目的探討缺血再灌注條件下BMP2/4參與腸黏膜屏障損傷的機(jī)制。方法制作腸上皮細(xì)胞缺氧模型、大鼠腸缺血再灌注損傷模型。取空腸切片,Western blot、免疫熒光檢測腸上皮細(xì)胞內(nèi)BMP的變化; Western blot、免疫熒光、RT-PCR檢測外源性BMP蛋白對腸上皮細(xì)胞內(nèi)NF-κB信號及TNF-a、IL-6的表達(dá)變化的影響; Western blot檢測外源性BMP蛋白對緊密連接蛋白o(hù)ccludin表達(dá)變化的影響。結(jié)果缺氧及缺血再灌注條件下腸上皮細(xì)胞內(nèi)的BMP2/4表達(dá)明顯增加,BMP2/4通過激活腸上皮細(xì)胞內(nèi)的NF-κB信號導(dǎo)致炎癥介質(zhì)TNF-a、IL-6表達(dá)增加,增加腸黏膜屏障的通透性及減少緊密連接蛋白o(hù)ccludin的表達(dá),損害腸黏膜物理屏障的完整性,從而造成腸黏膜屏障的損傷。結(jié)論缺血再灌注條件下,BMP信號通過激活NF-κB參與腸黏膜屏障損傷。 

【文章來源】：局解手術(shù)學(xué)雜志. 2019,28(02)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

缺氧及缺血再灌注條件下腸上皮細(xì)胞內(nèi)的BMP2、BMP4表達(dá)情況

圖3免疫熒光圖(×400)*:與正常組比較，P＜0．05;#:與BMP2、BMP4組比較，P＜0．05;Δ:與正常組比較，P＜0．01圖4外源性BMP2、BMP4誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞內(nèi)炎癥基因TNF-a和IL-6的表達(dá)圖5Westernblot檢測蛋白水平變化3討論骨形態(tài)蛋白BMP屬于TGF-β超級家族中的一員，BMP首先在骨組織中發(fā)現(xiàn)的，但后續(xù)的研究發(fā)現(xiàn)其作用不僅僅局限于骨組織，其可以通過調(diào)節(jié)一群廣泛多樣的基因活性，影響著如中胚層形成、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生、肢體形成、關(guān)節(jié)和骨骼發(fā)育以及肺、胃腸發(fā)育等基本的發(fā)育過程［8］。以往的研究都聚焦于BMP蛋白在維持腸隱窩干細(xì)胞的自我更新及增殖、分化上，如其主要通過抑制Wnt、Notch、EGF信號的作用，維持腸上皮干細(xì)胞的自我更新、增殖分化處于一個動態(tài)平衡，防止干細(xì)胞過度激活［9-10］。目前越來越多的證據(jù)指出，BMP2、BMP4蛋白的作用不僅包括維持細(xì)胞的增殖分化，還可以作為致炎因子參與炎癥反應(yīng)，如BMP2可以誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、前體成骨細(xì)胞及軟組織、神經(jīng)組織的炎癥反應(yīng)［11-13］。Jo等［14］發(fā)現(xiàn)BMP4通過激活NF-κB信號上調(diào)細(xì)胞間黏附分子1(intercellularcelladhesionmolecule-1，ICAM-1)在介導(dǎo)炎癥細(xì)胞浸潤血管內(nèi)皮組織中扮演重要角色。人胚胎腎HEK293細(xì)胞中NF-κB信號的激活也依賴于BMP信號通路，但BMP蛋白與缺血再灌注時腸道炎癥之間的關(guān)系卻少有研究。正常情況下，腸道組織中的BMP蛋白表達(dá)較低，但在病理狀態(tài)下胃腸道組織的中的BMP蛋白表達(dá)增加，如結(jié)腸組織發(fā)生癌變時BMP蛋白表達(dá)增加［15］。有研究報道，長期接受腸外營養(yǎng)的小鼠腸組織內(nèi)的BMP蛋白表達(dá)增加，腸上皮細(xì)胞增殖減慢，腸黏膜出現(xiàn)萎縮，但在缺血再灌注時的BMP表達(dá)變化不甚清楚［16］�；诖嗽�，我們希望通過本研究更加深入

