發(fā)布時間：2017-05-14 13:16

  本文關鍵詞：益氣溫陽通脈方對大鼠前部缺血性視神經(jīng)病變模型干預的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：通過觀察益氣溫陽通脈方不同劑量對大鼠AION模型F-VEP的影響以及對大鼠視盤、視神經(jīng)組織病理學的改變,探討益氣溫陽通脈方對大鼠AION模型視神經(jīng)的保護作用及其可能機制。方法：選用健康雄性SD大鼠60只,隨機分為5組,空白組、模型組、中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組,每組各12只。除空白組外,其余4組從大鼠尾靜脈注入RB2.5mmol/(ml·kg)后,立即用波長532nm、功率75mW、光斑直徑500μm的綠光照射大鼠實驗眼視盤中上2/3區(qū)域18秒。造模后1天通過眼底彩照及FFA檢查,觀察大鼠視盤及其周圍變化；通過F-VEP檢查,記錄P2波潛伏期(ms)及振幅(μ v),從而判斷造模是否成功。造模成功后,模型組給予蒸餾水2ml灌胃,每日1次；中藥高、中、低劑量組分別給予臨床劑量(mg/kg)的20倍、10倍、5倍制成的不同濃度的中藥水煎濃縮劑2ml灌胃,每日1次；空白組正常飼養(yǎng),各組均干預21天。干預第21天通過F-VEP檢查,觀察各組大鼠P2波潛伏期(ms)及振幅(μv)的變化；F-VEP檢查完畢后,將各組大鼠麻醉取出眼球做石蠟切片,分別通過HE染色觀察大鼠視盤及視神經(jīng)組織的病理學改變、免疫組化染色觀察大鼠視神經(jīng)軸突中SMI312的表達,TUNEL檢測大鼠視神經(jīng)組織中的細胞凋亡情況。結果：1.眼底彩照檢查：正常大鼠視盤及盤周血管未見明顯異常；造模后1天,大鼠眼底彩照可見視盤上半水腫,邊界不清。2.FFA檢查：正常大鼠視盤及其周圍血管未見熒光滲漏；造模后1天,造影早期可見大鼠視盤上方低熒光,中、晚期高熒光,說明造模成功。3. F-VEP:干預前空白組與其余四組大鼠P2潛伏期、振幅比較均有統(tǒng)計學意義(P0.01)；且干預前除空白組外,其余四組之間P2潛伏期、振幅比較均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。干預21天空白組、中藥高劑量組P2潛伏期及振幅與模型組比較,有統(tǒng)計學意義(P0.01),中藥中劑量組、中藥低劑量組P2潛伏期及振幅與模型組比較,無統(tǒng)計學意義(P0.05)。干預21天空白組、模型組、中藥中劑量組及中藥低劑量組P2潛伏期、振幅與各組干預前比較,無統(tǒng)計學意義(P0.05),中藥高劑量組干預21天P2潛伏期、振幅與其干預前比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。4.HE染色：干預21天,空白組HE染色可見視盤及盤周組織結構完整,視神經(jīng)組織中細胞形態(tài)規(guī)則,排列整齊,視神經(jīng)纖維呈線性走行,染色均勻；模型組HE染色可見視盤及其周圍組織結構破壞嚴重,盤周網(wǎng)膜移位,視神經(jīng)組織內(nèi)細胞增生顯著、排列十分紊亂,視神經(jīng)纖維萎縮；中藥高劑量組HE染色可見視盤及盤周組織結構基本完整,視神經(jīng)纖維呈線性走行,染色均勻,視神經(jīng)組織內(nèi)細胞排列整齊,但核列較擁擠；中藥中劑量組HE染色可見視盤及其周圍組織結構破壞嚴重,盤周網(wǎng)膜移位,視神經(jīng)經(jīng)組織內(nèi)細胞增生、排列紊亂；中藥低劑量組HE染色可見視盤周圍組織結構破壞嚴重,盤周網(wǎng)膜移位,視神經(jīng)經(jīng)組織內(nèi)細胞增生、排列紊亂。5.免疫組織化學染色：干預21天,空白組可見視神經(jīng)軸突中SMI312明顯表達,染色深；模型組僅見視神經(jīng)周邊軸突中有SMI312表達,染色較淡,視神經(jīng)中央部分SMI312表達缺失；中藥高劑量組可見視神經(jīng)軸突中SMI312明顯表達,染色較深；中藥中劑量組可見視神經(jīng)周邊軸突中有SMI312表達,染色較淡,視神經(jīng)中央部分SMI312表達缺失；中藥低劑量組可見視神經(jīng)周邊軸突中有SMI312表達,染色較淡,視神經(jīng)中央部分SMI312表達缺失。6.TUNEL細胞調(diào)亡檢測：干預21天,空白組視神經(jīng)組織中TUNEL檢測未見細胞凋亡；模型組視神經(jīng)組織中TUNEL陽性細胞明顯表達；空白組與模型組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)；中藥高劑量組視神經(jīng)組織中TUNEL陽性細胞少量表達；細胞凋亡個數(shù)較模型組明顯下降,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)；中藥中劑量組視神經(jīng)組織中TUNEL陽性細胞表達較多,細胞凋亡個數(shù)較模型組未見明顯下降,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)；中藥低劑量組視神經(jīng)組織中TUNEL陽性細胞表達較多,細胞凋亡個數(shù)較模型組未見明顯下降,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論：1.益氣溫陽通脈方在缺血狀態(tài)下對大鼠視神經(jīng)的結構和功能有較明顯的保護作用,但有一定的濃度依賴性。2.益氣溫陽通脈方的作用機制可能與促進視神經(jīng)軸突纖維的修復以及對抗視神經(jīng)組織中的細胞凋亡有關。
【關鍵詞】：益氣溫陽通脈方 前部缺血性視神經(jīng)病變 SMI312 凋亡
【學位授予單位】：中國中醫(yī)科學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 中英文縮略語對照表12-13
• 綜述13-21
• 參考文獻19-21
• 前言21-23
• 材料和方法23-31
• 1 實驗材料23-24
• 1.1 實驗動物23
• 1.2 實驗藥物制備23
• 1.3 主要試劑及儀器23-24
• 2 實驗方法24-26
• 2.1 分組處理24
• 2.2 AION大鼠造模24-25
• 2.3 標本采集及處理25-26
• 3 實驗觀察方法26-29
• 3.1 眼底彩照及FFA26
• 3.2 P-VEP26
• 3.3 HE染色26-28
• 3.4 免疫組織化學染色28
• 3.5 TUNEL細胞凋亡檢測28-29
• 4 統(tǒng)計學分析29-31
• 結果31-39
• 1 大鼠眼底彩照檢查31
• 2 大鼠FFA檢查31-32
• 3 大鼠F-VEP檢查32-34
• 4 HE染色觀察大鼠視盤及視神經(jīng)組織的病理變化34-35
• 5 免疫組織化學染色觀察大鼠視神經(jīng)軸突中SMI312的表達35-36
• 6 TUNEL檢測大鼠視神經(jīng)組織細胞凋亡36-39
• 討論39-47
• 1 前部缺血性視神經(jīng)病變病因病機探討39-42
• 1.1 臟腑陽氣虛衰為發(fā)病之根本39-40
• 1.2 目竅脈絡瘀阻為發(fā)病之關鍵40-41
• 1.3 不良因素影響為發(fā)病之重要條件41-42
• 2 動物模型的制備與思考42-43
• 2.1 動物模型的制備42-43
• 2.2 動物模型的思考43
• 3 益氣溫陽通脈方組方依據(jù)及方義闡釋43-44
• 4 益氣溫陽通脈方對大鼠AION模型作用機制探討44-45
• 5 研究展望45-47
• 結論47-49
• 參考文獻49-51
• 致謝51-52
• 個人簡歷52

