糜酶對肝星狀細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)分化的影響
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【摘要】:目的觀察糜酶(chymase)對肝星狀細(xì)胞(HSC)增殖及轉(zhuǎn)分化的影響,探討糜酶在肝纖維化中的作用。方法用percoll密度梯度離心法分離、培養(yǎng)大鼠HSC,經(jīng)系列濃度糜酶的作用后,分別進行如下實驗:用噻唑比色法(MTT)檢測HSC的增殖;Western blot檢測細(xì)胞內(nèi)效應(yīng)蛋白α-SMA及TGF-β1的表達;用RT-PCR法檢測TGF-β1及Ⅰ型膠原(Col-Ⅰ)m RNA的表達。結(jié)果肥大細(xì)胞(MC)糜酶(1、10、100 ng/ml)明顯促進HSC增殖,在觀察的范圍內(nèi)(1~100 ng/ml)呈質(zhì)量濃度依賴性,糜酶質(zhì)量濃度越高,刺激培養(yǎng)的肝星狀細(xì)胞增殖的能力越強,最高達對照組(無糜酶刺激)的1.45倍(P0.05);Western blot檢測結(jié)果顯示:糜酶刺激HSC表達α-SMA及TGF-β1明顯增強(各實驗組與空白對照組比較,P0.05);RT-PCR法檢測HSC上TGF-β1及Col-Ⅰm RNA的表達明顯增強,此作用呈劑量依賴性(各實驗組與空白對照組比較,P0.05)。結(jié)論肥大細(xì)胞糜酶刺激可明顯激活HSC,并促進其增殖及轉(zhuǎn)分化為肌成纖維細(xì)胞。
【作者單位】: 延邊大學(xué)附屬醫(yī)院感染癥科;
【關(guān)鍵詞】: 肝星狀細(xì)胞 糜酶 α-SMA TGF-β 膠原
【基金】:國家自然科學(xué)基金(30960372)
【分類號】:R575.2
【正文快照】: 肝纖維化是指肝臟纖維結(jié)締組織的過度沉積,是細(xì)胞外基質(zhì)合成和降解不平衡的結(jié)果。而肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cell,HSC)活化增殖是肝纖維化發(fā)生的中心環(huán)節(jié)[1]。HSC是肌成纖維細(xì)胞的主要來源。當(dāng)肝臟損傷時靜止?fàn)顟B(tài)的HSC轉(zhuǎn)變?yōu)橛性鲋、收縮、遷移、促進炎癥和纖維生成活性
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