目的:糖尿病腎病(DKD)是糖尿病常見的微血管并發(fā)癥,是終末期腎病最常見的病因之一。中國作為糖尿病大國,目前的患病人數(shù)已經(jīng)超過1億,而糖尿病腎病也成為影響國人生活質量和壽命的重要疾病。臨床上可觀察到糖尿病患者常伴有脂質代謝的異常,糖尿病腎病患者腎臟組織中也檢測到有脂質的沉積,脂類代謝的紊亂可能是導致糖尿病腎病的原因之一。但是高糖對細胞內(nèi)脂質沉積的影響機制目前還不清楚。本研究以人腎小球血管內(nèi)皮細胞(HGVECs)為研究對象,采用RT-qPCR、蛋白質免疫印跡(WB)、基因芯片等技術手段探究高糖對細胞內(nèi)脂質沉積的影響,并明確其具體的機制。方法:1、水溶性膽固醇模擬體內(nèi)高脂環(huán)境HGVECs給予膽固醇(0μg/ml;200μg/ml;400μg/ml;600μg/ml;800μg/ml)干預細胞12h、24h、48h后進行CCK8實驗檢測細胞的活性,篩選出合適的膽固醇干預濃度和干預時間。2、硝酸還原酶法檢測一氧化氮(NO)的含量HGVECs給予膽固醇(0μg/ml;200μg/ml;400μg/ml;600μg/ml;800μg/ml)干預細胞24h后,檢測膽固醇對內(nèi)皮細胞NO合成和分泌的影響...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.正常培養(yǎng)的人腎小球血管內(nèi)皮細胞（10×10）

常培養(yǎng)的人腎小球血管內(nèi)皮細胞（細胞活性的影響外膽固醇干預條件，我們通過CC驗結果顯示，與正常對照組相比，對細胞的活性沒有影響，48h時細24h和48h都導致細胞的活性下選取此干預條件來進行后續(xù)實驗進一步下降。

圖2.不同濃度膽固醇干預不同時間下細胞活性的變化（*：與Control組比較

圖1.正常培養(yǎng)的人腎小球血管內(nèi)皮細胞（10×10）水溶性膽固醇對細胞活性的影響了選取合適的體外膽固醇干預條件，我們通過CCK8實驗檢測不同細胞的活性，實驗結果顯示，與正常對照組相比，200μg/ml的膽固細胞12h和24h對細胞的活性沒有影響，48h時細胞活性....

圖3.不同濃度膽固醇干預下的細胞NO含量

天津醫(yī)科大學碩士學位論文固醇對細胞NO分泌的影響NO是內(nèi)皮細胞的特有功能，接下來我們檢測了膽固醇對于內(nèi)皮細泌的影響。如下圖所示，與空白對照組相比，不同濃度的膽固醇，NO的含量無明顯變化，差異無統(tǒng)計學意義（圖3）。說明膽固細胞，但是對細胞的NO合成和分泌功能并沒有影響....

圖4.不同濃度膽固醇干預下細胞內(nèi)脂質沉積（細胞油紅O染色）

圖4.不同濃度膽固醇干預下細胞內(nèi)脂質沉積（細胞油紅O染色）5.不同濃度膽固醇干預下細胞內(nèi)膽固醇含量（酶法）（*：與NC組比較。

本文編號：3897419