本文關(guān)鍵詞：辛伐他汀及缺血后處理對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：缺血再灌注損傷(ischemia reperfusion injury,IRI)是指組織或器官經(jīng)過一段時(shí)間缺血,當(dāng)恢復(fù)血流再灌注后,其細(xì)胞功能代謝障礙及結(jié)構(gòu)破壞反而較缺血性損傷進(jìn)一步加重的現(xiàn)象。腎缺血再灌注損傷(renal ischemia reperfusion injury,RIRI)是臨床上常見的病理生理現(xiàn)象,是多因素參與的復(fù)雜的病理過程,也是急性腎損傷的主要發(fā)病機(jī)制之一。急性腎缺血再灌注損傷與ATP的減少、大量氧自由基的生成、細(xì)胞內(nèi)鈣超載、炎性介質(zhì)和粘附分子產(chǎn)生過多、一氧化氮(NO)合成減少和內(nèi)皮素(ET)釋放增多等因素有關(guān)。辛伐他汀屬于水溶性他汀類藥物,是一種天然化合物,為無(wú)活性的內(nèi)酯,在肝臟羥化成β-羥酸等活性抑制物而發(fā)揮藥理作用。通過對(duì)HMG-Co A特異性抑制作用,使HMG-Co A不能轉(zhuǎn)變成甲羥戊酸(Mevalonate,MVA),從而阻斷膽固醇的合成,降低血膽固醇的水平。他汀類藥物問世以來,已廣泛應(yīng)用于臨床治療高脂血癥。近年研究發(fā)現(xiàn),他汀類藥物尚具有強(qiáng)大的非降脂作用。這種非降脂作用也被認(rèn)為是他汀類藥物的多效性(Pleiotropic effects),主要包括,提高一氧化氮生物利用度、改善內(nèi)皮功能、抗氧化應(yīng)激、抗炎、抑制細(xì)胞外基質(zhì)聚積、降低血管平滑肌細(xì)胞的遷移和增殖以及免疫調(diào)節(jié)等。缺血后處理(ischemic postconditioning,IPO)是指對(duì)缺血組織或者器官實(shí)施供血重建之前進(jìn)行反復(fù)多次短暫的缺血/再灌注,可以有效減輕供血重建后的缺血再灌注損傷。近年來,國(guó)內(nèi)外對(duì)肝、腦、心臟以及肢體缺血后處理進(jìn)行了較多的研究,各種研究結(jié)果均表明缺血后處理對(duì)IRI具有保護(hù)作用。腎臟對(duì)缺血缺氧較敏感,易發(fā)生IRI,但有關(guān)IPO對(duì)腎臟IRI的保護(hù)作用及作用機(jī)制,目前少有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)旨在應(yīng)用生理、生化及免疫組織化學(xué)等方法觀察辛伐他汀及缺血后處理對(duì)RIRI的作用,并探討其可能的作用機(jī)制。目的:觀察辛伐他汀及缺血后處理對(duì)RIRI的保護(hù)作用,并探討其可能的作用機(jī)制。方法:采用夾閉雙側(cè)腎動(dòng)、靜脈45分鐘后松夾再灌的方法制作RIRI模型,觀察辛伐他汀及缺血后處理對(duì)大鼠RIRI損傷的影響。成年健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只,體重180~220g,在18-22℃實(shí)驗(yàn)室安靜飼養(yǎng)兩日后,將大鼠隨機(jī)分為5組,分別為:①假手術(shù)組(Sham)、②溶劑對(duì)照組(Sham+V)、③缺血再灌注組(I/R)、④辛伐他汀組(Sim)、⑤缺血后處理組(IPO)。動(dòng)物分組后,Sim組每日給予辛伐他汀20mg/kg灌胃,1次/d,Sham組每日給予等容量生理鹽水灌胃,持續(xù)2周。2周后復(fù)制RIRI動(dòng)物模型。大鼠術(shù)前禁食12h。1%戊巴比妥鈉腹腔麻醉后固定于操作臺(tái),腹正中切口打開腹腔,游離雙側(cè)腎動(dòng)、靜脈。I/R和Sim組均用無(wú)創(chuàng)動(dòng)脈夾夾閉雙側(cè)腎動(dòng)、靜脈45分鐘,然后去除動(dòng)脈夾,觀察雙側(cè)腎臟顏色由暗紫紅色變?yōu)轷r紅色,表明再灌注成功,逐層縫合腹膜,腹壁肌肉和皮膚。IPO組用無(wú)創(chuàng)動(dòng)脈夾夾閉雙側(cè)腎動(dòng)、靜脈45分鐘去除動(dòng)脈夾,后行6個(gè)循環(huán)夾閉10s/再灌10s后處理。Sham和Sham+V組只開腹不夾閉腎動(dòng)、靜脈,其余操作同上。各組動(dòng)物再灌注24h后取腹主動(dòng)脈血,測(cè)定血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)。取血后迅速摘取雙側(cè)腎臟,測(cè)定腎組織丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)的含量。酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)檢測(cè)腎組織內(nèi)皮型一氧化氮合酶(e NOS)的含量。免疫組化法測(cè)定腎組織Bcl-2、Bax及HO-1的表達(dá)。腎組織病理形態(tài)學(xué)觀察腎損傷程度。結(jié)果:1 Sham組和Sham+V組大鼠腎小管未見明顯異常。