本文關(guān)鍵詞：EPO后處理抗大鼠腎臟缺血再灌注損傷作用及機(jī)制研究

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【摘要】：目的通過(guò)建立大鼠缺血再灌注(ischemia-reperfusion,IR)、促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin,EPO)后處理和缺血后處理(ischemia postconditioning,IPO)模型,觀察:1、EPO后處理在大鼠腎臟IRI中的保護(hù)作用;2、EPO后處理對(duì)大鼠腎組織中缺氧誘導(dǎo)因子-1a(hypoxia inducible factor-1,HIF-1a)和熱休克蛋白-70(heat shock protein-70,HSP-70)表達(dá)的影響;3、EPO后處理與IPO在大鼠腎臟IRI中作用的差別。方法健康雄性SD(Sprague-dawly)大鼠共48只,隨機(jī)分成4組,每組12只,分別為:(1)假手術(shù)組(S組):麻醉后以腹正中線為切口,逐層開(kāi)腹,將部分腸管移出體外,游離兩側(cè)腎臟,分離并結(jié)扎右側(cè)腎蒂,分離左側(cè)腎蒂,暴露傷口45min后縫合;(2)缺血再灌注組(IR組):開(kāi)腹后,結(jié)扎右側(cè)腎蒂,分離左側(cè)腎蒂并用動(dòng)脈夾鉗夾,45min后恢復(fù)血供;(3)EPO后處理組(EPO組):前期處理同IR組,再灌前5min給予靜脈注射EPO 3000u/kg,5min后恢復(fù)血供;(4)缺血后處理組(IPO組):前期處理同IR組,缺血后5min用動(dòng)脈夾給予反復(fù)10s供血-10s缺血處理,共6次,3min后恢復(fù)血供。造模成功后,以上各組分別隨機(jī)選取6只大鼠,于再灌后3h采取血清標(biāo)本,于6h處死同時(shí)留取血清和腎組織標(biāo)本;各組其余6只大鼠于再灌后12h采取血清標(biāo)本,于24h處死同時(shí)留取血清和腎組織標(biāo)本。測(cè)定各組大鼠血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serum creatinine values,SCr)、血清超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,S OD)、血清丙二醛(Malondialdehyde,MDA);將各組腎臟標(biāo)本進(jìn)行HE染色,觀察其病理學(xué)改變;采用免疫組織化學(xué)法觀察各組大鼠腎組織HIF-1a、HSP-70的表達(dá)情況并進(jìn)行圖像軟件分析。結(jié)果1、各組大鼠BUN和SCr結(jié)果:與S組比較,缺血再灌注各組BUN和SCr水平均明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。缺血再灌注各組組內(nèi)BUN和SCr水平隨時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與IR組相比較,IPO組與EPO組BUN和SCr總體水平均降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與EPO組相比較,IPO組總體BUN和SCr水平無(wú)明顯差異(P0.05)。2、各組大鼠SOD和MDA結(jié)果:與S組比較,缺血再灌注各組大鼠SOD水平均明顯降低,MDA水平均明顯升高,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與IR組比較,IPO組與EPO組SOD總體水平升高,MDA總體水平降低,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與EPO組相比較,IPO組總體SOD和MDA水平無(wú)明顯差異(P0.05)。3、各組大鼠腎組織HE染色結(jié)果:S組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)均未見(jiàn)明顯異常。與S組相比較,IR組可見(jiàn)腎小管上皮細(xì)胞水腫、部分壞死,明顯管型形成,間質(zhì)充血、水腫、大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)。與IR組相比較,IPO組腎小管上皮輕度水腫,有少量細(xì)胞壞死,管型及炎癥細(xì)胞少見(jiàn),間質(zhì)輕度充血,病理改變減輕。與IPO組相比較,EPO組腎組織病理變化無(wú)明顯差異。各組組內(nèi)比較,24h腎組織病理?yè)p傷重于6h。4、各組大鼠腎組織HIF-1a表達(dá)結(jié)果:S組幾乎未見(jiàn)HIF-1a表達(dá)。以S組為對(duì)照,缺血再灌注各組腎小管上皮細(xì)胞中均可見(jiàn)HIF-1a表達(dá),差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。IR組在6h可見(jiàn)HIF-1a表達(dá),24h HIF-1a表達(dá)高于6h,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與IR組相比較,EPO組在6h、24h HIF-1a表達(dá)均增加,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與EPO組相比較,IPO組在6h、24h HIF-1a表達(dá)無(wú)明顯差別(P0.05)。5、各組大鼠腎組織HSP-70表達(dá)結(jié)果:S組幾乎未見(jiàn)HSP-70表達(dá)。以S組為對(duì)照,缺血再灌注各組腎小管上皮細(xì)胞中均可見(jiàn)HSP-70表達(dá),差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。EPO組6h可見(jiàn)HSP-70表達(dá)呈強(qiáng)陽(yáng)性,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),24h表達(dá)與6h相比無(wú)明顯差別。與EPO相比較,IR組HSP-70表達(dá)在6h呈弱陽(yáng)性,在24h呈陽(yáng)性,總體表達(dá)弱于EPO組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與EPO組相比較,IPO組HSP-70在6h和24h的表達(dá)均無(wú)明顯差別(P0.05)。結(jié)論1、EPO后處理對(duì)大鼠腎臟IRI可產(chǎn)生保護(hù)作用。2、EPO可能通過(guò)誘導(dǎo)HIF-1?和HSP-70表達(dá)增加對(duì)腎臟IRI產(chǎn)生保護(hù)作用。3、EPO后處理與IPO對(duì)腎臟IRI保護(hù)程度基本相同。
【關(guān)鍵詞】：腎臟 缺血再灌注損傷 后處理 促紅細(xì)胞生成素 HIF-1? HSP-70
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R692
【目錄】：

