高血脂家兔丁酰膽堿酯酶和血脂的相關(guān)性研究
發(fā)布時(shí)間:2017-05-14 19:08
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【摘要】:丁酰膽堿酯酶(BuChE)是在人血清中大量存在的一種絲氨酸水解酶,它是否影響血脂代謝至今沒(méi)有一致的結(jié)論。本文采用高血脂家兔模型,BuChE特異性抑制劑左旋鹽酸班布特羅(R-BMB)和降血脂藥阿托伐他汀鈣(ALF)探究了BuChE和血脂的相關(guān)性。主要內(nèi)容如下:1、高血脂家兔BuChE與血脂相關(guān)性研究(1)動(dòng)物分組、取樣及測(cè)定:正常組(6只)和高脂組(24只)。高脂組又隨機(jī)分為模型組、R-BMB 2mg組、R-BMB 10mg組和ALF 2mg組,經(jīng)高膽固醇飲食誘導(dǎo)(誘導(dǎo)過(guò)程采集血樣)成功后各組每天分別灌胃生理鹽水、R-BMB 2mg/kg,R-BMB 10 mg/kg和ALF 2 mg/kg。灌胃4周后采血、麻醉處死、采集組織樣品。采用Ellman法測(cè)定血漿BuChE活性。測(cè)定血脂指標(biāo)TC、TG、LDL-C、HDL-C。(2)血脂及BuChE活性變化:與正常組相比,模型組血漿TC、LDL-C、HDL-C隨喂養(yǎng)時(shí)間顯著升高,8周時(shí)達(dá)到最高,分別上升到0周時(shí)的21.09倍、32.03倍、7.88倍。0到10周,BuChE活性無(wú)顯著變化,14周BuChE顯著升高到0周時(shí)的1.22倍(P0.05)。給藥4周后與模型組比:R-BMB 2mg組TC下降到給藥前的68%(P0.01),BuChE下降到給藥前的45%(P0.01);R-BMB 10mg組TC下降到給藥前的77%(P0.01),TG下降到給藥前的55%(P0.01),LDL-C下降到給藥前的63%(P0.01),BuChE下降到給藥前的24%(P0.01);ALF 2mg組TC下降到給藥前的84%(P0.01),TG下降到給藥前的65%(P0.05),BuChE下降到給藥前的71%(P0.01)。(3)相關(guān)性分析:高膽固醇飲食顯著升高血脂TC、LDL-C、HDL-C(P0.01),BuChE活性無(wú)顯著變化(P0.05);R-BMB顯著抑制BuChE活性,血脂水平也有顯著變化,其中高劑量(10 mg/kg的給藥劑量)的R-BMB使TC、TG、LDL-C顯著下降(P0.01);ALF顯著降低血脂TC(P0.01)、TG(P0.05),BuChE活性顯著降低(P0.01)。由此判斷,升高血脂不是引起B(yǎng)uChE活性變化的原因,而抑制BuChE活性可能是引起血脂降低的原因,但具體機(jī)制需進(jìn)一步研究。2、將肝臟、腦、心臟組織研磨提取BuChE,測(cè)定游離及與膜結(jié)合的BuChE活性。結(jié)果顯示,模型組肝臟游離的BuChE活性比正常組高41%(P0.05)。3、采用CHO細(xì)胞和畢赤酵母細(xì)胞進(jìn)行BuChE蛋白的表達(dá)。畢赤酵母表達(dá)產(chǎn)物中未檢測(cè)到BuChE,CHO懸浮細(xì)胞表達(dá)BuCh E的產(chǎn)率約為30μg/L。
【關(guān)鍵詞】:丁酰膽堿酯酶 高血脂 兔 相關(guān)性
【學(xué)位授予單位】:華南理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:R589.2
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,本文編號(hào):366001
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