發(fā)布時間：2017-04-20 16:23

  本文關(guān)鍵詞：磷霉素氨丁三醇散對慢性細(xì)菌性前列腺炎大鼠的治療作用及機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景慢性前列腺炎(chronic prostatitis,CP)是泌尿男科最常見的疾病之一,多見于成年男性,其發(fā)病率較高。大約50%的男性一生中的某個時刻均出現(xiàn)過前列腺炎的癥狀。CP病因復(fù)雜,遷延不愈,復(fù)發(fā)率高,主要表現(xiàn)為骨盆區(qū)域疼痛不適、排尿異常、性功能異常及全身癥狀等,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。目前CP的病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全明了,可能的發(fā)病原因及機(jī)制包括病原體感染、自身免疫異常、物理因素、化學(xué)因素、氧化應(yīng)激、尿液返流、精神心理因素、神經(jīng)內(nèi)分泌因素等。CP發(fā)病機(jī)制多樣,目前多采用綜合療法治療。CP現(xiàn)有的治療藥物主要包括抗生素、α-受體阻滯劑、非甾體類抗炎鎮(zhèn)痛藥、植物制劑、中醫(yī)中藥等。其中抗生素主要以喹諾酮類、磺胺類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素為主。磷霉素(fosfomycin, FOM)相對分子質(zhì)量小,與血漿蛋白結(jié)合率低,吸收快,滲透性強(qiáng),分布較廣泛,組織濃度在腎臟、膀胱、前列腺內(nèi)較高。口服磷霉素氨丁三醇散(fosfomycin tromethamine,FT)可以有效的預(yù)防經(jīng)尿道前列腺切除術(shù)后的細(xì)菌感染,并減少喹諾酮類抗生素的使用,使細(xì)菌對喹諾酮類抗生素的耐藥性減少。在經(jīng)直腸超聲引導(dǎo)的前列腺活檢中,FOM也可以作為術(shù)前預(yù)防用藥,可以有效預(yù)防術(shù)后尿路感染。此外,有報(bào)道顯示口服FOM可以在前列腺組織中達(dá)到有效的抑菌濃度。而FOM也成功治療過耐喹諾酮類抗生素的大腸埃希菌所致的前列腺膿腫患者。給予1例耐萬古霉素腸球菌引起的前列腺炎患者口服FT也同樣獲得了滿意療效。白介素6(interleukin 6, IL-6)、白介素8(interleukin 8, IL-8)、腫瘤壞死因子a(tumor necrosis factor α, TNF-α)等炎性細(xì)胞因子是由免疫細(xì)胞、炎癥細(xì)胞(如單核巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等)分泌的、具有一定調(diào)控功能的生物活性蛋白多肽。它們可以通過自分泌、旁分泌等方式介導(dǎo)免疫細(xì)胞間的相互作用。CP患者的前列腺按摩液(expressed prostatic secretion, EPS)中可出現(xiàn)細(xì)胞因子表達(dá)水平的變化,如IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10等細(xì)胞因子的異常,且這些細(xì)胞因子的表達(dá)水平與CP癥狀及治療反應(yīng)之間有一定的相關(guān)性,表明細(xì)胞因子參與了CP的發(fā)生發(fā)展,并為CP的免疫治療奠定一定的基礎(chǔ)。目前認(rèn)為,CP患者體內(nèi)抗炎與促炎細(xì)胞因子水平存在失衡,前列腺的炎癥是以細(xì)胞因子為中介產(chǎn)生的連鎖反應(yīng)。FOM除了具有直接殺滅細(xì)菌的作用,還具有抑制炎癥反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)等非殺菌作用。因此,本課題旨在利用大腸埃希菌誘導(dǎo)大鼠慢性細(xì)菌性前列腺炎(chronic bacterial prostatitis,CBP)模型,并探討FT治療大鼠CBP的療效及可能作用機(jī)制。目的1、給予SD大鼠經(jīng)尿道注入標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌大腸埃希菌建立大鼠CBP模型,探討FT對CBP大鼠前列腺組織病理學(xué)的影響；2、探討FT對CBP大鼠前列腺組織內(nèi)細(xì)菌含量的影響；3、探討FT對CBP大鼠前列腺組織內(nèi)IL-6、IL-8、TNF-α表達(dá)水平的影響；4、通過以上研究,探討FT治療大鼠CBP的療效及其作用機(jī)制,為臨床上治療CBP奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)及提供理論依據(jù)。方法將雄性SD大鼠隨機(jī)分為7組,每組10只。