本文關(guān)鍵詞：雌激素及其代謝產(chǎn)物對(duì)去勢(shì)低氧肺動(dòng)脈高壓大鼠AlkB和HIF-1α表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:肺動(dòng)脈高壓(pulmonary hypertension,PH)是一類致病因素、發(fā)病機(jī)制、病理變化、臨床表現(xiàn)、可逆性及治療方法均不完全相同的疾病,以血管增殖、重塑、原位血栓形成、肺血管進(jìn)行性閉塞,肺血管阻力(pulmonary vascular resistance,PVR)進(jìn)行性增加為特征,肺動(dòng)脈壓力進(jìn)行性升高,常常導(dǎo)致右心衰竭甚至死亡。其中缺氧性肺動(dòng)脈高壓(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)的形成主要與早期的低氧性肺血管收縮(hypooxygen pulmonary vasculation,HPV)和后期的肺血管重建(pulmonary vascular reconstruction,PVR)有關(guān)。在缺氧條件下,低氧誘導(dǎo)因子(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)可以激活下游靶基因,繼而調(diào)節(jié)相關(guān)細(xì)胞因子、生長(zhǎng)介質(zhì)的表達(dá)以及蛋白質(zhì)合成,在血管反應(yīng)性、血管重建、血管生成以及細(xì)胞增殖等過程中發(fā)揮著重要作用。體內(nèi)產(chǎn)生的天然雌激素有3種,即17β-雌二醇(E2)、雌酮及雌三醇,其中17β-雌二醇的生物活性及其與靶組織雌激素受體結(jié)合的效能最強(qiáng),被認(rèn)為是起主要生理作用的雌激素。近年來,雌激素對(duì)肺血管起保護(hù)作用的相關(guān)研究日益增多,不僅可以減輕內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的功能損傷,還可以舒張血管、改善肺血管重構(gòu),但其具體機(jī)制尚未完全明了。本實(shí)驗(yàn)建立去勢(shì)大鼠低氧性肺動(dòng)脈高壓模型,探討17β-雌二醇(E2)及2甲氧基雌二醇(2ME)對(duì)低氧性肺動(dòng)脈高壓大鼠模型中烷烴單加氧酶(Alk B)和HIF-1α的影響。方法:1建立模型:選6-7周左右雌性SD大鼠60只,先行去勢(shì)手術(shù)并適應(yīng)性飼養(yǎng)一周。去勢(shì)手術(shù)步驟如下:大鼠麻醉后,取仰臥位,常規(guī)備皮消毒鋪巾后打開腹腔,先沿輸卵管找到雙側(cè)卵巢,結(jié)扎其下方輸卵管及營(yíng)養(yǎng)血管后予以切除,逐層縫合筋膜、皮膚,局部予以慶大霉素預(yù)防感染。之后采用隨機(jī)數(shù)字法將大鼠隨機(jī)分為6組:常氧組、常氧+E2干預(yù)組、常氧+2ME干預(yù)組、低氧組、低氧+E2干預(yù)組、低氧+2ME干預(yù)組。低氧組、低氧+E2干預(yù)組、低氧+2ME干預(yù)組大鼠放入低氧箱中飼養(yǎng),調(diào)整低氧箱參數(shù),保持艙內(nèi)氧濃度為10.0±0.5%,并放置鈉石灰和無水Ca Cl2以吸收CO2和H2O,將CO2濃度控制在0.5%以內(nèi),每天24小時(shí)持續(xù)低氧,共8周。常氧組、常氧+E2干預(yù)組、常氧+2ME干預(yù)組大鼠,除吸入空氣外,其它飼養(yǎng)條件與低氧組一致。常氧+2ME干預(yù)組、低氧+2ME干預(yù)組從造模開始,每天予以2甲氧基雌二醇240μg/kg皮下注射。常氧+E2干預(yù)組、低氧+E2干預(yù)組予以17-β雌二醇20μg/kg皮下注射。常氧組、低氧組則每天予以等量的生理鹽水皮下注射。2觀察大鼠一般狀況變化,造模8周后稱重,以右心導(dǎo)管測(cè)量法測(cè)出大鼠肺動(dòng)脈壓力值,繼而算出平均肺動(dòng)脈壓(mean pulmonary artery pressure,m PAP),以稱量法測(cè)出左右心室及室間隔重量,通過公式算出右室肥厚指數(shù)(right ventricule hypertrophy index,RVHI),以HE染色對(duì)肺小動(dòng)脈重塑(hypoxic pulmonary artery remodeling,HPSR)觀察。3應(yīng)用RT-PCR測(cè)定肺組織中Alk B和HIF-1 m RNA水平。4應(yīng)用Western blot測(cè)定肺組織中Alk B和HIF-1蛋白水平。結(jié)果:1大鼠的一般狀況低氧條件下飼養(yǎng)的大鼠逐漸出現(xiàn)進(jìn)食減少、體重下降、體毛晦暗易脫落、呼吸頻率加快、活動(dòng)度下降,最終以靜臥為主,低氧8周過程中未出現(xiàn)死亡。與常氧條件下飼養(yǎng)的大鼠比較,低氧條件下的大鼠體重增長(zhǎng)緩慢,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。