• 摘要4-6
• abstract6-10
• 英文縮略表10-11
• 引言11-13
• 第1章 實(shí)驗(yàn)研究13-41
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料13-14
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 1.1.2 主要設(shè)備13
• 1.1.3 主要試劑13-14
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法14-19
• 1.2.1 動(dòng)物模型的制作14-15
• 1.2.2 標(biāo)本留取15
• 1.2.3 BUN及SCr檢測(cè)方法15-16
• 1.2.4 SOD及MDA檢測(cè)方法16-17
• 1.2.5 HE染色檢測(cè)腎臟病理學(xué)改變17
• 1.2.6 免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腎臟組織中HIF-1α的表達(dá)17-18
• 1.2.7 免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腎臟組織中HSP-70的表達(dá)18-19
• 1.2.8 統(tǒng)計(jì)分析19
• 1.3 結(jié)果19-32
• 1.3.1 各組大鼠血清尿素氮及肌酐的變化19-21
• 1.3.2 各組大鼠血清SOD及MDA的變化21-23
• 1.3.3 各組大鼠腎組織病理切片HE染色結(jié)果23-26
• 1.3.4 各組大鼠腎組織免疫組化結(jié)果26-32
• 1.4 討論32-37
• 1.4.1 腎臟缺血再灌注損傷造模方法32-33
• 1.4.2 腎臟缺血再灌注損傷的保護(hù)方法33-34
• 1.4.3 EPO在器官缺血再灌注損傷中的作用34-35
• 1.4.4 HIF-1α與腎臟缺血再灌注損傷35-36
• 1.4.5 HSP-70與腎臟缺血再灌注損傷36-37
• 1.5 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-41
• 第2章 綜述 EPO與腎臟缺血再灌注損傷的防治41-60
• 2.1 促紅細(xì)胞生成素的概念41-42
• 2.2 促紅細(xì)胞生成素對(duì)器官組織的保護(hù)作用42-47
• 2.2.1 EPO對(duì)腎臟的保護(hù)作用42-44
• 2.2.2 EPO對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的保護(hù)作用44-45
• 2.2.3 EPO對(duì)心臟的保護(hù)作用45-46
• 2.2.4 EPO對(duì)肺等其他器官的保護(hù)作用46-47
• 2.3 腎臟缺血再灌注損傷的防治47-52
• 2.3.1 自由基(free radical, FR)與腎臟缺血再灌注損傷47-48
• 2.3.2 腎臟缺血再灌注損傷的防治48-52
• 參考文獻(xiàn)52-60
• 結(jié)論60-61
• 致謝61-62
• 導(dǎo)師簡(jiǎn)介62-63
• 作者簡(jiǎn)介63-64
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集64

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本文編號(hào)：606523