本文關(guān)鍵詞：利多卡因代謝物的法醫(yī)毒物動(dòng)力學(xué)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:1.建立生物檢材中利多卡因及其代謝物的高效液相法和高效液相質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)方法;2.建立利多卡因及其代謝產(chǎn)物的死后分布、死后彌散和死后再分布動(dòng)物模型;建立代謝和分解動(dòng)力學(xué)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型;3.研究利多卡因及其代謝產(chǎn)物在犬體內(nèi)的死后分布、死后彌散和死后再分布以及代謝、分解動(dòng)力學(xué)的規(guī)律。方法:檢測(cè)方法:在生物檢材中添加內(nèi)標(biāo)安定、利多卡因、單乙基甘氨酰二甲苯胺(MEGX)和甘氨二甲基苯酰胺(GX),采用液液萃取和在線(xiàn)固相萃取法選擇,離子肼質(zhì)譜聯(lián)用進(jìn)行定性和高效液相色譜內(nèi)標(biāo)法和工作曲線(xiàn)法定量。死后分布:犬經(jīng)蛛網(wǎng)膜下腔、硬膜外、股靜脈,按臨床硬腦膜麻醉極量(10.665mg/kg)注入利多卡因。待呼吸、心跳等生命體征完全消失后,采集腦、脊髓(頸段、胸段、腰段和骶段)、心肌、肺、肝、脾、腎、心血、外周血、膽汁,-20℃保存待檢。死后再分布:犬經(jīng)蛛網(wǎng)膜下腔、硬膜外,按0.5倍(6.34mg/kg)和5倍(63.4mg/kg)硬膜外麻醉極量分別注入利多卡因,待呼吸、心跳等生命體征完全消失后,分別于0h、12h、24h、36h和72h采集心血、外周血、肝和腦,-20℃保存待檢。死后彌散:犬窒息處死,待呼吸、心跳等生命體征完全消失后,經(jīng)硬膜外注入利多卡因(10.665mg/kg)。分別于給藥后0.5h和72h采集心血、外周血、心肌、腦、肺、肝、脾、腎、左下肢肌,-20℃保存待檢。代謝動(dòng)力學(xué)研究:經(jīng)蛛網(wǎng)膜下腔按蛛網(wǎng)膜下麻醉極量(2.665mg/kg),硬膜外和股靜脈按臨床硬膜外麻醉極量(10.665mg/kg)緩慢注入利多卡因。給藥后0、5、10、20、40、60、120、200、420、1440、2880、4320mins采集股靜脈血,-20℃保存待檢。分解動(dòng)力學(xué)研究:染毒組按臨床硬膜外麻醉極量(10.665mg/kg)經(jīng)股靜脈注入利多卡因,給藥后0.5h采集股靜脈血300m L,置于20℃、4℃、-20℃和20℃+1%Na F條件下保存待檢;空白添加組采集股靜脈血300m L分為3等份,按照中毒組犬死亡時(shí)靜脈血中的利多卡因、MEGX和GX的含量分別添加利多卡因、MEGX和GX,將空白添加組的每等份血樣分別置于同染毒組相同的條件下保存,第1天、10天、15天、30天、45天、81天、115天檢測(cè)。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法和其他軟件:采用SPSS 20軟件對(duì)多樣本均數(shù)比較進(jìn)行方差分析,各組數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)。Win Nonlin藥代動(dòng)力學(xué)軟件處理。結(jié)果:1.檢測(cè)方法:HPLC-LIT-MS和HPLC可以對(duì)利多卡因、MEGX和GX進(jìn)行檢測(cè)。利多卡因的線(xiàn)性范圍為0.01~160ng/m L或ng/mg,最低檢出濃度為0.01ng/m L,最低檢出限為0.004ng(S/N=3);MEGX的線(xiàn)性范圍為0.8~160ng/m L或ng/mg,最低檢出濃度為0.2ng/m L,最低檢出限為0.1ng(S/N=3),GX的線(xiàn)性范圍為0.01~200ng/m L或ng/mg,最低檢出濃度為0.01ng/m L,最低檢出限為0.001ng(S/N=3)。