發(fā)布時間：2016-11-05 16:47

  本文關(guān)鍵詞：NRF2、HO-1基因多態(tài)性與白癜風(fēng)罹患危險的關(guān)聯(lián)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《第四軍醫(yī)大學(xué)》 2013年

NRF2、HO-1基因多態(tài)性與白癜風(fēng)罹患危險的關(guān)聯(lián)性研究

宋璞  

【摘要】：白癜風(fēng)是一種在臨床中較為常見的色素障礙性皮膚病，主要累及表皮黑素細胞。近年來的研究表明，氧化應(yīng)激在啟動或參與黑素細胞損傷的過程中起著關(guān)鍵作用。作為機體最大的器官，皮膚暴露于外界環(huán)境中，當(dāng)遭受各種有害刺激時，導(dǎo)致皮膚局部氧自由基等異常蓄積引起氧化應(yīng)激狀態(tài)，具有相關(guān)致病性遺傳背景的個體，黑素細胞抵御氧化刺激的能力下降，過多的氧自由基進而引起黑素細胞DNA損傷，，最終導(dǎo)致黑素細胞壞死或凋亡。進展期白癜風(fēng)患者局部皮損中過氧化氫（H2O2）持續(xù)的異常蓄積被認為是氧化應(yīng)激參與白癜風(fēng)發(fā)病的直接證據(jù)。 核因子E2相關(guān)因子2（NRF2）是調(diào)節(jié)細胞抗氧化的重要轉(zhuǎn)錄因子，其缺失或激活障礙會提高細胞對氧化應(yīng)激的敏感性，導(dǎo)致細胞功能異常甚至死亡。NRF2/ARE信號通路下游抗氧化靶基因血紅素氧合酶1（Heme oxygenases-1, HO-1）是黑素細胞中發(fā)揮主要抗氧化作用的基因，它可通過NRF2通路保護黑素細胞抵抗氧化應(yīng)激損傷。目前，僅Guan等研究發(fā)現(xiàn)NRF2啟動子區(qū)650(C/A)與白癜風(fēng)發(fā)病相關(guān)，尚無NRF2其他多基因位點及HO-1基因多態(tài)性與漢族人白癜風(fēng)相關(guān)性研究。因此我們以中國漢族人群為研究對象，通過大規(guī)模臨床病例-對照研究，檢測分析位于啟動子及內(nèi)含子區(qū)的NRF2rs35652124、NRF2rs6721961、NRF2rs10183914及HO-1rs2071746單核苷酸多態(tài)性與白癜風(fēng)發(fā)病的關(guān)系，并對啟動子區(qū)SNP位點做初步功能學(xué)探討，為白癜風(fēng)的發(fā)病提供理論依據(jù)。 方法 本實驗通過收集1000例白癜風(fēng)患者和1000例健康對照人DNA樣本，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性（PCR-RFLP）技術(shù)分析了2個基因共4個SNP位點的基因型，SAS統(tǒng)計軟件管理和分析白癜風(fēng)患者和正常人群中的分布頻率，及其與疾病的關(guān)聯(lián)性。應(yīng)用ELISA檢測血清中血紅素氧合酶1的活性在不同基因型個體中的差異，并對NRF2基因啟動子區(qū)的多態(tài)性位點進行初步功能學(xué)研究，通過構(gòu)建位于啟動子區(qū)不同等位基因的重組質(zhì)粒，瞬時轉(zhuǎn)染細胞，利用熒光素酶報告系統(tǒng)分析基因單點突變對其轉(zhuǎn)錄活性的影響。 結(jié)果 1.NRF2rs6721961及HO-1rs2071746位點的不同基因型分布頻率在白癜風(fēng)患者和正常人群間無明顯差異，位于內(nèi)含子區(qū)的NRF2rs10183914CT+TT基因型僅表現(xiàn)為可能增加患病風(fēng)險的趨勢（P=0.057，校正OR1.30，95%可信區(qū)間0.99-1.69）； 2.位于啟動子區(qū)的NRF2rs35652124位點TT突變純合子在漢族人群中表現(xiàn)為保護因素（校正OR0.75，95%可信區(qū)間0.58-0.97），相對來說野生型純合子及雜合子CT+CC則會增加白癜風(fēng)的易感性； 3.聯(lián)合基因型對患病風(fēng)險的影響分析的結(jié)果顯示：以作為保護因素的突變基因型為參照，攜帶野生等位基因的聯(lián)合基因型分布頻率在疾病組和對照組間存在差異； 4.將NRF2rs35652124位點基因型與白癜風(fēng)臨床特征的發(fā)病風(fēng)險進行了關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果顯示：發(fā)病年齡大于20歲的人群可能更容易罹患白癜風(fēng)； 5.NRF2rs6721961和NRF2rs35652124位點應(yīng)用SHEsis軟件進行連鎖不平衡檢測，結(jié)果提示兩個多態(tài)性位點存在連鎖不平衡（D'=0.307，P 0.05），可能對白癜風(fēng)的發(fā)病有協(xié)同作用； 6.同正常人群相比，白癜風(fēng)患者血清中HO-1活性明顯下降；但與NRF2rs35652124位點基因多態(tài)性無明顯相關(guān)； 7.NRF2rs35652124位點轉(zhuǎn)染活性在PIG1、293細胞中均有改變， NRF2rs35652124T質(zhì)粒轉(zhuǎn)染活性高于C質(zhì)粒，說明該突變位點增加啟動子區(qū)活性可能為其發(fā)揮保護性作用的機制之一。 結(jié)論 1. NRF2基因與漢族人白癜風(fēng)有顯著相關(guān)性，NRF2rs35652124位點TT突變純合子在漢族人群中患病風(fēng)險降低；NRF2rs6721961、NRF2rs10183914及HO-1rs20717463個多態(tài)性位點對白癜風(fēng)發(fā)病無明顯影響。 2. NRF2rs35652124多態(tài)性位點與白癜風(fēng)發(fā)病有密切關(guān)系，并協(xié)同NRF2rs6721961位點共同影響疾病發(fā)生。 3.血紅素氧合酶單一位點基因變異及其相關(guān)重要通路中的某個基因變異可能影響蛋白表達或催化功能變異，局部皮膚黑素細胞抵抗氧化應(yīng)激的能力下降，機體應(yīng)對氧化損傷能力降低。進一步研究氧化-抗氧化系統(tǒng)中基因變異的分子機制，可為白癜風(fēng)發(fā)病機理的研究和臨床治療提供線索和新方法。 4. NRF2啟動子區(qū)rs35652124位點基因變異可能增加啟動子區(qū)活性，但是否但產(chǎn)生新的蛋白結(jié)合位點，或原有轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合特性改變，尚不能闡明。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R758.41
【目錄】：