A組：空白對照組(假手術(shù)組)；B組：模型對照組；C組：陽性對照組(左氧氟沙星組,100 mg/kg/d,30 d)；D組：FT低劑量組(200 mg/kg/d,14d);E組：FT低劑量組(200 mg/kg/d,7d);F組：FT高劑量組(300 mg/kg/d,14 d);G組：FT高劑量組(300 mg/kg/d,7d),各組均采用灌胃給藥。將SD大鼠稱重后,用乙醚麻醉。將提前配置好的細(xì)菌懸液0.2ml(細(xì)菌濃度1×108細(xì)胞/m1)經(jīng)導(dǎo)管緩慢注入尿道前列腺部,空白對照組以同樣方法注入0.2ml無菌生理鹽水,全程注意無菌操作。術(shù)后常規(guī)飼養(yǎng)4周。4周后確認(rèn)造模成功,按前述方法用藥。每組于末次給藥后,稱量,麻醉后切開腹部,觀察前列腺組織外觀及粘連情況,于無菌冰冷的生理鹽水中剝離前列腺,用濾紙吸干,稱重,記錄。取部分前列腺,制備前列腺病理組織切片,HE染色后鏡下觀察前列腺組織病理變化情況；取部分前列腺于無菌條件下制作10%的組織勻漿,采用連續(xù)倍比稀釋,涂平板菌落計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)各組大鼠前列腺組織中的細(xì)菌菌落數(shù)；使用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)檢測各組大鼠前列腺組織勻漿中IL-6, IL-8,TNF-α表達(dá)水平的改變情況。使用SPSS 13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量結(jié)果以x±SD表示,多個樣本均數(shù)比較先行方差齊性檢驗(yàn),方差齊者組間比較使用One-Way ANOVA,方差不齊進(jìn)行秩和檢驗(yàn),兩兩比較使用LSD檢驗(yàn)。P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.SD大鼠一般情況共造模大鼠60只,造模成功43只,成功率71.7%。因各種原因共排除大鼠17只。造模后A組(假手術(shù)組)大鼠一般狀況好,進(jìn)食、活動正常,毛發(fā)有光澤；B組(模型組)大鼠表現(xiàn)出不同程度的精神萎靡,懶動,毛發(fā)無光澤凌亂,活動減少,喜扎堆。陽性對照組及FT治療組術(shù)后也表現(xiàn)出精神萎靡,懶動,毛發(fā)無光澤凌亂,活動減少,喜扎堆,但隨著藥物使用時間的延長,大鼠狀況好轉(zhuǎn),活動逐漸增多,毛發(fā)恢復(fù)光澤。2.各組大鼠前列腺情況肉眼觀察A組大鼠前列腺色澤淡紅、腺體組織質(zhì)軟,有彈性,表面光滑無結(jié)節(jié),與周圍其他組織無粘連,容易分離。B組大鼠前列腺色澤暗紅,欠光澤,質(zhì)地較硬或有結(jié)節(jié),彈性差,個別前列腺有化膿,與周圍組織有粘連。其余各組前列腺狀況介于A組與B組間。其中C、D、F組及G組前列腺腺體質(zhì)地較柔軟,有光澤,無結(jié)節(jié)、化膿,有彈性,與周圍組織無粘連；E組前列腺腺體與周圍組織有部分粘連,偶可觸及結(jié)節(jié),彈性稍差。3.各組大鼠前列腺組織病理學(xué)改變A組大鼠前列腺組織結(jié)構(gòu)完整,腺上皮細(xì)胞排列整齊,腺腔內(nèi)可見較多染色為粉紅色的分泌物,間質(zhì)未見水腫,有少量纖維組織,偶見極少量炎性細(xì)胞浸潤；B組大鼠前列腺腺腔狹窄,部分腺腔萎縮、閉塞,腺上皮細(xì)胞有不同程度的破壞,腺腔內(nèi)分泌物明顯減少,間質(zhì)內(nèi)可見大量纖維組織增生,腺泡腔內(nèi)及組織間隙內(nèi)可見大量炎性細(xì)胞浸潤；C組大鼠前列腺腺腔結(jié)構(gòu)基本完整,未見基底膜破壞,間質(zhì)內(nèi)纖維組織少量增生,可見少量炎性細(xì)胞浸潤；D組大鼠前列腺腺腔結(jié)構(gòu)較完整,未見明顯破壞,間質(zhì)內(nèi)可見少量纖維組織增生及炎性細(xì)胞浸潤；E組大鼠前列腺局部組織結(jié)構(gòu)未見破壞,間質(zhì)及腺腔有中等量的纖維組織增生及炎性細(xì)胞浸潤；F組大鼠前列腺腺腔結(jié)構(gòu)較完整,未見基底膜破壞,間質(zhì)內(nèi)纖維組織少量增生,可見少量炎性細(xì)胞浸潤；G組大鼠前列腺腺腔結(jié)構(gòu)基本完整,未見基底膜破壞,間質(zhì)內(nèi)偶見纖維組織少量增生及炎性細(xì)胞浸潤。4.各組大鼠前列腺組織中菌落計(jì)數(shù)情況采用平板菌落計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)前列腺組織中的細(xì)菌含量,每塊組織按1g計(jì)算,求出樣品細(xì)菌總數(shù),記為CFU/g,取對數(shù)值,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與B組(模型組6.44±0.71)菌落計(jì)數(shù)相比,各組(C組2.77±0.84；D組2.97±0.73：E組3.20±0.62；F組2.75±0.85；G組3.02±1.06)菌落計(jì)數(shù)均顯著減少(P0.01)；與C組(陽性對照組)菌落計(jì)數(shù)相比,E組菌落計(jì)數(shù)顯著增多(P0.01),其他各治療組菌落計(jì)數(shù)與C組比較均無顯著性差異(P0.05)。