2.死后分布:蛛網(wǎng)膜下腔染毒致死家犬臟器和體液中MEGX含量最高的是肺,膽汁最低;GX含量最高的是肺,膽汁最低。硬膜外染毒致死家犬臟器和體液中MEGX含量最高的是肺,膽汁最低;GX含量最高的是肺,膽汁最低。靜脈注射染毒致死家犬臟器和體液中MEGX含量最高的是脾,膽汁最少;GX含量最高的是腎,膽汁最少。3.死后再分布:蛛網(wǎng)膜下腔組,小劑量利多卡因入體后,心血中期含量隨時(shí)間呈下降趨勢(shì),而在腦中呈上升趨勢(shì)。心血、外周血、肝臟和腦中均可檢出代謝產(chǎn)物MEGX且含量變化較穩(wěn)定;大劑量利多卡因入體后,其含量隨時(shí)間在心血、外周血和腦中呈現(xiàn)上升趨勢(shì),肝中檢出MEGX且含量變化較穩(wěn)定。硬膜外組,小劑量利多卡因在心血、外周血和腦中的含量隨時(shí)間變化趨勢(shì)相似,肝中的含量較穩(wěn)定,但未檢出MEGX;大劑量組中利多卡因在心血中含量隨時(shí)間呈下降趨勢(shì),腦組織中呈上升趨勢(shì)。所有樣品中僅在肝中檢出MEGX。4.死后彌散:犬生命體征完全消失時(shí)給藥后0.5h,外周血中Lidociane含量最高,其次是腦,脾中含量最低。72h腦中Lidociane含量最高,其次是外周血,脾最低。所有生物樣品均未檢出MEGX和GX。5.代謝動(dòng)力學(xué)研究:經(jīng)蛛網(wǎng)膜下腔染毒,股靜脈血中的GX、MEGX吸收半衰期分別為24.65min、4.81min,消除半衰期分別為265.08min、71.53min。Tmax分別為93.13min、20.09min。經(jīng)硬膜外染毒,GX、MEGX吸收半衰期分別為24.65min、4.31min,消除半衰期分別為514.54min、162.56min。Tmax分別為113.49min、23.19min。經(jīng)靜脈染毒,股靜脈血中的GX、MEGX吸收半衰期分別為49.15min、0.22 min,消除半衰期分別為218.33 min、81.88 min。Tmax分別為136.46 min、1.89 min。硬腦外麻醉組中GX:MEGX的值、蛛網(wǎng)膜下腔麻醉組中GX:Lidocaine的值、靜脈麻醉組中GX:Lidocaine的值與時(shí)間擬合的函數(shù)推算出的理論時(shí)間和實(shí)際時(shí)間相近。6.分解動(dòng)力學(xué)研究:添加利多卡因的空白血分別置于20℃+Na F和20℃條件下,第81天血中均可檢出MEGX和GX,第115天添加利多卡因的血中均可檢出MEGX和GX�？瞻捉M中MEGX和GX在-20℃條件分解緩慢,染毒組中MEGX和GX在不同保存條件下分解速度由快到慢:20℃20℃+Na F4℃-20℃。結(jié)論:1.本實(shí)驗(yàn)建立了同時(shí)檢測(cè)生物檢材中利多卡因、MEGX和GX的液液萃取方法和LC-LIT-MS、HPLC檢測(cè)方法,可用于對(duì)利多卡因中毒案件的定性定量檢測(cè)。2.不同途徑染毒犬體內(nèi)均可檢出利多卡因、MEGX和GX,蛛網(wǎng)膜下腔和硬膜外腔注射利多卡因致死時(shí)利多卡因的死后分布特點(diǎn)相似,與靜脈注射死后分布不相同;檢測(cè)MEGX和GX時(shí),可選擇肺為首選檢材。3.利多卡因在蛛網(wǎng)膜下腔和硬膜外麻醉致死犬體內(nèi)可發(fā)生死后再分布,MEGX不發(fā)生死后再分布。4.利多卡因會(huì)發(fā)生死后彌散,生前染毒犬體內(nèi)血液和臟器均可檢出利多卡因MEGX和GX,而死后染毒犬體內(nèi)血液和臟器僅檢出利多卡因,而未能檢出代謝物MEGX和GX,提示MEGX和GX檢出與否可能成為區(qū)分利多卡因生前還是死后染毒的依據(jù)。5.不同途徑染毒犬體內(nèi)利多卡因及其代謝物MEGX和GX的代謝動(dòng)力學(xué)規(guī)律不同。利用利多卡因、MEGX和GX三者相互比值與時(shí)間關(guān)系方程推算的利多卡因理論用藥時(shí)間與實(shí)際時(shí)間相近,其推斷方法有望應(yīng)用于利多卡因麻醉意外的法醫(yī)鑒定。6.利多卡因、MEGX和GX在染毒血和空白添加血中均可分解,其分解產(chǎn)物與其代謝產(chǎn)物相同;相同保存條件下染毒組血中利多卡因、MEGX和GX比空白添加組分解較快;染毒組和空白添加組中的利多卡因、MEGX和GX在-20℃比20℃+Na F、20℃和4℃降解的慢。
