目的:通過研究一氧化氮合酶(NOS)抑制劑L-NAME對大鼠實驗性隱睪生精細胞凋亡的調(diào)節(jié)及其對磷酸化p38MAPK表達的影響,揭示實驗性隱睪生精細胞凋亡過程中NOS/NO與p38MAPK之間的關(guān)系。方法:雄性SD大鼠建立單側(cè)隱睪模型,隨機分為隱睪組、隱睪+生理鹽水組、隱睪+L-NAME組、假手術(shù)組,術(shù)后第7天處死大鼠。硝酸還原酶法測定睪丸組織NO_x^-含量,化學比色法測定睪丸組織中NOS活性;免疫組化與Western blot檢測磷酸化p38MAPK蛋白表達的變化;TUNEL原位末端標記法結(jié)合流式細胞術(shù)檢測生精細胞凋亡。結(jié)果:各組大鼠左側(cè)睪丸及假手術(shù)組左側(cè)與右側(cè)睪丸之間重量無明顯差異,其余各組右側(cè)隱睪均輕于左側(cè)睪丸;隱睪+L-NAME組隱睪重量明顯大于隱睪組及隱睪+生理鹽水組,其睪丸組織中NO_x^-含量、NOS活性均低于假手術(shù)組和隱睪組;免疫組化顯示磷酸化p38MAPK在假手術(shù)組睪丸生精上皮內(nèi)表達陰性,其他三組表達陽性,且多見于凋亡的生精細胞,隱睪+L-NAME組的陽性表達弱于隱睪組和隱睪+生理鹽水組。...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 隱睪模型的建立與處理
    1.2 主要試劑
    1.3 主要方法
        1.3.1 睪丸組織的NO含量檢測
        1.3.2 睪丸組織NOS活性的測定
        1.3.3 免疫組化SP法檢測p38MAPK蛋白
        1.3.4 Western blot檢測p38MAPK蛋白表達量
        1.3.5 流式細胞術(shù)測定生精細胞DNA含量和細胞凋亡
        1.3.6 TUNEL法檢測生精細胞凋亡
    1.4 統(tǒng)計分析
2 結(jié)果
    2.1 兩側(cè)睪丸大體改變及重量變化
    2.2 各組大鼠右側(cè)睪丸內(nèi)NO和NOS活性的變化
    2.3 磷酸化p38MAPK表達
        2.3.1 免疫組化檢測
        2.3.2 Western blot檢測
    2.4 生精細胞凋亡檢測
        2.4.1 流式細胞術(shù)
        2.4.2 TUNEL原位末端標記法
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