本文關鍵詞：西格列汀對高糖誘導的大鼠腎小管上皮細胞JNK信號通路的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:1.探究二肽基肽酶IV(DDP-IV)抑制劑西格列汀對高糖誘導的大鼠腎小管上皮細胞凋亡是否有保護作用。2.檢測MAPK信號通路蛋白JNK的濃度變化,探究二肽基肽酶IV(DDP-IV)抑制劑西格列汀發(fā)揮作用的機制。方法:體外完全培養(yǎng)基培養(yǎng)大鼠腎小管上皮細胞,待細胞生長鋪滿培養(yǎng)皿70%-80%時換用無胎牛血清培養(yǎng)基,生長24小時使細胞生長同步化,之后進行分組如下:⑴正常對照組:低糖(5.5mmol/L)環(huán)境下培養(yǎng);⑵高糖組:高糖(25mmol/L)環(huán)境下培養(yǎng);⑶西格列汀干預組:預先加入西格列汀處理1小時后轉(zhuǎn)移至高糖培養(yǎng)基下培養(yǎng);⑷JNK信號通路阻斷劑組:預先加入JNK信號通路的特異性阻斷劑SP600125處理1小時后將大鼠腎小管上皮細胞轉(zhuǎn)移至高糖培養(yǎng)基下培養(yǎng)。之后采用流式細胞術檢測實驗各組細胞的凋亡程度,RT-PCR技術檢測實驗各組細胞的JNK基因表達的水平,Western Blot方法測定實驗各組細胞內(nèi)磷酸化的JNK蛋白的表達變化。結果:1.流式細胞術示:與對照組相比,高糖組細胞凋亡明顯增多;與高糖組相比,西格列汀干預組和阻斷劑組細胞凋亡明顯減少,差異有統(tǒng)計學意義((P0.05)。2.RT-PCR結果示:與正常組相比,高糖組磷酸化的JNK顯著增高;與高糖組相比,西格列汀組、阻斷劑組磷酸化的JNK均顯著減少,差異有統(tǒng)計學意義((P0.05)。3.Western Blot結果示:與正常組相比,高糖組磷酸化的JNK表達明顯增多;與高糖組相比,西格列汀組、阻斷劑組磷酸化的JNK表達明顯減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:西格列汀可以減輕高糖誘導的腎小管上皮細胞的凋亡,其機制可能是通過抑制JNK信號通路的表達來發(fā)揮作用。
【關鍵詞】：西格列汀 JNK信號通路 腎小管上皮細胞 MAPK信號通路
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R587.2;R692.9
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 常用英文縮寫詞表9-10
• 前言10-12
• 1 材料與方法12-23
• 1.1 材料、試劑與儀器設備12-16
• 1.1.1 細胞株12
• 1.1.2 主要試劑12-13
• 1.1.3 主要儀器13-14
• 1.1.4 試劑配置14-16
• 1.2 指標檢測及實驗方法16-22
• 1.2.1 腎小管上皮細胞的培養(yǎng)16-17
• 1.2.2 流式細胞術測細胞凋亡17
• 1.2.3 Real time-PCR檢測c-jun的表達水平17-21
• 1.2.4 Western blot檢測磷酸化JNK21-22
• 1.3 統(tǒng)計學方法22-23
• 2 結果23-27
• 2.1 各組腎小管細胞流式細胞術凋亡的結果23-24
• 2.2 實驗各組腎小管上皮細胞pJNK的RealTime-PCR的結果24-25
• 2.3 實驗各組腎小管上皮細胞Western blot檢測pJNK的結果25-27
• 3 討論27-30
• 4 結論30-31
• 參考文獻31-34
• 綜述34-41
• 參考文獻38-41
• 在研期間參與課題及成果41-42
• 致謝42-43
• 個人簡歷43

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本文編號：311598