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本文編號：722362