目的:糖尿病腎病(DKD)是糖尿病常見(jiàn)的微血管并發(fā)癥,是終末期腎病最常見(jiàn)的病因之一。中國(guó)作為糖尿病大國(guó),目前的患病人數(shù)已經(jīng)超過(guò)1億,而糖尿病腎病也成為影響國(guó)人生活質(zhì)量和壽命的重要疾病。臨床上可觀察到糖尿病患者常伴有脂質(zhì)代謝的異常,糖尿病腎病患者腎臟組織中也檢測(cè)到有脂質(zhì)的沉積,脂類代謝的紊亂可能是導(dǎo)致糖尿病腎病的原因之一。但是高糖對(duì)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的影響機(jī)制目前還不清楚。本研究以人腎小球血管內(nèi)皮細(xì)胞(HGVECs)為研究對(duì)象,采用RT-qPCR、蛋白質(zhì)免疫印跡(WB)、基因芯片等技術(shù)手段探究高糖對(duì)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的影響,并明確其具體的機(jī)制。方法:1、水溶性膽固醇模擬體內(nèi)高脂環(huán)境HGVECs給予膽固醇(0μg/ml;200μg/ml;400μg/ml;600μg/ml;800μg/ml)干預(yù)細(xì)胞12h、24h、48h后進(jìn)行CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的活性,篩選出合適的膽固醇干預(yù)濃度和干預(yù)時(shí)間。2、硝酸還原酶法檢測(cè)一氧化氮(NO)的含量HGVECs給予膽固醇(0μg/ml;200μg/ml;400μg/ml;600μg/ml;800μg/ml)干預(yù)細(xì)胞24h后,檢測(cè)膽固醇對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞NO合成和分泌的影響...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.正常培養(yǎng)的人腎小球血管內(nèi)皮細(xì)胞（10×10）

常培養(yǎng)的人腎小球血管內(nèi)皮細(xì)胞（細(xì)胞活性的影響外膽固醇干預(yù)條件，我們通過(guò)CC驗(yàn)結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，對(duì)細(xì)胞的活性沒(méi)有影響，48h時(shí)細(xì)24h和48h都導(dǎo)致細(xì)胞的活性下選取此干預(yù)條件來(lái)進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步下降。

圖2.不同濃度膽固醇干預(yù)不同時(shí)間下細(xì)胞活性的變化（*：與Control組比較

圖1.正常培養(yǎng)的人腎小球血管內(nèi)皮細(xì)胞（10×10）水溶性膽固醇對(duì)細(xì)胞活性的影響了選取合適的體外膽固醇干預(yù)條件，我們通過(guò)CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同細(xì)胞的活性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，200μg/ml的膽固細(xì)胞12h和24h對(duì)細(xì)胞的活性沒(méi)有影響，48h時(shí)細(xì)胞活性....

圖3.不同濃度膽固醇干預(yù)下的細(xì)胞NO含量

天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文固醇對(duì)細(xì)胞NO分泌的影響NO是內(nèi)皮細(xì)胞的特有功能，接下來(lái)我們檢測(cè)了膽固醇對(duì)于內(nèi)皮細(xì)泌的影響。如下圖所示，與空白對(duì)照組相比，不同濃度的膽固醇，NO的含量無(wú)明顯變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖3）。說(shuō)明膽固細(xì)胞，但是對(duì)細(xì)胞的NO合成和分泌功能并沒(méi)有影響....

圖4.不同濃度膽固醇干預(yù)下細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積（細(xì)胞油紅O染色）

圖4.不同濃度膽固醇干預(yù)下細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積（細(xì)胞油紅O染色）5.不同濃度膽固醇干預(yù)下細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量（酶法）（*：與NC組比較。

本文編號(hào)：3897419