本文關(guān)鍵詞：煙酸對糖尿病視網(wǎng)膜病變保護作用及其機制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察煙酸對鏈脲佐菌素(STZ)誘導的糖尿病視網(wǎng)膜病變是否具有保護作用,并探討相關(guān)的作用機制。方法:健康雄性6-8周C57BL/6J小鼠48只,隨機分為正常對照組、糖尿病造模組、煙酸干預(yù)組,每組16只。糖尿病造模組和煙酸干預(yù)組采用連續(xù)5天腹腔注射50mg/kg鏈脲佐菌素(STZ)制作糖尿病小鼠模型,煙酸干預(yù)組在糖尿病模型4周月后喂食含煙酸(0.5%,w/w)4周,其余兩組喂食不含煙酸的同樣食物。煙酸干預(yù)4周后,將小鼠深度麻醉,行心臟灌注去除血管中血液成分,摘取小鼠眼球,去除眼前節(jié),然后進行固定、蔗糖梯度脫水、包埋、冰凍切片,通過免疫熒光染色檢測各組視網(wǎng)膜中NADPH氧化酶4(Nox4)、NADPH氧化酶2(Nox2)、3-硝基酪氨酸(3-NT)和細胞間粘附分子(ICAM-1)的表達情況;取視網(wǎng)膜組織通過蛋白免疫印跡技術(shù)檢測NADPH氧化酶4(Nox4)和NADPH氧化酶2(Nox2)蛋白含量表達情況的變化;蛋白免疫印跡技術(shù)檢測各組小鼠視網(wǎng)膜滲漏的白蛋白含量及各組小鼠視網(wǎng)膜緊密連接蛋白ZO-1和Occludin含量;熒光標記的Concanavalin A灌注染色檢測煙酸對糖尿病視網(wǎng)膜血管白細胞粘附的影響;視網(wǎng)膜鋪片claudin-5免疫熒光染色檢測各組小鼠視網(wǎng)膜中血管緊密連接破壞情況。結(jié)果:免疫熒光染色顯示糖尿病組NADPH氧化酶4(Nox4)、3-NT和ICAM-1表達明顯升高,而煙酸處理組Nox4、3-NT和ICAM-1表達較糖尿病組下降;從蛋白水平上看,糖尿病組Nox4和Nox2的含量較正常對照組明顯升高,煙酸作用后可逆轉(zhuǎn)這種升高,使Nox4和Nox2的表達下降;western blot結(jié)果顯示糖尿病情況下視網(wǎng)膜中白蛋白含量較正常對照組顯著升高,而煙酸干預(yù)組視網(wǎng)膜中白蛋白含量較糖尿病組明顯降低;western blot結(jié)果顯示糖尿病情況下視網(wǎng)膜緊密連接蛋白ZO-1和Occludin含量較正常對照組顯著減少,而糖尿病后煙酸干預(yù)可使上述蛋白含量較糖尿病組明顯升高;白細胞粘附試驗顯示糖尿病組小鼠視網(wǎng)膜血管上粘附的白細胞數(shù)量較正常對照組小鼠升高,而糖尿病煙酸干預(yù)組小鼠視網(wǎng)膜血管上粘附的白細胞數(shù)量較糖尿病組有所下降;視網(wǎng)膜鋪片claudin-5免疫熒光染色示正常小鼠視網(wǎng)膜內(nèi)有較多的claudin-5表達,糖尿病狀態(tài)下視網(wǎng)膜claudin-5表達減少,而煙酸干預(yù)后視網(wǎng)膜claudin-5表達較糖尿病小鼠上升。結(jié)論:本研究表明煙酸對糖尿病視網(wǎng)膜病變具有保護作用,其機制可能通過抗炎癥及抗氧化機制來實現(xiàn)。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病視網(wǎng)膜病變 煙酸 炎癥反應(yīng) 氧化應(yīng)激
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R587.2;R774.1
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-11
• 第1章 前言11-14
• 第2章 材料與方法14-26
• 2.1 材料14-19
• 2.1.1 動物實驗14
• 2.1.2 抗體14
• 2.1.3 蛋白免疫印跡14-15
• 2.1.4 免疫熒光15
• 2.1.5 白細胞黏附實驗15
• 2.1.6 視網(wǎng)膜鋪片免疫熒光染色15-16
• 2.1.7 溶液配制16-19
• 2.1.8 實驗儀器19
• 2.2 實驗方法19-25
• 2.2.1 小鼠糖尿病模型的建立19-20
• 2.2.2 煙酸食物制備20
• 2.2.3 Western blot檢測20-23
• 2.2.4 免疫熒光法23-24
• 2.2.5 視網(wǎng)膜血管白細胞粘附的定量檢測24
• 2.2.6 視網(wǎng)膜血管claudin-5 免疫熒光染色24-25
• 2.3 統(tǒng)計學分析25-26
• 第3章 結(jié)果26-36
• 3.1 各組小鼠血糖及體重比較26-27
• 3.2 煙酸抑制STZ誘導的糖尿病小鼠視網(wǎng)膜中Nox4和Nox2的表達27-29
• 3.3 煙酸抑制STZ誘導的糖尿病小鼠視網(wǎng)膜中 3-硝基酪氨酸（3-NT）的表達29-30
• 3.4 煙酸抑制STZ誘導的糖尿病小鼠視網(wǎng)膜中ICAM-1 的表達30-31
• 3.5 煙酸抑制STZ誘導的糖尿病小鼠視網(wǎng)膜血管白細胞粘附31-32
• 3.6 煙酸減輕STZ誘導的糖尿病小鼠視網(wǎng)膜血管滲漏32-33
• 3.7 煙酸抑制STZ誘導的糖尿病小鼠視網(wǎng)膜血管緊密連接的破壞33-36
• 3.7.1 煙酸抑制STZ誘導的糖尿病小鼠視網(wǎng)膜血管Claudin-5 表達缺失33-34
• 3.7.2 煙酸抑制STZ誘導的糖尿病小鼠視網(wǎng)膜血管ZO-1 表達下降34-35
• 3.7.3 煙酸抑制STZ誘導的糖尿病小鼠視網(wǎng)膜血管Occludin表達下降35-36
• 第4章 討論36-42
• 第5章 結(jié)論42-43
• 致謝43-44
• 參考文獻44-50
• 綜述50-57
• 參考文獻54-57

