發(fā)布時(shí)間：2017-05-14 13:16

  本文關(guān)鍵詞：益氣溫陽通脈方對大鼠前部缺血性視神經(jīng)病變模型干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：通過觀察益氣溫陽通脈方不同劑量對大鼠AION模型F-VEP的影響以及對大鼠視盤、視神經(jīng)組織病理學(xué)的改變,探討益氣溫陽通脈方對大鼠AION模型視神經(jīng)的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。方法：選用健康雄性SD大鼠60只,隨機(jī)分為5組,空白組、模型組、中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組,每組各12只。除空白組外,其余4組從大鼠尾靜脈注入RB2.5mmol/(ml·kg)后,立即用波長532nm、功率75mW、光斑直徑500μm的綠光照射大鼠實(shí)驗(yàn)眼視盤中上2/3區(qū)域18秒。造模后1天通過眼底彩照及FFA檢查,觀察大鼠視盤及其周圍變化；通過F-VEP檢查,記錄P2波潛伏期(ms)及振幅(μ v),從而判斷造模是否成功。造模成功后,模型組給予蒸餾水2ml灌胃,每日1次；中藥高、中、低劑量組分別給予臨床劑量(mg/kg)的20倍、10倍、5倍制成的不同濃度的中藥水煎濃縮劑2ml灌胃,每日1次；空白組正常飼養(yǎng),各組均干預(yù)21天。干預(yù)第21天通過F-VEP檢查,觀察各組大鼠P2波潛伏期(ms)及振幅(μv)的變化；F-VEP檢查完畢后,將各組大鼠麻醉取出眼球做石蠟切片,分別通過HE染色觀察大鼠視盤及視神經(jīng)組織的病理學(xué)改變、免疫組化染色觀察大鼠視神經(jīng)軸突中SMI312的表達(dá),TUNEL檢測大鼠視神經(jīng)組織中的細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果：1.眼底彩照檢查：正常大鼠視盤及盤周血管未見明顯異常；造模后1天,大鼠眼底彩照可見視盤上半水腫,邊界不清。2.FFA檢查：正常大鼠視盤及其周圍血管未見熒光滲漏；造模后1天,造影早期可見大鼠視盤上方低熒光,中、晚期高熒光,說明造模成功。3. F-VEP:干預(yù)前空白組與其余四組大鼠P2潛伏期、振幅比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；且干預(yù)前除空白組外,其余四組之間P2潛伏期、振幅比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。干預(yù)21天空白組、中藥高劑量組P2潛伏期及振幅與模型組比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),中藥中劑量組、中藥低劑量組P2潛伏期及振幅與模型組比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。干預(yù)21天空白組、模型組、中藥中劑量組及中藥低劑量組P2潛伏期、振幅與各組干預(yù)前比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),中藥高劑量組干預(yù)21天P2潛伏期、振幅與其干預(yù)前比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。4.HE染色：干預(yù)21天,空白組HE染色可見視盤及盤周組織結(jié)構(gòu)完整,視神經(jīng)組織中細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,排列整齊,視神經(jīng)纖維呈線性走行,染色均勻；模型組HE染色可見視盤及其周圍組織結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重,盤周網(wǎng)膜移位,視神經(jīng)組織內(nèi)細(xì)胞增生顯著、排列十分紊亂,視神經(jīng)纖維萎縮；中藥高劑量組HE染色可見視盤及盤周組織結(jié)構(gòu)基本完整,視神經(jīng)纖維呈線性走行,染色均勻,視神經(jīng)組織內(nèi)細(xì)胞排列整齊,但核列較擁擠；中藥中劑量組HE染色可見視盤及其周圍組織結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重,盤周網(wǎng)膜移位,視神經(jīng)經(jīng)組織內(nèi)細(xì)胞增生、排列紊亂；中藥低劑量組HE染色可見視盤周圍組織結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重,盤周網(wǎng)膜移位,視神經(jīng)經(jīng)組織內(nèi)細(xì)胞增生、排列紊亂。5.