目的了解沉默大鼠鈣敏感受體(calcium-sensing receptor,CaSR)基因后,腎臟組織緊密連接蛋白14(the tight junction protein claudin 14,CLDN14)的表達情況及24 h尿鈣排泄量變化情況。方法 (1)建立遺傳高鈣尿結石形成(GHS)大鼠模型;(2)CaSR-miRNA干擾病毒分別干擾GHS組大鼠和正常尿鈣對照組大鼠(NC)作為實驗組,生理鹽水干預作為對照組。(3)處死大鼠取雙腎并測24 h尿鈣;(4)RT-PCR和Western Blot技術檢測大鼠腎上皮細胞CLDN14的mRNA和蛋白表達水平。結果 (1)CaSR-miRNA干擾病毒后,與對照組大鼠相比,GHS大鼠組尿鈣排泄量減少,差異有統(tǒng)計學意義(P <0.05);NC組大鼠尿鈣排泄量變化不明顯,差異無統(tǒng)計學意義(P> 0.05)。(2)GHS組大鼠CLDN14 mRNA和蛋白表達量減少,差異有統(tǒng)計學意義(P <0.05);NC組大鼠CLDN14 mRNA和蛋白表達無明顯變化,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結論 (1)干擾病毒體內(nèi)干擾GHS...

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圖3干擾后GHS組與NC組大鼠CLDN14基因的mRNA表達水平圖

慢病毒干擾后，CHS組CLDN14mRNA表達水平下降，較對照組差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；與對照組相比，NC組CLDN14mRNA表達水平較變化不明顯，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）（圖3）。2.4Westernblot檢測CLDN14的蛋白表達

圖4GHS組大鼠鈣CLDN14的蛋白表達檢測結果

GHS組與NC組上CLDN14蛋白質(zhì)表達圖（以β-actin為內(nèi)參，以各條帶control組為校準）見圖4、5。其灰度值統(tǒng)計圖見圖6。圖5NC組大鼠鈣CLDN14的蛋白表達檢測結果

圖5NC組大鼠鈣CLDN14的蛋白表達檢測結果

圖4GHS組大鼠鈣CLDN14的蛋白表達檢測結果圖6干擾后GHS組與NC組大鼠CLDN14蛋白的表達水平變化圖

圖6干擾后GHS組與NC組大鼠CLDN14蛋白的表達水平變化圖

圖5NC組大鼠鈣CLDN14的蛋白表達檢測結果3討論

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