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉鶇,榮翱;視網(wǎng)膜細胞凋亡相關(guān)疾病及其治療進展[J];同濟大學學報(醫(yī)學版);2004年05期

2 ;美研究新成就:借仿生視網(wǎng)膜可復明[J];中國眼鏡科技雜志;2004年07期

3 孫曉東,張皙,許迅,余彰,陳榮家;實驗性視網(wǎng)膜脫離時神經(jīng)生長因子對視網(wǎng)膜的保護作用[J];中華眼科雜志;2003年05期

4 陳少軍,陰正勤,高鈺琪;堿性成纖維細胞生長因子和血管內(nèi)皮生長因子在視網(wǎng)膜激光損傷修復中的作用[J];中華眼科雜志;2003年11期

5 吳文燦;形覺剝奪性近視眼視網(wǎng)膜調(diào)控機制研究進展[J];中國實用眼科雜志;2003年04期

6 孫曉東,張皙,許迅,陸紅芬,陳榮家;實驗性視網(wǎng)膜脫離復位后的視網(wǎng)膜細胞凋亡[J];眼科新進展;2005年04期

7 高永峰,郭希讓;視網(wǎng)膜芯片的研究和應(yīng)用進展[J];國外醫(yī)學.眼科學分冊;2005年02期

8 孫曉東;張皙;許迅;余彰;陳榮家;路長林;;實驗性視網(wǎng)膜脫離時神經(jīng)生長因子對視網(wǎng)膜細胞凋亡的干預(yù)作用[J];中華眼底病雜志;2006年05期

9 吳繼紅;張圣海;劉焰;陳霞芳;徐萍;吳小兵;黃倩;;1型及2型腺相關(guān)病毒對視網(wǎng)膜細胞轉(zhuǎn)導效率的比較研究[J];中華醫(yī)學雜志;2006年40期

10 孫曙光;李才銳;周智廣;姜德詠;;早期非肥胖性糖尿病小鼠視網(wǎng)膜細胞凋亡[J];國際眼科雜志;2007年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳麗娟;;經(jīng)瞳孔熱療后兔眼視網(wǎng)膜細胞凋亡的觀察[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術(shù)大會論文匯編[C];2007年

2 李濤;張虹;李貴剛;胡維琨;;地塞米松對大鼠缺血再灌注損傷視網(wǎng)膜中葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白—1表達的影響[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術(shù)大會論文匯編[C];2007年

3 張麗瓊;滕巖;崔浩;李明生;欒麗娟;劉學琴;;丹參對兔視網(wǎng)膜光損傷防治作用的實驗研究[A];中華中醫(yī)藥學會第五次眼科學術(shù)交流會論文匯編[C];2006年

4 楊霞;彭清華;張波濤;葉群如;江運長;;補陽還五湯加減干預(yù)激光損傷兔視網(wǎng)膜后視網(wǎng)膜縫隙連接蛋白Cx43表達的研究[A];中華中醫(yī)藥學會第七次眼科學術(shù)交流會論文匯編[C];2008年