【關(guān)鍵詞】：利多卡因 代謝產(chǎn)物 毒物動(dòng)力學(xué) 液相色譜-離子肼質(zhì)譜 高效液相色譜法
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：D919
【目錄】：

• 中文摘要8-11
• 英文摘要11-15
• 常用縮寫(xiě)詞中英文對(duì)照表15-16
• 前言16-18
• 第一部分 生物樣品中利多卡因及其代謝產(chǎn)物檢測(cè)方法建立18-30
• 利多卡因及其代謝產(chǎn)物的 HPLC 方法18-22
• 1 材料與方法18-19
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物18
• 1.2 藥品和試劑18
• 1.3 儀器及分析條件18
• 1.4 樣品制備18
• 1.5 樣品處理18-19
• 2 結(jié)果19-22
• 2.1 利多卡因、MEGX及地西泮的高效液相色譜圖19-20
• 2.2 響應(yīng)曲線(xiàn)和工作曲線(xiàn)20-22
• 2.2.1 響應(yīng)曲線(xiàn)20
• 2.2.2 工作曲線(xiàn)20
• 2.2.3 選擇回收率20-22
• 利多卡因及其代謝產(chǎn)物 HPLC-MS/MS 檢測(cè)方法22-30
• 1 材料與方法22-24
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物22
• 1.2 藥品和試劑22
• 1.3 儀器及分析條件22-23
• 1.4 樣品制備23
• 1.5 樣品處理23-24
• 2 結(jié)果24-29
• 2.1 利多卡因、MEGX及GX的高效液相色譜圖和質(zhì)譜圖24-27
• 2.2 工作曲線(xiàn)27
• 2.3 選擇回收率27-29
• 3 討論29-30
• 第二部分 利多卡因及其代謝物MEGX和GX的死后分布研究30-41
• 1 材料與方法30-32
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物30
• 1.2 藥品和試劑30
• 1.3 儀器及分析條件30
• 1.4 動(dòng)物模型30-31
• 1.5 樣品處理31
• 1.6 數(shù)據(jù)處理31-32
• 2 結(jié)果32-40
• 2.1 利多卡因、MEGX及GX的高效液相色譜圖和質(zhì)譜圖32-37
• 2.2 工作曲線(xiàn)和選擇回收率37
• 2.3 染毒犬體內(nèi)利多卡因、MEGX和GX含量37-40
• 3 討論40-41
• 第三部分 利多卡因及其代謝物MEGX的死后再分布研究41-57
• 1 材料與方法41-43
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物41
• 1.2 藥品和試劑41
• 1.3 儀器及分析條件41
• 1.4 動(dòng)物模型41-42
• 1.5 樣品處理42
• 1.6 數(shù)據(jù)處理42-43
• 2 結(jié)果43-55
• 2.1 利多卡因、MEGX及地西泮的高效液相色譜圖43
• 2.2 響應(yīng)曲線(xiàn)和工作曲線(xiàn)43
• 2.2.1 響應(yīng)曲線(xiàn)43
• 2.2.2 工作曲線(xiàn)和選擇回收率43
• 2.3 動(dòng)物表現(xiàn)及解剖所見(jiàn)43-45
• 2.4 死后再分布45-55
• 2.4.1 蛛網(wǎng)膜下腔麻醉致死犬體內(nèi)利多卡因和MEGX死后再分布情況45-47