圖3免疫熒光圖(×400)*:與正常組比較，P＜0．05;#:與BMP2、BMP4組比較，P＜0．05;Δ:與正常組比較，P＜0．01圖4外源性BMP2、BMP4誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞內(nèi)炎癥基因TNF-a和IL-6的表達(dá)圖5Westernblot檢測蛋白水平變化3討論骨形態(tài)蛋白BMP屬于TGF-β超級家族中的一員，BMP首先在骨組織中發(fā)現(xiàn)的，但后續(xù)的研究發(fā)現(xiàn)其作用不僅僅局限于骨組織，其可以通過調(diào)節(jié)一群廣泛多樣的基因活性，影響著如中胚層形成、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生、肢體形成、關(guān)節(jié)和骨骼發(fā)育以及肺、胃腸發(fā)育等基本的發(fā)育過程［8］。以往的研究都聚焦于BMP蛋白在維持腸隱窩干細(xì)胞的自我更新及增殖、分化上，如其主要通過抑制Wnt、Notch、EGF信號的作用，維持腸上皮干細(xì)胞的自我更新、增殖分化處于一個動態(tài)平衡，防止干細(xì)胞過度激活［9-10］。目前越來越多的證據(jù)指出，BMP2、BMP4蛋白的作用不僅包括維持細(xì)胞的增殖分化，還可以作為致炎因子參與炎癥反應(yīng)，如BMP2可以誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、前體成骨細(xì)胞及軟組織、神經(jīng)組織的炎癥反應(yīng)［11-13］。Jo等［14］發(fā)現(xiàn)BMP4通過激活NF-κB信號上調(diào)細(xì)胞間黏附分子1(intercellularcelladhesionmolecule-1，ICAM-1)在介導(dǎo)炎癥細(xì)胞浸潤血管內(nèi)皮組織中扮演重要角色。人胚胎腎HEK293細(xì)胞中NF-κB信號的激活也依賴于BMP信號通路，但BMP蛋白與缺血再灌注時腸道炎癥之間的關(guān)系卻少有研究。正常情況下，腸道組織中的BMP蛋白表達(dá)較低，但在病理狀態(tài)下胃腸道組織的中的BMP蛋白表達(dá)增加，如結(jié)腸組織發(fā)生癌變時BMP蛋白表達(dá)增加［15］。有研究報道，長期接受腸外營養(yǎng)的小鼠腸組織內(nèi)的BMP蛋白表達(dá)增加，腸上皮細(xì)胞增殖減慢，腸黏膜出現(xiàn)萎縮，但在缺血再灌注時的BMP表達(dá)變化不甚清楚［16］�；诖嗽颍覀兿Ｍㄟ^本研究更加深入

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腸缺血再灌注損傷的病理機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 張臣,連樹華,柳宏.  臨床小兒外科雜志. 2018(02)
[2]BMP4和拮抗劑Noggin在顯性脊柱裂胎鼠發(fā)病中的作用[J]. 姜明宇,任明永,劉海春,徐向平.  中國婦幼保健. 2017(20)
[3]BMP-2在肝細(xì)胞癌中表達(dá)及與腫瘤血管生成的關(guān)系[J]. 王玉霞,劉貴秋,劉輝,張傳山.  世界華人消化雜志. 2017(13)
[4]缺血再灌注條件下腸上皮細(xì)胞來源的骨形成蛋白-4促進(jìn)腸上皮間淋巴細(xì)胞凋亡的研究[J]. 羅彬予,陳康,馮奇,楊樺,張朝軍.  中華實驗外科雜志. 2016 (01)
[5]核轉(zhuǎn)錄因子NF-KB對腦缺血再灌注干預(yù)機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 于凌志,左艷麗,賈孟輝,王佩佩,劉麗,李占濤,蘇丹.  中國民族醫(yī)藥雜志. 2015(07)
[6]Regulation of intestinal stem cell fate specification[J]. QI Zhen,CHEN Ye-Guang.  Science China（Life Sciences）. 2015(06)
[7]Follistatin表達(dá)抑制促進(jìn)BMP-2誘導(dǎo)人類骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的實驗研究[J]. 耿家金,程加峰,趙平,楊名,張永強(qiáng).  國際骨科學(xué)雜志. 2015(03)



本文編號：3602638