5.各組大鼠前列腺組織中IL-6、IL-8、TNF-α含量改變情況ELISA測定結(jié)果顯示：與空白對照組比較,模型組大鼠前列腺組織勻漿中的IL-6、IL-8、TNF-α含量均明顯升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或0.01)；與模型組比較,各治療組大鼠前列腺組織勻漿中的IL-8、TNF-α含量明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或0.01)；各治療組大鼠前列腺組織勻漿的IL-6、IL-8、TNF-α含量與陽性對照組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；F組大鼠前列腺組織勻漿中的IL-6的表達(dá)量較模型組顯著減少(P0.05),其余治療組及陽性對照組前列腺組織勻漿中的IL-6的表達(dá)與模型組比較均無顯著性差異(P0.05),但較模型組均有下降趨勢。結(jié)論1、采用經(jīng)尿道插入PE10導(dǎo)管(插入深度約2.5 cm),并緩慢注入標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌大腸埃希菌(濃度約1×108細(xì)胞/ml,0.2 m1)至尿道前列腺部,4周后大鼠CBP模型成功建立；2、FT通過直接抑制前列腺內(nèi)細(xì)菌,可以達(dá)到治療大鼠CBP的目的；3、FT通過抑制炎癥反應(yīng)等非殺菌作用抑制IL-6、IL-8、TNF-α的表達(dá),減輕前列腺組織的炎癥反應(yīng),修復(fù)破壞的組織結(jié)構(gòu),達(dá)到治療大鼠CBP的目的,為臨床研究提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)；4、綜上所述,FT通過清除CBP大鼠前列腺內(nèi)的細(xì)菌、直接抑制前列腺內(nèi)細(xì)胞因子(TNF-α、IL-8、IL-6)的表達(dá)以及可能通過減少細(xì)菌脂多糖對前列腺內(nèi)炎癥細(xì)胞的刺激作用以達(dá)到治療CBP的目的,有可能成為治療CBP大鼠的一個選擇。
【關(guān)鍵詞】：慢性細(xì)菌性前列腺炎 磷霉素氨丁三醇散 菌落計(jì)數(shù) 白介素6 白介素8 腫瘤壞死因子α
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R697.33
【目錄】：

• 摘要3-8
• ABSTRACT8-16
• 前言16-20
• 第一章 FT對CBP大鼠前列腺組織病理學(xué)的影響20-26
• 第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料、試劑和儀器20-21
• 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法21-23
• 第三節(jié) 大鼠前列腺一般狀況及病理組織學(xué)檢測23-26
• 第二章 FT對CBP大鼠前列腺組織中細(xì)菌含量的影響26-30
• 第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料、試劑和儀器26
• 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法26-28
• 第三節(jié) 大鼠前列腺細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果28-30
• 第三章 FT對CBP大鼠前列腺組織中IL-6、IL-8、TNF-α含量的影響30-38
• 第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料、試劑和儀器30
• 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法30-36
• 第三節(jié) 大鼠前列腺組織勻漿IL-6、IL-8、TNF-α含量檢測結(jié)果36-38
• 第四章 討論38-46
• 第五章 全文小結(jié)46-48
• 參考文獻(xiàn)48-56
• 附錄56-58
• 中英文縮略詞表58-60
• 綜述60-72
• 參考文獻(xiàn)66-72
• 碩士研究生期間發(fā)表論文情況72-74
• 致謝74-76

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 明愛民;沈?qū)W成;周占松;宋波;;納米細(xì)菌對大鼠前列腺的慢性致炎作用[J];華南國防醫(yī)學(xué)雜志;2009年03期

  本文關(guān)鍵詞：磷霉素氨丁三醇散對慢性細(xì)菌性前列腺炎大鼠的治療作用及機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：319081