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健脾疏肝降脂方對(duì)非酒精性脂肪肝小鼠血脂及肝組織病理學(xué)的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-05-13 13:05

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【摘要】:目的:觀察健脾疏肝降脂方對(duì)高脂肪飲食和藥物引起的非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型小鼠的影響,并探討該方的作用機(jī)制,為臨床應(yīng)用推廣提供有力的證據(jù)。方法:72只SPF級(jí)昆明種小鼠,給予全價(jià)營養(yǎng)飼料喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為6組,即正常組,模型對(duì)照組,殼脂膠囊組,健脾疏肝降脂方高、中、低劑量組,每組12只,雌雄各半。正常組給予普通飼料,其它各組采用喂高脂飼料和藥物誘導(dǎo)建立NAFLD小鼠模型。同時(shí),除正常組和模型對(duì)照組外,各治療組給予健脾疏肝降脂方水煎液或殼脂膠囊水溶液灌服,正常組和模型組給予等體積的超凈水灌服,各組小鼠(除正常組外)在下腹部給予皮下注射10%的CCl4食用油溶液,劑量為0.1m L/10g,每周2次,共持續(xù)6周。最后一次治療后禁食12h,給予10%水合氯醛溶液4m L/kg腹腔內(nèi)注射麻醉,麻醉成功后,給予腹主動(dòng)脈穿刺取血,將血樣低溫下離心分離,檢測血清甘油三酯(TG)、膽固醇(TC)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)水平或反應(yīng)性變化及肝組織游離脂肪酸(FFA)的含量。處死小鼠后,快速剖取肝臟稱其濕重,計(jì)算肝指數(shù),用0.9%氯化鈉溶液沖洗,在肝臟左葉同位置處剪一小塊大小適宜的肝組織置于4%多聚甲醛液中固定,給予肝組織石蠟包埋,切片,HE染色,觀察組織病理學(xué)變化。結(jié)果:①模型組與正常組比較,其小鼠肝指數(shù)、肝濕重及血清TG、TC、ALT、AST、LDL及FFA均明顯升高,有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);②與正常組相比,健脾疏肝降脂方高、中劑量組肝指數(shù)、肝濕重、TG、TC、ALT、AST、LDL及FFA均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);③與模型組對(duì)比,健脾疏肝降脂方高、中、低劑量組和殼脂膠囊組各項(xiàng)指標(biāo)均明顯降低或者減輕,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);④在改善各項(xiàng)指標(biāo)方面,健脾疏肝降脂方高、中劑量組明顯優(yōu)于殼脂膠囊組及低劑量組,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);⑤光鏡下可見:肝小葉結(jié)構(gòu)清晰,中央靜脈周圍肝細(xì)胞呈輻射形式排列,形態(tài)一致,大小均勻,未見脂肪變性及壞死、炎性細(xì)胞侵潤;顯微鏡下見,模型對(duì)照組小鼠肝小葉構(gòu)造不清楚,肝小葉出現(xiàn)明顯損害,肝細(xì)胞體積腫脹明顯,肝細(xì)胞水腫明顯,可見肝組織呈彌漫性脂肪變,核增大,細(xì)胞索無規(guī)律排列,可見由兩個(gè)及兩個(gè)以上破裂的肝細(xì)胞相互融合,其中又以小葉中央病變嚴(yán)重,大量炎性細(xì)胞入侵,有時(shí)可見凋亡小體;各治療組及殼脂膠囊組小鼠肝細(xì)胞脂肪變均有不同程度的改善趨勢,治療高、中劑量組和殼脂膠囊組效果好于低劑量組;⑥電鏡下可見:正常組肝組織中的超微結(jié)構(gòu)肝細(xì)胞內(nèi)有著豐富的線粒體,線粒體嵴較為豐富,但也可見有少數(shù)的脂滴存在,模型組小鼠肝組織中的超微結(jié)構(gòu)肝細(xì)胞內(nèi)有著豐富的線粒體,線粒體嵴幾乎消失,但也可見有大量的脂滴存在,和大量的膠原纖維存在,各治療組及殼脂膠囊組小鼠肝細(xì)胞脂肪變均有不同程度的改善趨勢,治療高、中劑量組和殼脂膠囊組效果好于低劑量組。結(jié)論:健脾疏肝降脂方對(duì)NAFLD小鼠的肝功能、血脂TG、TC、HDL、LDL及肝組織FFA有良好的調(diào)節(jié)作用,本方能通過促進(jìn)NAFLD小鼠病變肝臟細(xì)胞的恢復(fù)來降低血清轉(zhuǎn)氨酶的活性,減低血脂的含量及FFA的活性,縮小NAFLD小鼠的肝臟外形及減輕重量,從而改善NAFLD小鼠肝臟的脂肪變性程度;恢復(fù)肝細(xì)胞中的線粒體,增強(qiáng)肝細(xì)胞的線粒體和增加線粒體嵴的作用,使得肝細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生大量ATP增強(qiáng)其能量代謝,從而使脂肪酸代謝增強(qiáng),減少脂滴的形成。高、中、低三個(gè)劑量組由于計(jì)量的關(guān)系而療效差異明顯,隨著劑量的增加而療效增加,成正效的比例關(guān)系。
【關(guān)鍵詞】:健脾疏肝降脂方 非酒精性脂肪肝 小鼠模型 血脂 肝臟病理
【學(xué)位授予單位】:河南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R285.5
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • Abstract7-10
  • 前言10-11
  • 材料與方法11-16
  • 1 實(shí)驗(yàn)材料11-12
  • 2 實(shí)驗(yàn)方法12-16
  • 結(jié)果16-20
  • 1 一般情況觀察及動(dòng)物死亡情況16
  • 2 各組小鼠肝濕重及肝指數(shù)的變化16
  • 3 各組小鼠肝組織FFA的變化16-17
  • 4 小鼠血脂含量的變化17
  • 5 各組小鼠血清ALT、AST活性的變化17-18
  • 6 各組小鼠肝組織光鏡及電鏡的變化18-20
  • 理論探討20-27
  • 1 中醫(yī)學(xué)對(duì)非酒精性脂肪肝的認(rèn)識(shí)20-22
  • 2 導(dǎo)師對(duì)非酒精性脂肪肝的認(rèn)識(shí)22
  • 3 健脾疏肝降脂方組成及方義分析22-25
  • 4 NAFLD的動(dòng)物模型選擇依據(jù)25
  • 5 健脾疏肝降脂方治療非酒精性脂肪肝的可能機(jī)理25-27
  • 結(jié)論27-28
  • 致謝28-29
  • 參考文獻(xiàn)29-31
  • 附錄31-44
  • 附錄1 文獻(xiàn)綜述31-41
  • 參考文獻(xiàn)36-41
  • 附錄2 光鏡下肝組織病理照片41-42
  • 附錄3 電鏡下肝細(xì)胞內(nèi)線粒體及脂肪滴病理照片42-43
  • 附錄4 英文縮略詞表43-44
  • 附錄5 在校期間論文論著和科研情況44

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本文編號(hào):362606

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