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9 閆焱;二氧化碳氣腹對呼吸動力學(xué)的影響及其誘發(fā)肺臟氧化應(yīng)激的研究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2010年

10 劉江波;白癜風(fēng)的遺傳流行病學(xué)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2005年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宋璞;NRF2、HO-1基因多態(tài)性與白癜風(fēng)罹患危險的關(guān)聯(lián)性研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

2 梁曉紅;細胞間黏附分子-1和白介素-10與白癜風(fēng)的相關(guān)性研究[D];南華大學(xué);2010年

3 劉晶;氧化應(yīng)激與白癜風(fēng)的相關(guān)性研究[D];南華大學(xué);2010年

4 郭靜微;850例白癜風(fēng)患者的流行病學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2012年

5 張巧蓮;Nrf2和HO-1在實驗性自身免疫性腦脊髓炎大鼠脊髓中的表達及依達拉奉保護作用的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

6 劉寶珩;白癜風(fēng)黑素刺激素受體1單核苷酸多態(tài)性分析[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

7 屈銘一;內(nèi)皮素-1和降鈣素基因相關(guān)肽與白癜風(fēng)的相關(guān)性研究[D];南華大學(xué);2010年

8 蕭名棋;成人白癜風(fēng)患者心理水平與生活質(zhì)量調(diào)查分析[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

9 鄺福軍;二黃補白湯對白癜風(fēng)（營衛(wèi)失和型）T細胞亞群調(diào)節(jié)作用的臨床研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2011年

10 司鶴南;271例兒童白癜風(fēng)臨床流行病學(xué)分析[D];吉林大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：NRF2、HO-1基因多態(tài)性與白癜風(fēng)罹患危險的關(guān)聯(lián)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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