I/R組腎小管明顯受損,以近曲小管為重,表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)胞混濁腫脹,管腔明顯擴(kuò)張,管內(nèi)可見管型和脫落細(xì)胞,間質(zhì)增寬水腫,大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),管周血管明顯擴(kuò)張淤血;上皮細(xì)胞核染色質(zhì)邊集,胞漿空泡樣變性、壞死。與I/R組相比,Sim和IPO組腎組織損傷明顯減輕,表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)胞輕度水腫,空泡變性,可見少量管型,間質(zhì)充血水腫減輕,有少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),管周稍有淤血,胞核基本正常。2 I/R組大鼠腎功能明顯受損,BUN、Scr含量均明顯高于Sham組和Sham+V組(P0.01)。與I/R組相比,Sim和IPO組BUN和Scr含量均明顯降低(P0.01)。3 RI/RI后,I/R組SOD活性較Sham組和Sham+V組顯著降低(P0.05),MDA含量顯著升高(P0.05);與I/R組相比,Sim和IPO組SOD活性明顯增加(P0.05),MDA含量則明顯降低(P0.05)。4 RI/RI后,I/R組NO及e NOS含量均明顯低于Sham組和Sham+V組(P0.05);與I/R組相比,Sim和IPO組NO及e NOS含量均明顯增加(P0.05)。5 Sham組和Sham+V組Bcl-2與Bax蛋白無(wú)明顯表達(dá),I/R組Bax蛋白表達(dá)明顯增多,而Bcl-2蛋白表達(dá)較少;與I/R組相比,Sim和IPO組Bax蛋白表達(dá)減少,而Bcl-2蛋白表達(dá)增加。6 Sham組和Sham+V組腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)HO-1表達(dá)不明顯,I/R組腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)HO-1表達(dá)較Sham組和Sham+V組增多;與I/R組相比,Sim和IPO組腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)HO-1表達(dá)均明顯增加。結(jié)論:1腎缺血-再灌注使大鼠腎功能和結(jié)構(gòu)受損,表現(xiàn)為Scr和BUN升高,腎小管上皮細(xì)胞混濁腫脹、壞死,MDA含量增加,SOD活力降低,NO和e NOS含量均明顯降低,Bcl-2蛋白表達(dá)減少,Bax蛋白表達(dá)增加。2 SIM和IPO能顯著降低RIRI大鼠Scr和BUN水平,減輕大鼠腎組織損傷,改善腎功能,同時(shí)顯著降低MDA含量,提高腎組織SOD活力,并可明顯增加e NOS和NO含量,提示SIM和IPO減輕大鼠RI/RI的作用機(jī)制可能與清除氧自由基,抑制脂質(zhì)過氧化,提高腎組織的抗氧化能力有關(guān)。3 SIM和IPO使RIRI大鼠腎組織Bax蛋白表達(dá)減少,Bcl-2蛋白表達(dá)增加,提示SIM和IPO減輕大鼠RI/RI的作用機(jī)制可能與上調(diào)Bcl-2表達(dá)、下調(diào)Bax表達(dá),抑制腎組織細(xì)胞凋亡有關(guān)。4 SIM和IPO使RIRI大鼠腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)HO-1表達(dá)明顯增加,提示SIM和IPO減輕大鼠RI/RI的作用機(jī)制可能通過抗炎、抗氧化、抗凋亡等途徑參與了對(duì)RI/RI大鼠腎臟的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：腎臟 缺血再灌注損傷 辛伐他汀 缺血后處理 內(nèi)皮型一氧化氮合酶 一氧化氮 細(xì)胞凋亡 HO-1
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R692
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-12
• 英文縮寫12-13
• 前言13-14
• 材料與方法14-18
• 結(jié)果18-20
• 附圖20-26
• 附表26-28
• 討論28-31
• 結(jié)論31
• 參考文獻(xiàn)31-34
• 綜述34-46
• 參考文獻(xiàn)41-46
• 致謝46-47
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷47

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 陳運(yùn)中;紅曲活性成分的結(jié)構(gòu)與功能評(píng)價(jià)[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

2 王利華;甲羥戊酸對(duì)人系膜細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2007年

3 譚俊;基于多尺度創(chuàng)新原理的工業(yè)微生物高通量篩選平臺(tái)構(gòu)建及應(yīng)用研究[D];華東理工大學(xué);2013年

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本文編號(hào)：366698