• 2.4.2 硬膜外麻醉致死犬體內(nèi)利多卡因和MEGX死后再分布情況47-55
• 3 討論55-57
• 第四部分 利多卡因及其代謝物M E G X和G X的 死后彌散研究57-63
• 1 材料與方法57-59
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物57
• 1.2 藥品和試劑57
• 1.3 儀器及分析條件57
• 1.4 動(dòng)物模型57
• 1.5 樣品處理57-58
• 1.6 數(shù)據(jù)處理58-59
• 2 結(jié)果59-62
• 2.1 利多卡因、MEGX及GX的高效液相色譜圖和質(zhì)譜圖59-60
• 2.2 工作曲線(xiàn)和選擇回收率60
• 2.3 硬膜外麻醉致死犬體內(nèi)利多卡因、MEGX和GX含量變化60-62
• 3 討論62-63
• 第五部分 利多卡因及其代謝物M E G X和G X的 代謝動(dòng)力學(xué)研究63-77
• 1 材料與方法63-65
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物63
• 1.2 藥品和試劑63
• 1.3 儀器及分析條件63
• 1.4 動(dòng)物模型63
• 1.5 樣品處理63-64
• 1.6 數(shù)據(jù)處理64-65
• 2 結(jié)果65-75
• 2.1 利多卡因、MEGX及GX的高效液相色譜圖和質(zhì)譜圖65-66
• 2.2 工作曲線(xiàn)和選擇回收率66
• 2.3 犬蛛網(wǎng)膜下腔、硬膜外和靜脈麻醉組血中毒代動(dòng)力學(xué)模型66-75
• 2.3.1 藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)66-67
• 2.3.2 利多卡因、MEGX和GX的理論值和實(shí)測(cè)值比較67-69
• 2.3.3 擬合的毒代動(dòng)力學(xué)方程和C-T曲線(xiàn)69-71
• 2.3.4 硬膜外、蛛網(wǎng)膜下腔和靜脈組中利多卡因給藥時(shí)間推斷方程71-73
• 2.3.5 硬膜外、蛛網(wǎng)膜下腔和靜脈組利多卡因理論和實(shí)際給藥時(shí)間比較73-75
• 3 討論75-77
• 第六部分 利多卡因及其代謝物MEGX和GX分解動(dòng)力學(xué)研究77-101
• 1 材料與方法77-79
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物77
• 1.2 藥品和試劑77
• 1.3 儀器及分析條件77
• 1.4 動(dòng)物模型77-78
• 1.5 樣品處理78
• 1.6 數(shù)據(jù)處理78-79
• 2 結(jié)果79-99
• 2.1 利多卡因、MEGX及GX的高效液相色譜圖和質(zhì)譜圖79
• 2.2 工作曲線(xiàn)和選擇回收率79
• 2.3 分解動(dòng)力學(xué)79-99
• 2.3.1 保存血液中利多卡因及其代謝產(chǎn)物MEGX和GX的分解動(dòng)力學(xué)79-89
• 2.3.2 分解動(dòng)力學(xué)方程和參數(shù)89-99
• 3 討論99-101
• 結(jié)論101-102
• 參考文獻(xiàn)102-105
• 綜述105-114
• 參考文獻(xiàn)111-114
• 致謝114-115
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果115-116
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷116

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 黃志勝,陳學(xué)秀;硬膜外導(dǎo)管誤入蛛網(wǎng)膜下腔3例報(bào)告[J];福建醫(yī)藥雜志;1999年01期

2 燕炯,

本文編號(hào)：349149