5 盧艷;;增齡大鼠視網(wǎng)膜老化過程中各層細胞數(shù)目變化[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術(shù)大會論文匯編[C];2007年

6 李穎;胡運韜;馬汀;張?zhí)杖?馬志中;;視網(wǎng)膜石蠟切片Rhodopsin和CRALBP不同抗原修復方法的比較觀察[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術(shù)大會論文匯編[C];2007年

7 田田;朱小華;;玻璃體積血對兔視網(wǎng)膜的影響及維生素E保護作用的實驗研究[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術(shù)大會論文匯編[C];2007年

8 陳少強;陳瑞華;黃焱;張更;;糖尿病早期大鼠視網(wǎng)膜醛糖還原酶與視細胞超微結(jié)構(gòu)改變的相關(guān)性及氨基胍的保護作用[A];解剖學雜志——中國解剖學會2002年年會文摘匯編[C];2002年

9 鐘良玉;盧輝;徐俊麗;張雨;;光學相干斷層掃描對中藥治療年齡相關(guān)性黃斑變性療效評價的優(yōu)勢研究[A];慶祝浙江省中西醫(yī)結(jié)合學會成立三十周年論文集粹2011[C];2011年

10 劉學政;蕭鴻;;凋亡相關(guān)基因Bc12、Bax在早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的表達[A];解剖學雜志——中國解剖學會2002年年會文摘匯編[C];2002年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 本報記者 李嬋;移植流產(chǎn)兒視網(wǎng)膜引發(fā)倫理爭議[N];北京科技報;2004年

2 實習生 賈海;細胞可重造受損視網(wǎng)膜[N];科技日報;2007年

3 陰慧娟;仿生貓眼：失明者的希望[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2007年

4 錢錚;人胚胎干細胞可高效培養(yǎng)視網(wǎng)膜細胞[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2008年

5 記者 毛磊;美發(fā)明仿生視網(wǎng)膜[N];新華每日電訊;2003年

6 文欣;仿生視網(wǎng)膜：讓盲者看到光明[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

7 ;移植流產(chǎn)胎兒視網(wǎng)膜細胞手術(shù)引發(fā)爭議[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2004年

8 記者　 何屹;視網(wǎng)膜細胞移植有望使盲人重見天日[N];科技日報;2006年

9 陳丹;眼睛“干細胞”被成功喚醒[N];科技日報;2008年

10 通訊員 石明山邋記者 張兆軍;視網(wǎng)膜細胞可清晰顯現(xiàn)[N];科技日報;2008年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉磊磊;Sigma受體1在大鼠視網(wǎng)膜中的表達及與神經(jīng)節(jié)細胞AMPA受體的相互作用[D];復旦大學;2014年

2 楊子建;腺苷對實驗性青光眼視網(wǎng)膜Müller細胞鉀離子通道調(diào)控的研究[D];上海交通大學;2014年

3 費霏;缺血缺氧性視神經(jīng)視網(wǎng)膜損傷的分子機制研究[D];第四軍醫(yī)大學;2015年

4 曲巍;NgR/NR2B信號通路對糖尿病視網(wǎng)膜RGC的影響[D];廣西醫(yī)科大學;2015年

5 石珂;靶向抑制GLUT1對糖尿病視網(wǎng)膜病變的作用研究[D];南昌大學;2016年

6 劉忠虎;花背蟾蜍視網(wǎng)膜形態(tài)發(fā)育及視網(wǎng)膜生理活動對角膜誘導影響研究[D];蘭州大學;2011年

7 郭瑤;缺血性視神經(jīng)病變視網(wǎng)膜細胞凋亡信號轉(zhuǎn)導初步探討[D];中國醫(yī)科大學;2007年

8 邵玉紅;低水平鉛暴露對發(fā)育期大鼠視網(wǎng)膜、視神經(jīng)的影響[D];浙江大學;2007年

9 曾潔萍;燈盞細辛提取物對高壓狀態(tài)下視網(wǎng)膜保護作用的基因調(diào)控研究[D];成都中醫(yī)藥大學;2008年

10 田春雨;視網(wǎng)膜色素變性大鼠Müller細胞逆分化為視網(wǎng)膜前體細胞的研究[D];第三軍醫(yī)大學;2009年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 郝玲玲;基于Parylene-C柔性視網(wǎng)膜金微電極的電化學特性及植入可行性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2015年

2 李晶艷;Nrf2、HO-1在糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中的表達及tBHQ干預(yù)研究[D];四川醫(yī)科大學;2015年

3 陳果;煙酸對糖尿病視網(wǎng)膜病變保護作用及其機制的研究[D];南昌大學醫(yī)學院;2015年

4 劉t熡，

本文編號：312340