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 郭瑤;陳蕾;柳力敏;王敏芳;;缺血性視神經(jīng)病變視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞凋亡過程中蛋白激酶C的改變[J];國際眼科雜志;2009年06期

2 史春;應堅;;苦碟子注射液治療前部缺血性視神經(jīng)病變的療效觀察[J];國際眼科雜志;2010年07期

3 賈站榮;;中藥配合針刺治療前部缺血性視神經(jīng)病變療效觀察[J];河北中醫(yī);2011年01期

4 陶榮三;陳鵬;秦玉枝;楊瀟遠;;中醫(yī)藥治療前部缺血性視神經(jīng)病變療效觀察[J];中國實用神經(jīng)疾病雜志;2010年02期

5 魯艷萍;;中醫(yī)辨證治療前部缺血性視盤病變[J];遼寧中醫(yī)雜志;2007年05期

6 魏冠男;張辛;;自擬益氣通脈湯治療前部缺血性視神經(jīng)病變30例療效觀察[J];湖南中醫(yī)雜志;2012年06期

7 徐慕鴿;魏凱峰;;桂枝活血機理及配伍規(guī)律探析[J];中醫(yī)藥導報;2013年08期

8 杜紅彥;李志英;王蓉;;復方丹參注射液離子導入治療前部缺血性視神經(jīng)病變臨床觀察[J];遼寧中醫(yī)藥大學學報;2012年05期

9 田桂花;;滋肝活血明目湯治療缺血性視神經(jīng)病變138例[J];山東中醫(yī)雜志;2009年08期

10 李娟;仝警安;陳承;尹明;;中醫(yī)辨證配合西醫(yī)常規(guī)治療前部缺血性視神經(jīng)病變46例[J];陜西中醫(yī);2007年10期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王一瑋;大鼠前部缺血性視神經(jīng)病變模型的建立及視神經(jīng)損傷的動態(tài)觀察[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2014年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 亓昊慧;針刺特定穴位對單眼剝奪弱視大鼠閃光視誘發(fā)電位影響的實驗研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2005年

  本文關鍵詞：益氣溫陽通脈方對大鼠前部缺血性視神經(jīng)病變模型干預的實驗研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：365282