泌尿生殖道沙眼衣原體(Ct)感染的臨床癥狀輕微，但可引起嚴(yán)重的合并癥，如異位妊娠和不育癥等。因而，敏感、快速的實(shí)驗(yàn)室診斷方法，對于早期診斷和及早治療衣原體感染是至關(guān)重要的。Ct的血清分型方法費(fèi)時、昂貴，現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)為敏感、快速地分型鑒定Ct，研究其基因變異情況提供了有力工具。本論文應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)法、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)和基因克隆等技術(shù)，對泌尿生殖道Ct感染的檢測和基因分型做了一系列研究。 1．為了適用于檢測大量標(biāo)本，建立了微量細(xì)胞培養(yǎng)法。用96孔平底細(xì)胞培養(yǎng)板代替?zhèn)鹘y(tǒng)的玻璃瓶，具有敏感、快速、方便、經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn)。用微量細(xì)胞培養(yǎng)法對南京地區(qū)683例性病門診病人，107例非淋菌性尿道炎患者和176名性罪錯婦女進(jìn)行了Ct的檢測。這三組人群的Ct感染率分別為7.9％、24.3％和21.6％。并對部分衣原體培養(yǎng)陽性病人做了臨床分析。 2．為了簡化PCR操作中的標(biāo)本處理程序，摸索出一種用稀堿溶液快速處理尿道、宮頸拭子標(biāo)本的方法。只需加入低濃度NaOH溶液于標(biāo)本中，離心、加熱兩個步驟，15分鐘處理1份標(biāo)本，獲得了與非離子去污劑和蛋白酶K相似的處理...

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1.FXX/TA質(zhì)粒的圖譜

用PCR擴(kuò)增pSI得到的片段與用EocRI酶切重組質(zhì)粒得到的片11)。將此重組質(zhì)粒pSI用BamHI酶切線性化后，回收純0.22，0D280=0.125，DNA含量為0.55卜gm/1，分子數(shù)約為1.稀釋擴(kuò)增試驗(yàn)結(jié)果為，PCR可檢出5個拷貝的IS(見照片12)

圖4.B組血清型Ahil、Mspl酶切帶型的模式圖

圖5.C組血清型Ahil、Mspl酶切帶型的模式圖

本文編號：3995715