TRAMP-C2凍融抗原聯(lián)合PEP-3多肽致敏樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)CTL對TRAMP-C2作用的研究
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【摘要】:目的:研究TRAMP-C2腫瘤凍融抗原聯(lián)合PEP-3多肽致敏樹突狀細(xì)胞(DCs)體外誘導(dǎo)前列腺癌特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)對前列腺癌細(xì)胞TRAMP-C2的殺傷效應(yīng)。方法:聯(lián)合應(yīng)用rhGM-CSF和rhIL-4體外培養(yǎng)誘導(dǎo)骨髓來源單核細(xì)胞獲得樹突狀細(xì)胞,負(fù)載TRAMP-C2腫瘤細(xì)胞凍融抗原和/或PEP-3多肽后發(fā)育為成熟樹突狀細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)檢測其細(xì)胞表型的變化。與同種異體脾T淋巴細(xì)胞共同孵育24h后刺激成為CTLs,將其與TRAMP-C2細(xì)胞共培養(yǎng),通過流式細(xì)胞術(shù)、CCK8實驗、軟瓊脂克隆實驗、Transwell小室遷移實驗以及劃痕實驗檢測其對前列腺癌細(xì)胞TRAMP-C2的殺傷效應(yīng)。ELISA法檢測DCs和CTL上清液中IFN-y, TNF-p,以及IL-12含量。結(jié)果:與未致敏樹突狀細(xì)胞相比,致敏樹突狀細(xì)胞高表達(dá)與其成熟相關(guān)的MHC-Ⅱ分子、細(xì)胞粘附分子和共刺激分子(CD11c, CD40, CD80, CD86)。凍融抗原聯(lián)合PEP-3多肽致敏DCs誘導(dǎo)的CTL對TRAMP-C2細(xì)胞凋亡、侵襲和遷移能力的影響明顯高于其他組,細(xì)胞凋亡率明顯增加,侵襲和遷移能力明顯減弱。凍融抗原聯(lián)合PEP-3致敏的DCs與T淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)后,IFN-γ、TNF-β和IL-12的分泌量顯著高于其它組。結(jié)論:TRAMP-C2腫瘤細(xì)胞凍融抗原聯(lián)合PEP-3多肽致敏的樹突狀細(xì)胞體外誘導(dǎo)產(chǎn)生的CTL對TRAMP-C2細(xì)胞具有明顯殺傷效應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】:樹突狀細(xì)胞 前列腺癌 細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞 免疫治療
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R737.25
【目錄】:
- 英漢縮略語名詞對照5-7
- 中文摘要7-9
- 英文摘要9-11
- 前言11-14
- 第一部分 樹突狀細(xì)胞疫苗的制備14-25
- 1 實驗材料14-18
- 2 實驗方法18-20
- 3 實驗結(jié)果20-23
- 4 討論23-25
- 第二部分 樹突狀細(xì)胞疫苗誘導(dǎo)CTLs殺傷TRAMP-C2細(xì)胞25-39
- 1 實驗材料25-26
- 2 實驗方法26-32
- 3 實驗結(jié)果32-37
- 4 討論37-39
- 全文總結(jié)39-40
- 參考文獻(xiàn)40-43
- 文獻(xiàn)綜述43-51
- 參考文獻(xiàn)48-51
- 致謝51-52
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文52
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本文編號:325077
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