免疫組織化學(xué)染色：干預(yù)21天,空白組可見視神經(jīng)軸突中SMI312明顯表達(dá),染色深；模型組僅見視神經(jīng)周邊軸突中有SMI312表達(dá),染色較淡,視神經(jīng)中央部分SMI312表達(dá)缺失；中藥高劑量組可見視神經(jīng)軸突中SMI312明顯表達(dá),染色較深；中藥中劑量組可見視神經(jīng)周邊軸突中有SMI312表達(dá),染色較淡,視神經(jīng)中央部分SMI312表達(dá)缺失；中藥低劑量組可見視神經(jīng)周邊軸突中有SMI312表達(dá),染色較淡,視神經(jīng)中央部分SMI312表達(dá)缺失。6.TUNEL細(xì)胞調(diào)亡檢測：干預(yù)21天,空白組視神經(jīng)組織中TUNEL檢測未見細(xì)胞凋亡；模型組視神經(jīng)組織中TUNEL陽性細(xì)胞明顯表達(dá)；空白組與模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；中藥高劑量組視神經(jīng)組織中TUNEL陽性細(xì)胞少量表達(dá)；細(xì)胞凋亡個(gè)數(shù)較模型組明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；中藥中劑量組視神經(jīng)組織中TUNEL陽性細(xì)胞表達(dá)較多,細(xì)胞凋亡個(gè)數(shù)較模型組未見明顯下降,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；中藥低劑量組視神經(jīng)組織中TUNEL陽性細(xì)胞表達(dá)較多,細(xì)胞凋亡個(gè)數(shù)較模型組未見明顯下降,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：1.益氣溫陽通脈方在缺血狀態(tài)下對大鼠視神經(jīng)的結(jié)構(gòu)和功能有較明顯的保護(hù)作用,但有一定的濃度依賴性。2.益氣溫陽通脈方的作用機(jī)制可能與促進(jìn)視神經(jīng)軸突纖維的修復(fù)以及對抗視神經(jīng)組織中的細(xì)胞凋亡有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：益氣溫陽通脈方 前部缺血性視神經(jīng)病變 SMI312 凋亡
【學(xué)位授予單位】：中國中醫(yī)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 中英文縮略語對照表12-13
• 綜述13-21
• 參考文獻(xiàn)19-21
• 前言21-23
• 材料和方法23-31
• 1 實(shí)驗(yàn)材料23-24
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物23
• 1.2 實(shí)驗(yàn)藥物制備23
• 1.3 主要試劑及儀器23-24
• 2 實(shí)驗(yàn)方法24-26
• 2.1 分組處理24
• 2.2 AION大鼠造模24-25
• 2.3 標(biāo)本采集及處理25-26
• 3 實(shí)驗(yàn)觀察方法26-29
• 3.1 眼底彩照及FFA26
• 3.2 P-VEP26
• 3.3 HE染色26-28
• 3.4 免疫組織化學(xué)染色28
• 3.5 TUNEL細(xì)胞凋亡檢測28-29
• 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析29-31
• 結(jié)果31-39
• 1 大鼠眼底彩照檢查31
• 2 大鼠FFA檢查31-32
• 3 大鼠F-VEP檢查32-34
• 4 HE染色觀察大鼠視盤及視神經(jīng)組織的病理變化34-35
• 5 免疫組織化學(xué)染色觀察大鼠視神經(jīng)軸突中SMI312的表達(dá)35-36
• 6 TUNEL檢測大鼠視神經(jīng)組織細(xì)胞凋亡36-39
• 討論39-47
• 1 前部缺血性視神經(jīng)病變病因病機(jī)探討39-42
• 1.1 臟腑陽氣虛衰為發(fā)病之根本39-40
• 1.2 目竅脈絡(luò)瘀阻為發(fā)病之關(guān)鍵40-41
• 1.3 不良因素影響為發(fā)病之重要條件41-42
• 2 動(dòng)物模型的制備與思考42-43
• 2.1 動(dòng)物模型的制備42-43
• 2.2 動(dòng)物模型的思考43
• 3 益氣溫陽通脈方組方依據(jù)及方義闡釋43-44
• 4 益氣溫陽通脈方對大鼠AION模型作用機(jī)制探討44-45
• 5 研究展望45-47
• 結(jié)論47-49
• 參考文獻(xiàn)49-51
• 致謝51-52
• 個(gè)人簡歷52

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：益氣溫陽通脈方對大鼠前部缺血性視神經(jīng)病變模型干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：365282