本文關(guān)鍵詞：泌尿生殖道感染沙眼衣原體多態(tài)膜蛋白F基因的多態(tài)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:泌尿生殖道沙眼衣原體的感染是世界范圍內(nèi)最常見的性傳播疾病之一,其感染率已經(jīng)超過淋病奈瑟菌,而躍居性傳播疾病之首,在我國也有逐年上漲的趨勢。與篩查或抗生素治療相比,疫苗接種更經(jīng)濟,并對全球控制沙眼衣原體感染有更大的影響,因此普遍認(rèn)為疫苗接種是降低沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis,C.t)感染率的最好辦法。目前,雖有大量關(guān)于衣原體的疫苗研究,但至今尚無成熟疫苗問世。目前亞單位疫苗及DNA疫苗的研究焦點是找到合適的抗原,現(xiàn)在研究比較多的抗原有主要外膜蛋白(Major Outer Membrane Protein,MOMP),衣原體蛋白酶樣活性因子(Chlamydial Protease-Like Activity Factor,CPAF)等,但這些疫苗均未達(dá)到理想的免疫效果。多態(tài)膜蛋白(Polymorphic Membrane Proteins,Pmp)是近年來發(fā)現(xiàn)的位于衣原體外膜上的一類蛋白,分子量比較大,而且具有型特異性,保守性好。同時研究發(fā)現(xiàn),Pmp蛋白可能在C.t感染后粘附宿主細(xì)胞和機體免疫應(yīng)答中具有重要功能,為研制疫苗的潛在抗原。因此本研究的目的是探討泌尿生殖道感染患者沙眼衣原體多態(tài)膜蛋白F(polymorphic Membrane Proteins F,Pmp F)基因的多態(tài)性,為研究多態(tài)膜蛋白F作為沙眼衣原體候選疫苗提供理論依據(jù)。方法:收集2013年1月~2014年12月某院泌尿科、婦科和皮膚科門診泌尿生殖道感染患者送檢的分泌物標(biāo)本,并對患者的性別、年齡、標(biāo)本來源進行詳細(xì)登記。先用沙眼衣原體核酸診斷試劑盒進行初篩,將獲得的沙眼衣原體陽性標(biāo)本采用巢氏PCR擴增Pmp F基因,然后將擴增得到的Pmp F基因用Alu I、Hae III、Rsa I、Mob I四種內(nèi)切酶進行酶切,酶切圖譜采用Gelcompar II(version 3.5)圖像分析軟件進行數(shù)據(jù)處理,用Dice相似性系數(shù)和平均連鎖聚類法進行聚類,得到UPGMA樹狀圖確定Pmp F基因多態(tài)性。根據(jù)Pmp F-RFLP聚樹結(jié)果,選擇代表菌株測定其基因序列進行系統(tǒng)發(fā)育分析,進一步驗證Pmp F-RFLP聚樹結(jié)果,同時測定代表菌株的Omp I序列并與參考菌株的序列比較,從而確定代表菌株的血清型。通過X2檢驗探討沙眼衣原體Pmp F基因型與患者性別、年齡和科室的關(guān)系。結(jié)果:1 2013年1月至2014年12月從婦科、泌尿科和皮膚科三個科室獲得陽性標(biāo)本178株。178株陽性標(biāo)本中來自男性105個,占比為59%,來自女性73個,占比為41%;所有標(biāo)本中來自婦科58個,占比為32.6%,來自泌尿科88個,占比為49.4%,來自皮膚科32個,占比為18%;陽性標(biāo)本患者年齡分布為20歲以下8人,占比為4.5%,20~30歲之間為91人,占比為51.5%,30~40歲之間為59人,占比為33.1%,40~50歲之間的為19人,占比為10.1%,50~60歲之間的只有1人,占比為0.6%。2通過巢氏PCR,178個陽性標(biāo)本中有117個標(biāo)本擴增獲得Pmp F基因,根據(jù)4種內(nèi)切酶酶切圖譜可以分為3個Type型,依次為Type1、Type2、Type3。3個Type型中,Type1有3株,占比為2.6%,Type2有43株,占比為36.8%,Type3有71株,占比為60.7%,Type3型占比最多,為本研究中優(yōu)勢菌株。選取了上述3個Type型中的26株作為代表菌株,對其Pmp F基因進行了序列測定并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,聚群結(jié)果與酶切聚樹結(jié)果一致。3 26株代表菌株Omp I序列測定,結(jié)果顯示分別屬于D、Da、E、F、G、H、J七種血清型。4 X2檢驗結(jié)果表明:年齡與Pmp F基因Type型具有相關(guān)性,性別、科室分布與Pmp F基因Type型沒有相關(guān)性。從年齡與Pmp F基因Type型關(guān)系看,20歲以下患者中,Type2型最多,達(dá)到75%;20~30歲患者中,Type3型最多,占比為53.3%;30~40歲患者中,Type3型最多,占比高達(dá)82.9%;40~50歲患者中,Type3型也最多,占比為57.1%。結(jié)論:1從婦科、泌尿科和皮膚科三個科室泌尿生殖道感染患者標(biāo)本中分離得到178株沙眼衣原體陽性標(biāo)本,感染主要發(fā)生在20~50歲之間,其中感染率最高的年齡段為20~30歲。2感染的沙眼衣原體血清型為D、Da、E、F、G、H和J七種血清型,與已有報道結(jié)果一致。3 Alu I、Hae III、Rsa I、Mob I四種內(nèi)切酶聚樹將117株沙眼衣原體分為3個Type型,Type3占比為60.7%,為本研究中優(yōu)勢Type型�；跍y序的系統(tǒng)發(fā)育樹也證實了以上的分型結(jié)果。4 Pmp F基因Type型與性別、科室分布無關(guān),而與年齡具有相關(guān)性,20歲以下患者中,Type2型最多,20歲以上患者中,Type3型為優(yōu)勢型。
【關(guān)鍵詞】：沙眼衣原體 多態(tài)膜蛋白F 多態(tài)性 疫苗 年齡 性別 科室
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R446.5;R691.3
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 前言11-13
• 材料與方法13-18
• 結(jié)果18-21
• 附圖21-26
• 附表26-27
• 討論27-29
• 結(jié)論29-30
• 參考文獻30-32
• 綜述 沙眼衣原體多態(tài)膜蛋白的研究進展32-44
• 參考文獻41-44
• 致謝44-45
• 個人簡歷45

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李燕;劉原君;齊蔓莉;盛彩虹;劉全忠;;沙眼衣原體泌尿生殖道感染患者血清Pmp蛋白抗體的檢測[J];中華皮膚科雜志;2010年07期

  本文關(guān)鍵詞：泌尿生殖道感染沙眼衣原體多態(tài)膜蛋白F基因的多態(tài)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：294460