2大鼠血流動(dòng)力學(xué)改變(m PAP)與常氧條件下大鼠比較,低氧條件下的三組大鼠m PAP明顯升高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),符合肺動(dòng)脈高壓的壓力水平;其中低氧組大鼠的m PAP較低氧情況下的其他2組,即低氧+2ME組、低氧去+E2組明顯升高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);而這2組大鼠m PAP無明顯差別,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。3大鼠肺小血管及右心室形態(tài)學(xué)變化光鏡下,常氧條件下的三組大鼠肺動(dòng)脈管壁結(jié)構(gòu)正常,內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)均一扁平,細(xì)胞分布均勻連續(xù),無細(xì)胞水腫或壞死;而低氧條件下的三組大鼠肺動(dòng)脈管壁增厚,管腔狹窄,細(xì)小動(dòng)脈中膜內(nèi)平滑肌細(xì)胞(SMC)增殖明顯,中膜(PAMT)肥厚;低氧+E2組及低氧+2ME組肺動(dòng)脈管壁結(jié)構(gòu)介于正常組及低氧組之間;(見Fig.1)。各組右心肥厚指數(shù)即RV/(LV+SP)比值的變化趨勢(shì)同m PAP變化。4大鼠肺組織中HIF-1m RNA及Alk Bm RNA表達(dá)水平的變化應(yīng)用RT-PCR測(cè)定HIF-1αm RNA表達(dá)水平在低氧組顯著高于常氧組(P0.05),低氧+E2干預(yù)組、低氧+2ME干預(yù)組亦升高(均P0.05),升高幅度不及低氧組,常氧+E2干預(yù)組、常氧+2ME干預(yù)組無明顯變化(均P0.05)。Alk Bm RNA表達(dá)水平在低氧組顯著低于常氧組(P0.05),低氧+E2干預(yù)組、低氧+2ME干預(yù)組亦降低(均P0.05),降低幅度不及低氧組,常氧+E2干預(yù)組、常氧+2ME干預(yù)組無明顯變化(均P0.05)。5大鼠肺組織中HIF-1及Alk B蛋白水平的變化應(yīng)用Western blot測(cè)定HIF-1α蛋白表達(dá)水平在低氧組顯著高于常氧組(P0.05),低氧+E2干預(yù)組、低氧+2ME干預(yù)組亦升高(均P0.05),升高幅度不及低氧組,常氧+E2干預(yù)組、常氧+2ME干預(yù)組無明顯變化(均P0.05)。Alk B蛋白表達(dá)水平在低氧組顯著低于常氧組(P0.05),低氧+E2干預(yù)組、低氧+2ME干預(yù)組亦降低(均P0.05),降低幅度不及低氧組,常氧+E2干預(yù)組、常氧+2ME干預(yù)組無明顯變化(均P0.05)。結(jié)論:1肺組織內(nèi)HIF-1及Alk B的差異性表達(dá)可能在大鼠低氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用。2在低氧條件下,ALKB可能通過其表觀遺傳學(xué)特性的改變進(jìn)而影響HIF-1的活性。3 E2和2ME可能通過上調(diào)低氧性肺動(dòng)脈高壓大鼠肺組織Alk B的表達(dá),降低HIF-1α表達(dá),進(jìn)而緩解肺動(dòng)脈高壓。
【關(guān)鍵詞】：肺動(dòng)脈高壓 缺氧 17β-雌二醇 2甲氧基雌二醇 低氧誘導(dǎo)因子 大鼠
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R544.1
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12
• 材料與方法12-19
• 結(jié)果19-21
• 附圖21-23
• 附表23-25
• 討論25-28
• 結(jié)論28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 綜述性激素與肺動(dòng)脈高壓31-45
• 參考文獻(xiàn)39-45
• 致謝45-46
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷46

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 郝靜;王秀梅;于學(xué)軍;張昕;蔡毅然;李盛梅;;乳腺癌乏氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)與雌激素受體表達(dá)的關(guān)系[J];中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2006年05期

2 鄧華君;袁雅冬;;烷烴單加氧酶和低氧誘導(dǎo)因子1α在大鼠低氧性肺動(dòng)脈高壓模型肺組織中的表達(dá)及其意義[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2013年40期

  本文關(guān)鍵詞：雌激素及其代謝產(chǎn)物對(duì)去勢(shì)低氧肺動(dòng)脈高壓大鼠AlkB和HIF-1α表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：391250