目的探討缺血再灌注條件下BMP2/4參與腸黏膜屏障損傷的機(jī)制。方法制作腸上皮細(xì)胞缺氧模型、大鼠腸缺血再灌注損傷模型。取空腸切片,Western blot、免疫熒光檢測(cè)腸上皮細(xì)胞內(nèi)BMP的變化; Western blot、免疫熒光、RT-PCR檢測(cè)外源性BMP蛋白對(duì)腸上皮細(xì)胞內(nèi)NF-κB信號(hào)及TNF-a、IL-6的表達(dá)變化的影響; Western blot檢測(cè)外源性BMP蛋白對(duì)緊密連接蛋白o(hù)ccludin表達(dá)變化的影響。結(jié)果缺氧及缺血再灌注條件下腸上皮細(xì)胞內(nèi)的BMP2/4表達(dá)明顯增加,BMP2/4通過(guò)激活腸上皮細(xì)胞內(nèi)的NF-κB信號(hào)導(dǎo)致炎癥介質(zhì)TNF-a、IL-6表達(dá)增加,增加腸黏膜屏障的通透性及減少緊密連接蛋白o(hù)ccludin的表達(dá),損害腸黏膜物理屏障的完整性,從而造成腸黏膜屏障的損傷。結(jié)論缺血再灌注條件下,BMP信號(hào)通過(guò)激活NF-κB參與腸黏膜屏障損傷。 

【文章來(lái)源】：局解手術(shù)學(xué)雜志. 2019,28(02)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

缺氧及缺血再灌注條件下腸上皮細(xì)胞內(nèi)的BMP2、BMP4表達(dá)情況

圖3免疫熒光圖(×400)*:與正常組比較，P＜0．05;#:與BMP2、BMP4組比較，P＜0．05;Δ:與正常組比較，P＜0．01圖4外源性BMP2、BMP4誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞內(nèi)炎癥基因TNF-a和IL-6的表達(dá)圖5Westernblot檢測(cè)蛋白水平變化3討論骨形態(tài)蛋白BMP屬于TGF-β超級(jí)家族中的一員，BMP首先在骨組織中發(fā)現(xiàn)的，但后續(xù)的研究發(fā)現(xiàn)其作用不僅僅局限于骨組織，其可以通過(guò)調(diào)節(jié)一群廣泛多樣的基因活性，影響著如中胚層形成、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生、肢體形成、關(guān)節(jié)和骨骼發(fā)育以及肺、胃腸發(fā)育等基本的發(fā)育過(guò)程［8］。以往的研究都聚焦于BMP蛋白在維持腸隱窩干細(xì)胞的自我更新及增殖、分化上，如其主要通過(guò)抑制Wnt、Notch、EGF信號(hào)的作用，維持腸上皮干細(xì)胞的自我更新、增殖分化處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡，防止干細(xì)胞過(guò)度激活［9-10］。目前越來(lái)越多的證據(jù)指出，BMP2、BMP4蛋白的作用不僅包括維持細(xì)胞的增殖分化，還可以作為致炎因子參與炎癥反應(yīng)，如BMP2可以誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、前體成骨細(xì)胞及軟組織、神經(jīng)組織的炎癥反應(yīng)［11-13］。Jo等［14］發(fā)現(xiàn)BMP4通過(guò)激活NF-κB信號(hào)上調(diào)細(xì)胞間黏附分子1(intercellularcelladhesionmolecule-1，ICAM-1)在介導(dǎo)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)血管內(nèi)皮組織中扮演重要角色。人胚胎腎HEK293細(xì)胞中NF-κB信號(hào)的激活也依賴(lài)于BMP信號(hào)通路，但BMP蛋白與缺血再灌注時(shí)腸道炎癥之間的關(guān)系卻少有研究。正常情況下，腸道組織中的BMP蛋白表達(dá)較低，但在病理狀態(tài)下胃腸道組織的中的BMP蛋白表達(dá)增加，如結(jié)腸組織發(fā)生癌變時(shí)BMP蛋白表達(dá)增加［15］。有研究報(bào)道，長(zhǎng)期接受腸外營(yíng)養(yǎng)的小鼠腸組織內(nèi)的BMP蛋白表達(dá)增加，腸上皮細(xì)胞增殖減慢，腸黏膜出現(xiàn)萎縮，但在缺血再灌注時(shí)的BMP表達(dá)變化不甚清楚［16］。基于此原因，我們希望通過(guò)本研究更加深入

圖3免疫熒光圖(×400)*:與正常組比較，P＜0．05;#:與BMP2、BMP4組比較，P＜0．05;Δ:與正常組比較，P＜0．01圖4外源性BMP2、BMP4誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞內(nèi)炎癥基因TNF-a和IL-6的表達(dá)圖5Westernblot檢測(cè)蛋白水平變化3討論骨形態(tài)蛋白BMP屬于TGF-β超級(jí)家族中的一員，BMP首先在骨組織中發(fā)現(xiàn)的，但后續(xù)的研究發(fā)現(xiàn)其作用不僅僅局限于骨組織，其可以通過(guò)調(diào)節(jié)一群廣泛多樣的基因活性，影響著如中胚層形成、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生、肢體形成、關(guān)節(jié)和骨骼發(fā)育以及肺、胃腸發(fā)育等基本的發(fā)育過(guò)程［8］。以往的研究都聚焦于BMP蛋白在維持腸隱窩干細(xì)胞的自我更新及增殖、分化上，如其主要通過(guò)抑制Wnt、Notch、EGF信號(hào)的作用，維持腸上皮干細(xì)胞的自我更新、增殖分化處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡，防止干細(xì)胞過(guò)度激活［9-10］。目前越來(lái)越多的證據(jù)指出，BMP2、BMP4蛋白的作用不僅包括維持細(xì)胞的增殖分化，還可以作為致炎因子參與炎癥反應(yīng)，如BMP2可以誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、前體成骨細(xì)胞及軟組織、神經(jīng)組織的炎癥反應(yīng)［11-13］。Jo等［14］發(fā)現(xiàn)BMP4通過(guò)激活NF-κB信號(hào)上調(diào)細(xì)胞間黏附分子1(intercellularcelladhesionmolecule-1，ICAM-1)在介導(dǎo)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)血管內(nèi)皮組織中扮演重要角色。人胚胎腎HEK293細(xì)胞中NF-κB信號(hào)的激活也依賴(lài)于BMP信號(hào)通路，但BMP蛋白與缺血再灌注時(shí)腸道炎癥之間的關(guān)系卻少有研究。正常情況下，腸道組織中的BMP蛋白表達(dá)較低，但在病理狀態(tài)下胃腸道組織的中的BMP蛋白表達(dá)增加，如結(jié)腸組織發(fā)生癌變時(shí)BMP蛋白表達(dá)增加［15］。有研究報(bào)道，長(zhǎng)期接受腸外營(yíng)養(yǎng)的小鼠腸組織內(nèi)的BMP蛋白表達(dá)增加，腸上皮細(xì)胞增殖減慢，腸黏膜出現(xiàn)萎縮，但在缺血再灌注時(shí)的BMP表達(dá)變化不甚清楚［16］�；诖嗽�，我們希望通過(guò)本研究更加深入

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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