本文關鍵詞：阿托伐他汀對哮喘小鼠氣道炎癥的影響及免疫調節(jié)作用的機制研究

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【摘要】：目的:采用卵清蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型,觀察阿托伐他汀對哮喘小鼠Th1、Th2、Th17相關細胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17表達的影響,探討阿托伐他汀對哮喘小鼠氣道炎癥的影響及其免疫調節(jié)作用的機制,為臨床應用阿托伐他汀治療支氣管哮喘提供理論依據(jù)。方法:將清潔級BABL/c小鼠24只隨機分成3組:正常對照組(NS組)、哮喘模型組(OVA組)、阿托伐他汀干預組(AT組),每組8只。OVA組、AT組:第0、7、14天分別腹腔+皮下注射0.2m L致敏液(含OVA 50μg、Al(OH)3 2mg)致敏;NS組用0.2m L生理鹽水代替。第21天起,OVA組、AT組給予OVA 50μL(含OVA20μg)滴鼻激發(fā),NS組給予50μL生理鹽水代替激發(fā),每天1次,連續(xù)7天。AT組于每次激發(fā)前30分鐘給予阿托伐他汀10mg/kg腹腔注射,NS組及OVA組以等量生理鹽水腹腔注射。各組小鼠于末次激發(fā)24小時后,戊巴比妥50mg/kg麻醉,摘除眼球放血,頸椎脫臼處死。收集肺泡灌洗液(BALF)行細胞總數(shù)、細胞分類計數(shù);肺組織石蠟切片、蘇木精-伊紅(HE)染色,觀察支氣管肺組織的病理改變;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定BALF中γ-干擾素(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-17(IL-17)的濃度;免疫組化檢測肺組織中IL-17、維甲酸相關孤核受體(RORγt)的表達,以平均光密度值(OD值)表示各組指標的相對表達量。結果:(1)小鼠的行為學表現(xiàn):OVA組小鼠滴鼻激發(fā)后數(shù)十秒出現(xiàn)口唇發(fā)紺、前肢搔鼻、呼吸急促、點頭呼吸、腹式呼吸明顯,甚者出現(xiàn)大小便失禁等表現(xiàn);AT組小鼠激發(fā)后也出現(xiàn)口唇發(fā)紺、前肢撓鼻、呼吸急促、腹式呼吸等表現(xiàn),但3天后激發(fā)上述癥狀較OVA組小鼠減輕;NS組小鼠表現(xiàn)無明顯異常。(2)肺組織病理學表現(xiàn):OVA組小鼠氣道及伴行血管周圍大量炎癥細胞浸潤,支氣管管腔變窄,管腔內可見黏液栓,氣道上皮脫落,黏膜皺壁減少等改變;AT組小鼠也可見炎癥細胞浸潤,上皮脫落,黏液栓形成,支氣管管腔變窄,但程度較OVA組減輕;NS組無上述改變。(3)BALF細胞計數(shù):與NS組細胞總數(shù)(7.1±0.4)、嗜酸性粒細胞(0.0±0.0)、中性粒細胞(1.4±0.08)、淋巴細胞(0.3±0.02)比較,OVA組小鼠細胞總數(shù)(24.3±2.1)、嗜酸性粒細胞(7.9±0.6)、中性粒細胞(2.8±0.2)、淋巴細胞(0.9±0.04)均明顯升高,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);與OVA組比較,AT組細胞總數(shù)(13.6±1.5)、嗜酸性粒細胞(2.5±0.12)、中性粒細胞(1.9±0.09)、淋巴細胞(0.7±0.05)均降低(P0.05),但仍高于NS組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(4)BALF中IL-4、IFN-γ、IL-17的濃度(pg/m L)及IFN-γ/IL-4比值:OVA組IL-4、IL-17的濃度(157.45±9.01、195.68±20.68)較NS組(37.58±1.62、29.76±3.54)明顯升高,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05),而IFN-γ水平(248.47±21.62)較NS組(256.00±17.71)有所降低,但差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),OVA組IFN-γ/IL-4比值(1.57±0.10)較NS組(6.81±0.56)明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);經(jīng)阿托伐他汀干預后,AT組BALF中IL-4、IL-17的濃度(72.82±6.98、111.378±8.75)較OVA組下降,但仍高于NS組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);IFN-γ水平(213.23±10.37)較OVA組降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而IFN-γ/IL-4(2.93±0.19)較OVA組升高,但仍低于NS組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(5)免疫組化檢測肺組織中IL-17、RORγt的表達:IL-17、RORγt主要表達在氣道周圍、肺組織及肺間質中的淋巴細胞胞漿和細胞核內,OVA組IL-17、RORγt的OD值(0.258±0.035、0.523±0.060)均高于NS組(0.032±0.004、0.096±0.010)及AT組(0.115±0.019、0.300±0.033),差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05),與NS比較,AT組IL-17、RORγt的OD值仍升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(6)相關性分析:BALF中IL-17水平與嗜酸性粒細胞數(shù)(r=0.922,P0.05)、中性粒細胞數(shù)(r=0.708,P0.05)均呈正相關;肺組織免疫組化中IL-17與RORγt的表達量亦呈正相關(r=0.818,P0.05)。結論:(1)采用OVA腹腔加皮下注射致敏及OVA滴鼻激發(fā)能復制哮喘小鼠模型;(2)哮喘小鼠存在Th1/Th2失衡及Th2、Th17功能亢進;(3)阿托伐他汀具有抑制哮喘小鼠氣道炎癥的作用;(4)阿托伐他汀可通過糾正Th1/Th2失衡、抑制RORγt表達進而抑制Th17分泌IL-17而發(fā)揮免疫調節(jié)作用,可能是其抗炎機制之一。
【關鍵詞】：支氣管哮喘 氣道炎癥 阿托伐他汀 免疫調節(jié)
【學位授予單位】：四川醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 中文摘要3-6
• 英文摘要6-9
• 前言9-12
• 材料與方法12-19
• 結果19-26
• 討論26-33
• 結論33-34
• 參考文獻34-39
• 英漢縮略詞對照表39-40
• 致謝40-41
• 綜述 他汀類藥物治療支氣管哮喘的研究進展41-52
• 參考文獻47-52

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 趙靈芝;盧美萍;;哮喘兒童支氣管肺泡灌洗液IL-17、IL-8和VEGF水平測定及意義[J];中國病理生理雜志;2011年03期

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本文編號：606511