本文關(guān)鍵詞：犬超數(shù)排卵及手術(shù)法取卵的研究

  更多相關(guān)文章： 犬 超數(shù)排卵 手術(shù)法取卵 成熟卵母細(xì)胞 舒泰50

【摘要】：本實(shí)驗(yàn)的主要內(nèi)容分為犬的超數(shù)排卵技術(shù)、通過(guò)外科手術(shù)法獲得成熟卵母細(xì)胞以及實(shí)驗(yàn)室鏡檢排卵情況三部分。犬的超數(shù)排卵技術(shù)是在外源性激素PMSG與hCG的聯(lián)合應(yīng)用下進(jìn)行的,選用5只健康未發(fā)情母犬,體重約為5kg,實(shí)驗(yàn)第1天即給母犬注射PMSG,1-8天連續(xù)每天肌肉注射200 IU PMSG,隔3天即第11天肌肉注射2 000 IU hCG,隔10天即在第21天通過(guò)手術(shù)法進(jìn)行取卵。手術(shù)法取卵是以經(jīng)超數(shù)排卵后的母犬為基礎(chǔ),采用舒泰50進(jìn)行麻醉,于臍后沿腹正中線做切口,切開(kāi)皮膚和皮下組織,暴露腹腔,找到子宮、卵巢以及輸卵管一并摘除,摘除后一并放入保溫瓶中帶回實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室鏡檢排卵情況是先以生理鹽水清洗子宮、卵巢以及輸卵管,剪掉多余組織,從宮管結(jié)合部用1mL的針頭注入沖卵液(10mL沖卵液反復(fù)沖洗),另一端用平皿接收流出的液體,完成卵母細(xì)胞的收集。使用透明質(zhì)酸酶機(jī)械地剝離卵丘細(xì)胞從而獲得裸卵,排出第一級(jí)體的細(xì)胞即為成熟卵母細(xì)胞。染色后可以更直觀清晰的看見(jiàn)卵母細(xì)胞中的極體。實(shí)驗(yàn)成功獲得成熟卵母細(xì)胞,卵母細(xì)胞的平均成熟率為85.11%(40/47)。本實(shí)驗(yàn)旨在非發(fā)情季節(jié)1月份通過(guò)注射PMSG與hCG對(duì)母犬進(jìn)行超數(shù)排卵,進(jìn)而手術(shù)法取卵從而獲得成熟卵母細(xì)胞。
【關(guān)鍵詞】：犬 超數(shù)排卵 手術(shù)法取卵 成熟卵母細(xì)胞 舒泰50
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：S858.292
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-11
• 前言11-20
• 1 犬業(yè)發(fā)展及需求11-12
• 2 同期發(fā)情技術(shù)12-14
• 2.1 同期發(fā)情原理及意義12-13
• 2.2 同期發(fā)情研究進(jìn)展13-14
• 3 超數(shù)排卵技術(shù)14-17
• 3.1 超數(shù)排卵原理及意義14
• 3.2 超數(shù)排卵技術(shù)研究進(jìn)展14-15
• 3.3 超數(shù)排卵常用激素15-17
• 3.3.1 孕馬血清促性腺激素(PMSG)15-16
• 3.3.2 促卵泡素(FSH)16
• 3.3.3 促黃體素(LH)16
• 3.3.4 人絨毛膜促性腺激素(hCG)16-17
• 4 犬超數(shù)排卵17-18
• 5 取卵方法18-19
• 5.1 手術(shù)法取卵18-19
• 5.2 非手術(shù)法取卵19
• 6 研究目的及意義19-20
• PMSG與hCG聯(lián)合應(yīng)用對(duì)犬進(jìn)行超數(shù)排卵20-21
• 1 材料20
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物20
• 1.2 實(shí)驗(yàn)藥品20
• 2 方法20-21
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組20
• 2.2 生殖激素及注射劑量20
• 2.3 觀察注射期間犬的變化20-21
• 外科手術(shù)法獲得犬成熟卵母細(xì)胞21-22
• 1 材料21
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物21
• 1.2 實(shí)驗(yàn)器材及藥品21
• 2 方法21-22
• 2.1 麻醉與消毒21
• 2.2 術(shù)式21
• 2.3 術(shù)后護(hù)理21-22
• 犬卵母細(xì)胞的采集及觀察22-25
• 1 材料22
• 1.1 上實(shí)驗(yàn)摘除的子宮、卵巢以及輸卵管22
• 1.2 主要試劑22
• 1.3 主要儀器22
• 2 主要溶液的配制22-23
• 2.1 生理鹽水的配制22
• 2.2 TALP液的配制22-23
• 2.3 基礎(chǔ)培養(yǎng)液NCSU-37的配制23
• 2.4 透明質(zhì)酸酶的配制23
• 2.5 高滲液的配制23
• 3 卵母細(xì)胞的采集23
• 4 卵母細(xì)胞Hoechst 33258染色23-24
• 5 觀察卵母細(xì)胞形態(tài)24
• 6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)24-25
• 結(jié)果25-30
• 1 母犬發(fā)情情況25-26
• 2 手術(shù)法取卵26
• 3 卵細(xì)胞成熟情況26-30
• 討論30-33
• 1 影響超數(shù)排卵的因素30-32
• 1.1 激素的選擇、劑量以及給藥方式30-31
• 1.2 進(jìn)行超數(shù)排卵的時(shí)間31
• 1.3 營(yíng)養(yǎng)31
• 1.4 沖卵方式31-32
• 2 卵母細(xì)胞的死亡32
• 3 麻醉藥物的選擇32
• 4 手術(shù)注意事項(xiàng)32-33
• 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 致謝38-39
• 作者簡(jiǎn)介39

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：689130