目的探究酪蛋白激酶2相互作用蛋白1(CKIP-1)表達(dá)在前列腺部尿道少瘢痕愈合中的作用機(jī)制。方法收集小兒尿道瘢痕組織和正常尿道組織。通過酶消化法聯(lián)合組織塊法建立原代的人尿道瘢痕成纖維細(xì)胞。通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染沉默或過表達(dá)CKIP-1。通過qPCR和Western blot檢測mRNA和蛋白的表達(dá)水平。CCK-8法檢測細(xì)胞活力。免疫熒光染色檢測α-SMA的表達(dá)。結(jié)果與正常尿道組織相比,瘢痕組織中CKIP-1水平降低而ROCK升高(P<0.05)。OE-CKIP-1組的CKIP-1mRNA和蛋白水平升高,細(xì)胞活力、α-SMA、COLⅠ、COLⅢ、TGF-β1和ROCK蛋白水平均顯著低于對照組(P<0.05)。siCKIP-1組的CKIP-1mRNA和蛋白水平降低,其他上述指標(biāo)均顯著高于對照組(P<0.05)。結(jié)論 CKIP-1蛋白可能通過下調(diào)TGF-β1抑制ROCK2相關(guān)通路,并抑制COLⅠ、COLⅢ和α-SMA的表達(dá),從而抑制人尿道瘢痕成纖維細(xì)胞纖維化。

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圖2免疫熒光染色檢測各組細(xì)胞中α-SMA的表達(dá)水平

OE-CK-IP-1組的CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1和ROCK蛋白水平顯著低于對照組（P<0.05),siCKIP-1組的CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1和ROCK蛋白水平顯著高于對照組（P<0.05，表3、圖3）。圖3Western....

圖3Westernblot檢測各組CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1和ROCK蛋白水平

圖2免疫熒光染色檢測各組細(xì)胞中α-SMA的表達(dá)水平3討論

圖1免疫組化染色檢測波形蛋白鑒定人尿道瘢痕成纖維細(xì)胞（免疫組化，×400)

免疫組化染色檢測發(fā)現(xiàn)本次研究中建立的人尿道瘢痕成纖維細(xì)胞在波形的蛋白中表達(dá)，并且細(xì)胞呈纖維狀（圖1）。2.3各組細(xì)胞轉(zhuǎn)染結(jié)果比較

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